記事ID ： 46984

表皮細胞の増殖や線維芽細胞のコラーゲン合成促進にチーズホエイ細胞外小胞

メーカー名：株式会社LABバイオテック

「Extracellular Vesicles derived from Cheese Whey （チーズホエイ細胞外小胞）」は、乳酸菌開発をする北大発スタートアップ認定企業　株式会社LABバイオテックが北海道産チーズホエイ（乳清）より開発した「高純度のミルクエクソソームおよび乳酸菌由来EVs」です。

背景

Exosome（エクソソーム）は、ほとんどの細胞で分泌される直径50 nm ～ 150 nm 程度の膜小胞で、miRNAやmRNA、タンパク質、マイクロペプチドなどを内包し、由来する細胞や組織から離れた別の標的細胞や組織へと情報を伝達する役割を担うことが示唆されています。一方で、微生物からもエクソソームと同様のExtracellular Vesicles（EVs、細胞外小胞）を分泌しています。

特長

図1. ELISA法を用いたMilk Exosome
および乳酸菌EVsの測定

北海道産チーズホエイを原材料とした細胞外小胞（EVs）
牛由来Milk Exosomeおよび乳酸菌由来EVsを含有（図1）
多段階精製^※による高純度EVs画分（図2、3）
in vitro から in vivo まで幅広い実験に対応
バルク供給（受注生産）可能

※チーズホエイを高速遠心分離、0.22 μｍメンブランで除菌、限外濾過、イオン交換クロマトグラフィー法を順次行い、不純物である油分とタンパク質成分を取り除くことによりEVsを高純度化しています。

図2．チーズホエイの精製(SDS-PAGE)

図3．NanoSightを用いた粒度分布測定

使用方法

冷蔵庫から本商品を取り出し、室温に戻してください。
1 mL の無菌蒸留水を添加して、ゆっくり攪拌して溶解してください。溶解後は4℃で保管し、3ヶ月以内で使用してください。
上記溶液を1000倍から10000倍希釈して、培養液に添加してください。

商品データ

ヒト表皮細胞（HaCaT細胞）を低密度（3×10³ cells/well）で96well Plateにて培養し、チーズホエイ細胞外小胞（1000倍希釈溶液）、ヒト脂肪間葉系幹細胞由来Exosome 10%溶液（SC liposome）、ヒト歯髄間葉系幹細胞由来Exosome（DP Exo）をそれぞれ添加して、48時間培養後、4％パラホルムアルデヒドで固定し、ギムザ染色した（図4）。ギムザで染色されたコロニーの面積を、image Jを用いて定量化した（図5）。
Control（無添加）と比較して、チーズホエイ細胞外小胞添加群のコロニーの面積が増えていることが分かる。さらに、positiveコントロールのヒト歯髄間葉系幹細胞由来Exosome添加群にも迫る活性があることが分かった。

図4. HaCaT細胞培養後の顕微鏡画像

図5．HaCaT細胞培養後のコロニー面積

参考文献

Extracellular vesicles isolated from milk can improve gut barrier dysfunction induced by malnutrition, Mohamed Karim Maghraby, et al., Scientific Reports. 2021; 11:7635.
Potential therapeutic effects of milk-derived exosomes on intestinal diseases, Zhifu Cui, et al., J. Nanobiotechnology. 2023; 21:496.
Novel roles of bovine milk-derived exosomes in skin antiaging, Lu Lu, et al., J. Cosmet Dermatol. 2024; 23:1374-1385.