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新規酵素Evlのユニークな特性を応用した、一本鎖DNAの連鎖を誘導する世界初の試薬一本鎖DNAカテネーション試薬（ssDNA Catenating Solution）

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新規酵素Evlのユニークな特性を応用した、一本鎖DNAの連鎖を誘導する世界初の試薬です。

背景

DNAのカテネーション（閉環連鎖反応）はDNAの立体構造維持に関与する分子レベルの生命現象として注目され、遺伝子の複製や修復、転写における興味深いシーズとしてさかんに研究が行われています。これまでのカテネーションの研究はトポイソメラーゼを介した二重鎖DNAの構造解析が主流でしたが、近年DNA修復酵素の一種であるRad51と相互作用するタンパク質Evlがマグネシウムイオンの共存下で環状単鎖DNAをカテネーションするという新規機能が見いだされ、早稲田大学先進理工学部、胡桃坂教授の研究グループによって一本鎖DNAを切断、再結合するカテニング試薬が世界で初めて開発されました。本試薬は一本鎖DNAを操作する新規の研究ツールであると共に、遺伝子関連疾患発症のメカニズムの解明に新たな知見を与えることが期待されます。

ご提供者：早稲田大学先進理工学部教授　胡桃坂仁志先生

使用目的

図1 Composition for catenating single-stranded DNA

製品データ

図2 Single-stranded DNA catenation mediated by human EVL and a type I topoisomerase.
環状単鎖DNA（ΦX174 Virion DNA, NEB）と本試薬をマグネシウム存在下で混合し、37℃で1時間インキュベートした。除タンパク質処理したサンプルをアガロース電気泳動により分離した。分離後のDNAをSYBR® Gold（invitrogen）によって検出した。
＜反応条件＞本試薬2μl（反応溶液量10μl） 20μM ΦX174 Virion DNA,20 mM HEPES-NaOH（pH 7.5）,20mMNaCl, 1.5mM DTT,4% glycerol, 1mM MgCl₂