記事ID ： 12682

翻訳後修飾されたアセチル化リジンを幅広く検出
アセチルリジンマウスモノクローナル抗体

メーカー名：Cytoskeleton, Inc.

抗アセチルリジン（Acetyl Lysin）抗体は、リジン残基のε-アミノ基が、翻訳後修飾によってアセチル化されたタンパク質を認識・検出します。

Cytoskeleton社は、独自のアセチル化タンパク質混合物を使用して、幅広くアセチル化タンパク質を検出できる、認識能の高い抗アセチル化リジン抗体を開発しました。IP（免疫沈降法）、WB（ウエスタンブロット）、ChIP（クロマチン免疫沈降）、IF（蛍光抗体法）でご使用いただけます。

背景

タンパク質のアセチル化は、同時翻訳または翻訳後修飾（PTM）として起こります（1）。同時翻訳によるアセチル化は、約85%の哺乳動物タンパク質のN末端で起こり、不可逆的で、タンパク質の安定化、局在化、合成に重要であると考えられています（1）。翻訳後のアセチル化は、リジン残基のε-アミノ基で起こり、可逆的で、クロマチン構造、転写、代謝、シグナル伝達、細胞骨格調節を含む複数の細胞イベントにおける重要な調節因子として知られる、非常に動的なPTMです（2-3）。これまでに、4,000を超えるタンパク質が、PTMアセチル化のターゲットとして同定されています（3）。本抗体は、翻訳後修飾されたアセチル化リジンを検出します。

アプリケーション

ウェスタンブロット

アセチル化BSAのウェスタンブロット

本抗体は 10 ng の化学的にアセチル化されたBSAを認識し、感度は他社製品と同等であった。他社製品と異なり、アセチル化されていないBSAに交差反応性を示さない。

免疫沈降

ヒストンタンパク質の免疫沈降

本抗体と他社製品を使用して、ヒストンタンパク質のIPを行った。IP実験において、本抗体は明らかに優位性を示した。1チューブで約20回のIPアッセイに使用できる。

免疫蛍光法

アセチル化された細胞質および核タンパク質の免疫蛍光染色

ヒト類表皮癌 A431細胞を、TSAで処理し、染色を行った。（上）TSA未処理、（下）TSA処理（5 mM、12 時間）。アセチル化された細胞質および核タンパク質を緑色蛍光で可視化した。未処理のコントロールに対し、TSA処理したサンプルでは、アセチル化された微小管ネットワークがはっきりと観察できる。核の蛍光強度は、核内にアセチル化タンパク質が多量に存在することを示す。

ChIP

アセチルリジン抗体によるChIP

クロマチンをA431細胞から調製し、TSA（5 mM、4 時間）処理を行った。細胞を 1% ホルムアルデヒドで10分間固定し、本抗体（1:100希釈）を用いて、酵素でせん断されたクロマチンを免疫沈降した。ハウスキーピング遺伝子GAPDHのプロモーター領域をプライマー対で増幅し、PCR産物を 2% アガロースゲル電気泳動で解析した。

参考文献

Bogdan P. and Sherman F. 2002. The diversity of acetylated proteins. Genome Biol. 3 (5): reviews 0006.
Lundby A. et al. 2012. Proteomic analysis of lysine acetylation sites in rat tissues reveals organ specificity and cellular patterns. Cell Reports 2:419-431.
Sadoul K. et al. 2010. The tale of protein lysine acetylation in the cytoplasm. J. Biomed. Biotech. 2011:1-15.
Golemis EA et. Al, Protein-Protein Interactions, CSHLP, 2005, p67

アセチルリジンマウスモノクローナル抗体

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Anti Acetyl Lysine (Trial size), (Mouse) , 3C6.08.20	CYT	AAC01-S	25 UL [1 x 25 μl]	￥34,000
Anti Acetyl Lysine, (Mouse) , 3C6.08.20	CYT	AAC01	200 UL [2 x 100 μl]	￥125,000
Anti Acetyl Lysine (Mouse)	CYT	AAC02	2*100 UL	￥125,000
Anti Acetyl Lysine (Trial size) (Mouse)	CYT	AAC02-S	1*25 UL	￥34,000
Anti Acetyl Lysine (Mouse)	CYT	AAC03	2*100 UL	￥125,000
Anti Acetyl Lysine (Trial size) (Mouse)	CYT	AAC03-S	1*25 UL	￥34,000
Anti Acetyl Lysine (Mouse) Horseradish Peroxidase	CYT	AAC03-HRP	1*100 UL	￥141,000
Anti Acetyl Lysine (Trial size) (Mouse) Horseradish Peroxidase	CYT	AAC03-HRP-S	1*25 UL	￥48,000