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記事ID : 42894
研究用

ウイルス感染細胞の確認に 抗double-stranded RNA抗体

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背景

Nordic-MUbio社に属するSciconsでは、植物ウイルス検出用のdouble-stranded RNA(dsRNA)分子に結合する4種類のマウスモノクローナル抗体(J2、J5、K1、K2クローン)をご提供しています。これらの抗dsRNA抗体では、二本鎖RNA (複製中間体)でウイルスの二本鎖RNA中間体を検出可能です。

商品ラインアップ

J2 クローン

J2クローンはdsRNA検出において広く使用されるようになってきました。本クローンは当初は植物ウイルスの検出に用いられていましたが、ウイルス感染細胞において、positive strand RNAウイルスがdsRNAを生成したことがJ2クローンを用いて確認され、2006年にWeber氏によって発表されると、様々なシステムに用いられるようになりました。J2クローンは、C型肝炎ウイルス、デングウイルス、ライノウイルス、チクングニアウイルス、狂犬病ウイルス、ポリオウイルス、豚コレラウイルス、ブロムモザイクウイルスなど多くのウイルスのdsRNA中間体を検出可能です。J2クローンは、電子顕微鏡法、免疫蛍光染色、免疫組織染色、ドットブロット、ELISAなどのイムノキャプチャー法にご使用いただけます。また、未知の病原体が細菌性かウイルス性か検証することも可能です(Richardson et al., 2010)。さらに、in vitroで合成したmRNAからdsRNAが除去されているかを検証する目的で使用された例もあります(Kariko et al., 2011)。

商品データ

クローン J2
アイソタイプ IgG2a kappa
免疫動物 マウスモノクローナル抗体
アプリケーション ELISA
Immuno-affinity-chromatography
Immunocytochemistry
Immunohistochemistry
使用例 C型肝炎ウイルス、デングウイルスなどの二本鎖RNA (複製中間体)の検出

NOR_10010500

図1
J2クローンを用いて、dsRNA (緑色で標識)とC型肝炎ウイルスコアタンパク質(赤色で標識)の共局在を明らかにし、推定ウイルス集合部位の位置を示した(矢印)。

NOR_10010500

図2
J2クローンを用いた免疫蛍光顕微鏡検査で、デングウイルスに感染したHuH-7細胞において、ウイルス複製複合体のマーカーであるdsRNA (赤で標識)を検出した。細胞DNAをDAPI (青)で標識した。
(Anwar et al., 2011)

 

NOR_10010500

図3
免疫電子顕微鏡像。感染後7時間で固定したSARS-CoV感染Vero E6細胞の、二重膜小胞(DMV)におけるdsRNA (黒点)の存在量を示す。Gはゴルジ複合体、Mはミトコンドリア、Nは核を示す。
(Knoops et al., 2008)

NOR_10010500

図4
L. guyanensis 寄生虫のRNAウイルス(LRV)からドットブロット法でdsRNAを検出した。サンプルは、LRV陽性のLg4147LRVhighおよびLRV陰性のLg4147LRVneg(1000〜10倍希釈)である。
(Zangger et al., 2013)

 
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti double-stranded RNA,  (Mouse) , J2詳細データ NOR 10010200 200 UG
¥116,000
Anti double-stranded RNA,  (Mouse) , J2詳細データ NOR 10010500 500 UG
¥181,000

J5 クローン

J5クローンは、広く用いられているJ2クローンと同様の親和性、特異性でdsRNAを認識しますが、アイソタイプが異なります(IgG2b kappa)。アイソタイプの選択肢が増えることで、免疫染色でdsRNAと他のマーカーを共染色する際など、より利用しやすくなります。

商品データ

クローン J5
アイソタイプ IgG2a kappa
免疫動物 マウスモノクローナル抗体
アプリケーション ELISA
Immunoblotting
Immunocytochemistry
Immunohistochemistry
使用例 IPNVなどの二本鎖RNA (複製中間体)の検出
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti double-stranded RNA,  (Mouse) , J5詳細データ NOR 10040200 200 UG
¥116,000
Anti double-stranded RNA,  (Mouse) , J5詳細データ NOR 10040500 500 UG
¥181,000

K1 クローン

K1クローンは、広く用いられているJ2抗体と同様の親和性でdsRNAを認識することができます。さらに、本抗体は細胞および組織中のdsRNAを組織学的および細胞学的に検出することができます。J2クローンでは満足な結果が得られない場合に、交差反応を解消し、バックグラウンドを改善できる可能性があります。 K1クローンは、肝炎ウイルス、タイラーマウス脳脊髄炎ウイルスまたは日本脳炎ウイルスのような多様なウイルスのdsRNA中間体検出に使用可能です。Poly I:C (Polyinosinic-polycytidylic acid) を検出する場合は、合成ポリリボヌクレオチドに対する親和性の理由から、J2クローンよりもK1クローンの使用をおすすめします (Schönborn et al., 1991)。K1クローンは、免疫蛍光染色、フローサイトメトリー、ドットブロット、ELISAなどにご使用いただけます。

商品データ

クローン K1
アイソタイプ IgG2a kappa
免疫動物 マウスモノクローナル抗体
アプリケーション ELISA
Flow Cytometry
Immuno-affinity-chromatography
Immunoblotting
Immunocytochemistry
Immunohistochemistry
使用例 肝炎ウイルス、日本脳炎ウイルスなどの二本鎖RNA (複製中間体)の検出

NOR_10020500

図5
K1クローンを用いて、ポリI:Cで処理したMEF中のdsRNAを検出した(右図)。dsRNAの存在は、eIF2aのリン酸化、つまりタンパク質合成停止を伴う(左図)。
(Clavarino et al., 2012)

 
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti double-stranded RNA,  (Mouse) , K1詳細データ NOR 10020200 200 UG
¥116,000
Anti double-stranded RNA,  (Mouse) , K1詳細データ NOR 10020500 500 UG
¥181,000

K2 クローン

K2クローンはIgMアイソタイプを有します。K2クローンは主に、J2クローンとK1クローンでは不十分な特殊な用途に使われます。K2クローンは主としてELISAおよびサンドイッチELISAに用いられています。一般に、K2クローンは、IgG アイソタイプ以外の抗dsRNA抗体が必要とされる用途において使用することができます。

商品データ

クローン K2
アイソタイプ IgM kappa
免疫動物 マウスモノクローナル抗体
アプリケーション ELISA
dsRNA-immunoblotting
Sandwich ELISA
Immunofluorescence
使用例 ヘリックスの長さが40 bp以上のdsRNAの検出/IgGアイソタイプを避けたい場合など
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti double-stranded RNA,  (Mouse) , K2詳細データ NOR 10030005 5 ML
¥116,000
Anti double-stranded RNA,  (Mouse) , K2詳細データ NOR 10030010 10 ML
¥181,000

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¥74,000

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品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (J2 based)詳細データ NOR 10613002 200 TEST
¥178,000
Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (J2 based)詳細データ NOR 10613005 500 TEST
¥305,000
Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (K1 based)詳細データ NOR 10623002 200 TEST
¥178,000
Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (K1 based)詳細データ NOR 10623005 500 TEST
¥305,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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