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生細胞中の活性酸素種（ROS）と活性窒素種（RNS）を同時に直接リアルタイムで検出することができる、蛍光顕微鏡検査法に用いるROS/RNS検出キットです。
使用目的
トータルROS検出用として酸化ストレス検出試薬（緑色蛍光）、スーパーオキシド検出試薬（橙色蛍光）、一酸化窒素（NO）検出試薬（赤色蛍光）の3種類の蛍光プローブの組み合わせにより、生細胞中のスーパーオキシドやROSレベルを測定できます。
また、キットにはポジティブコントロールとして、ROS とNO産生の誘導因子のPyocyaninとL-arginineをそれぞれ用意し、またネガティブコントロールとして有名なスカベンジャーであるN-acetyl-L-cysteineとc-PTIO を用意しました。
ROS/RNS検出キットはCELLestial® シリーズの1つであり、蛍光分子プローブを用いる試薬やキットは生細胞の分析に広く使用できるよう、設計されています。CELLestial® シリーズは再現性が求められる場合のイメージング用、特に共焦点顕微鏡法やフローサイトメトリー、蛍光相関分光法（FCS）に最適です。
特長
- 生細胞中の活性酸素種（ROS) と活性窒素種（RNS）をモニター
- スーパーオキシド、一酸化窒素、ペルオキシ亜硝酸を識別<
構成内容
- NO 検出試薬 (Red)
- 酸化ストレス検出試薬 (Green)
- スーパーオキシド検出試薬 (Orange)
- NO Inducer (L-Arginine)
- ROS Inducer (Pyocyanin)
- NO Scavenger (c-PTIO)
- ROS Inhibitor (N-acetyl-Lcysteine)
- 洗浄バッファー
その他
検出波長：
酸化ストレス（緑）：Ex/Em: 490 nm/ 525nm
スーパーオキシド（橙）：Ex/Em: 550 nm/ 620nm
一酸化窒素（赤）：Ex/Em: 650 nm/ 670nm
アプリケーション例
HeLa 細胞を3 種類の蛍光プローブと反応させ（2 時間、37℃）、各試薬で誘導した（20 分間、37℃）
よくある質問 Q&A（一部抜粋）
いいえ、できません。マニュアル通り生細胞をすぐに観察する必要があります。
目的の活性酸素種が互いに反応して、予想されるシグナルを減衰させることがあります。 ROS は複雑な相互作用システムです。あるコンポーネントを別のコンポーネントがブロックし、シグナルの減少または増加を引き起こすことがあります。シグナル経路と培地などに含まれるすべてのコンポーネントをチェックしてください。
1. インヒビター濃度が低すぎる、もしくは高すぎる
インヒビター濃度が低すぎると ROS 誘導剤による ROS 産生に作用しないことがあります。またインヒビター濃度が高過ぎると酸化ストレス自体を引き起こし、蛍光シグナルを産生してしまいます。それぞれの細胞に合わせてインヒビターの濃度と前処理時間を最適化してください。
2. 検出のタイムポイントが適切でない
インヒビターの処理時間が長すぎる場合や ROS の誘導剤濃度が高すぎる場合、インヒビター効果が不十分になることがあります。検出時間と ROS 誘導剤の濃度を最適化してください。
3. 顕微鏡のフィルターセットが適切でない
それぞれの蛍光波長に適切なフィルターを使ってください。
- 酸化ストレス検出：フルオロセインと互換性のあるフィルターセット（Ex/Em: 490/525 nm）
- Superoxidate 検出：ローダミンと互換性のあるフィルターセット（Ex/Em: 550/620 nm）
- NO 検出：Cyanine 5と互換性のあるフィルターセット (Ex/Em: 650/670 nm)
下記よりそのほかのFAQもご覧いただけます。
ROS/RNS 検出キット
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
ROS-ID(R) ROS/RNS detection kit |
ENZ | ENZ-51001-200 | 1 KIT [200 assay] |
￥80,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
- 「ROS/RNS 検出キット」は、下記のカテゴリーに属しています。
