記事ID ： 41757

細胞外小胞・エクソソームの簡便な単離に evGAG Extracellular vesicles Purification Kit

メーカー名：HansaBioMed OU

evGAG Extracellular vesicles Purification Kitは、血清、血漿ならびに尿サンプルから細胞外小胞の分離（沈殿）が可能な精製試薬です。分離（沈殿）反応は、分離液（evGAG）と細胞外小胞に含まれるグリコサミノグリカン（GAG）との相互作用に基づいています。
精製した細胞外小胞は、核酸抽出（→シーケンス解析）や、ウエスタンブロットやフローサイトメトリーによるタンパク質解析に使用できます（電子顕微鏡観察や、機能解析には適していません）。

特長

迅速かつシンプルなプロセス（細胞外小胞回収まで20分）
サンプル必要量　0.5 mL～2 mL
超遠心分離機不要、卓上遠心分離機で使用可能

作業工程

図1. 作業工程

使用例　evGAGによる尿サンプルの細胞外小胞分離

図2
細胞外小胞マーカーであるAlixのウエスタンブロット解析では、evGAGで分離した細胞外小胞の濃度が他社試薬で分離した場合に比べて高いことが確認された。一方、特異的な標的ではないウロモデュリン（THP）は、evGAGで分離された細胞外小胞では他社試薬で分離した場合に比べて濃度が低かった。

図3
細胞外小胞を含むペレットをPBSに再懸濁し、ナノ粒子追跡分析（NTA）で分析した。健常ドナー由来検体（UHD）、および健康なドナー由来検体にKRASG13D変異を有する大腸癌細胞株から精製した細胞外小胞をスパイクインしたもの（USP）の両サンプルにおいて、本商品を用いて分離した細胞外小胞（それぞれ8.8×10¹¹および1.2×10¹²）では、競合品を用いて分離した細胞外小胞（それぞれ4.6×10¹¹および6.9×10¹¹）と比較して、ナノ粒子濃度が2倍であった。

参考文献

Extracellular Vesicles-Based Biomarkers Represent a Promising Liquid Biopsy in Endometrial Cancer
Carolina Herrero　et al. Cancers (Basel) . 2019 Dec 12;11(12):2000.
doi: 10.3390/cancers11122000.