超遠心法と比較して約10倍のEV回収量 EXORPTION®　細胞外小胞（EV）精製用スピンカラムキット

EXORPTION® は細胞外小胞（EV）を簡単・迅速・高純度に精製可能な創薬研究用キットです。

ISEV2025で発表されました

【ISEV2025 発表内容】
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ほぼすべての生細胞から分泌され、さまざまな生理機能に重要な役割を果たす細胞外小胞（EV）は、近年、研究者の関心を集めています。 超遠心法や高分子沈殿法など、EV分離のための多くのプロトコルが開発されてきましたが、従来法にはそれぞれ特有の長所と短所が指摘されています。

今回、HAS（Hydrogel Adsorption Separation）法という新規EV精製技術を紹介します。

本法は、ハイドロゲル表面への吸着を利用して、高純度のEVを選択的に精製するものです。HAS法により各種検体から得られたEVは、プロテオミクスやフローサイトメトリーを含む複数の解析手法に適用可能で、基礎研究から臨床応用まで幅広いEV研究において有用性が示唆されています。

学術論文に掲載されました

本製品の核となる技術「ハイドロゲル吸着分離（HAS）法」の原理と、各種生体試料における精製パフォーマンスに関する論文が、米国化学会（ACS）の『ACS Applied Bio Materials』誌に採択されました。

Ryota Kajihara, Kyohei Tobinaga, Riho Tanigaki, Koichi Ute, and Tatsuya Tominaga
Hydrogel-Based Extracellular Vesicle Isolation Method from Various Biological Solutions
ACS Appl. Bio Mater. 2026, 9, 1, 287-297

超遠心法と比較して、以下の特長があります。

• 約10倍のEV回収量と高い純度を達成
• 約1/10の処理時間で簡便
• 約1/100の夾雑物量で精製可能

本方法は血液、尿、細胞培養液などの生体由来試料とハイドロゲルビーズを接触させるところから始まります。ビーズは生体由来試料を吸収するよう設計しており、30 分程度でビーズが膨潤します。微視的に見るとビーズ表面は網目のようになっており、吸収の過程で液体が網目を抜けてビーズ内に移動することで
　① 低分子夾雑物
　② EV
　③ 高分子夾雑物
の分離が起こります。低分子夾雑物は網目の中を通り抜け、ビーズ中に吸収されます。ビーズ表面がEV 親和成分で覆われているため、EV は網目に捕捉されます。高分子夾雑物はビーズ表面と強く相互作用しないため、次の洗浄工程にて洗い流されます。特に高分子夾雑物は検体のpH によって立体構造（コンホメーション）やゼータ電位が変化するため、検体の個体差によって精製度が変化することがありますが、本方法はビーズがバッファー効果を有しており、検体は一定のpH に収束するため、精製度のバラつきが少ないです。
プロセス上の特長は以上になりますが、本方法の最大の特長はEV 回収能力にあり、ゴールドスタンダードの超遠心法と比較して10 倍以上の回収量を示します。この特長は体液中に極微量に含まれるEV を高感度に検出することを可能にするだけでなく、創薬の開発においてもEV を大量に得るために有用な技術となります。また、一部のアフィニティ精製法と異なり、Elution Buffer に試薬由来の化学物質を含まないことやEV の脂質二重膜構造の破壊がない点なども創薬においては大きなメリットとなります。

図　EXORPTION®法によるEVの精製

EXORPTION® は細胞外小胞を簡単・迅速・高純度に精製可能な創薬研究用キットです。回収したEVは粒子数の確認、EV マーカー、核酸等の評価、生理活性の確認等、各種分析や実験に利用可能です。

EXORPTION® にて精製したEVの粒子径・粒子数の評価

ヒト尿・血清サンプルおよびHEK293 細胞培養上清サンプルからEV を回収し、ナノ粒子トラッキング解析（NTA）により粒子径・粒子数を評価

ELISA によるCD9⁺/CD63⁺ EV の定量

SDS-PAGE による不純物の評価

EV からのmiRNA の回収

Q&A

関連情報

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