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20,000種類以上のヒトプロモーター活性を検出！デュアルレポーター設計により、サンプル間比較可能！
GeneCopoeia（ジーンコピア）社では、ヒト（約20,000クローン）およびマウス（約18,000クローン）遺伝子のプロモーター活性を解析できるよう、Gaussia ルシフェラーゼ（GLuc）をレポーターとして組み入れたプロモーターレポータークローンをご用意しています。
使用目的
GeneCopoeia（ジーンコピア）社 GLuc-ON™ プロモーターレポータークローンは、生細胞から安定的に分泌されるGaussia ルシフェラーゼ（GLuc） をレポーターとして使用し、プロモーターの活性を検出することができます。
図1. プロモータークローンは、1.2 〜 1.5 kb のインサートを持ち、この配列は、遺伝子の転写開始点から200bpの下流領域と約1.5kb の上流領域の配列に相当します。シスエンハンサーエレメントはクローニング配列内に存在することが予想され、レポーターアッセイで検出されるルシフェラーゼ活性が、実際のプロモーター調節を反映すると考えられます。
原理
図2. GLuc-ON™ プロモーターレポータークローンの原理
特長
- 生細胞アッセイ
：GLucは分泌型ルシフェラーゼのため、細胞の溶解操作は不要です。 - デュアルレポーターシステム
：分泌型のGLuc とSEAP をレポーターとして採用。トランスフェクションの正規化によりサンプル間の比較が可能。 - 高感度
：GLuc は、firefly やRenilla ルシフェラーゼと比較して1,000倍高感度。 - 高品質&便利なフォーマット
：全てのプロモータークローンは配列確認済み、すぐにトランスフェクション可能。 - 迅速アッセイ
：迅速で実際の活性に近い値が得られます。 - ハイスループット対応
：パスウェイ研究にも最適、多数のサンプルを処理可能。
【Gaussiaルシフェラーゼ】
改良したGLuc（mGLuc） をレポーター遺伝子を用いていますので、極めて安定したシグナルが得られます。ヒト化野生型GLuc（wtGLuc） で観察されるシグナルの早期減衰を改善します。
図3. mGLuc（青線） とwtGLuc（赤線） のシグナルの安定性
左：安定剤入りアッセイバッファー
右：通常のアッセイバッファー（Secrete-Pair™ dual luminescence assay kit 使用）
【デュアルレポーターシステム】
2種類のレポーター遺伝子を持つベクターをご用意しています。2つめの分泌性アルカリフォスファターゼ（SEAP） レポーターは、内部標準としてご利用いただけ、トランスフェクションの正規化が行えますので、正確なサンプル間比較が可能です。
図4. H1B1B とHEK293T 細胞における正規化済プロモーター活性
Dual-reporter promoter clones またはコントロールを2つの細胞系にduplicate にトランスフェクション。サンプルはトランスフェクション24 時間後（HEK293T） あるいは48 時間後（H1B1B） に分析。NEG（プロモーター配列不含）とEMPTY（ 空ベクター）はネガティブコントロールとして使用。
ベクター一覧
8種類のベクターをご用意しています。実験にあわせてお好みのベクターをお選びください。
| ベクター | レポーター遺伝子 | トラッキング遺伝子 | 選択マーカー | ベクタータイプ |
| pEZX-PG02 | Gaussia luciferase (GLuc) | N/A* | Puromycin | 非ウイルス |
| pEZX-PG04 | Gaussia luciferase (GLuc) | Secreted alkaline phosphatase(SEAP) | Puromycin | 非ウイルス |
| pEZX-PF02 | eGFP | N/A* | Puromycin | 非ウイルス |
| pEZX-PM02 | mCherry | N/A* | Puromycin | 非ウイルス |
| pEZX-LvPG04 | Gaussia luciferase (GLuc) | Secreted alkaline phosphatase(SEAP) | Puromycin | レンチウイルス |
| pEZX-LvPG02 | Gaussia luciferase (GLuc) | N/A* | Puromycin | レンチウイルス |
| pEZX-LvPF02 | eGFP | N/A* | Puromycin | レンチウイルス |
| pEZX-LvPM02 | mCherry | N/A* | Puromycin | レンチウイルス |
*SEAP発現ベクター(品番：SEAP-PA01)を別途ご利用いただけます。
プロモーターレポータークローン
| 品名 | 種 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|---|
| GLuc -ON Promoter Reporter Clone | Human | GCP | HPRMxxxx-PGy | 1clone |
ご照会 |
| GLuc -ON Promoter Reporter Clone | Mouse | GCP | MPRMxxxx-PGy | 1clone |
ご照会 |
※xxxxはターゲット、yはベクタータイプにより数字が異なります。下記商品検索方法にてご確認ください。
※1cloneは、10ug purified plasmidとしてお届けいたします。
【商品検索方法】
ジーンコピア社ホームページ上のGLuc-ON™ Promoter Reporter Clones 紹介ページ
(https://www.genecopoeia.com/product/gluc-on-promoter-reporter-clones/) を開きます。
”Search Clone”のアイコンをクリックし、検索ページを開きます。
■キーワード検索
[1] ご希望の分野を選択します。
[2] gene symbol、aliases、description、nucleotide accession、Entrez gene ID、カタログ/ 製品I D、specific field、homology 検索等のキーワードで検索できます。
右の "Search"ボタンを押すと検索が開始され、品番が表示されます。
希望販売価格はご照会ください。
各種コントロール商品
| 用途 | 品名 | 対応ベクター | 品番 | |
|---|---|---|---|---|
| トランスフェクション正規化用 | SEAP発現クローン |
Seacreted Alkaline Phosphatase(SEAP) Expression clone | pEZX-PA01 | SEAP-PA01 |
| デュアルレポーターベクター用 | ポジティブコントロール (ハウスキーピング遺伝子プロモーター) |
EF1α positive control clone | pEZX-PG04 | EF1A-PG04 |
| GAPDH positive control clone | pEZX-PG04 | GAPDH-PG04 | ||
| ネガティブコントロール | Negative control clone(non-promoter sequence) | pEZX-PG04 | NEG-PG04 | |
| シングルGLucレポーターベクター用 | ポジティブコントロール (ハウスキーピング遺伝子プロモーター) |
EF1α positive control clone | pEZX-PG02 | EF1A-PG02 |
| GAPDH positive control clone | pEZX-PG02 | GAPDH-PG02 | ||
| ネガティブコントロール | Negative control clone(non-promoter sequence) | pEZX-PG02 | NEG-PG02 | |
| シングルGFPレポーターベクター用 | ポジティブコントロール (ハウスキーピング遺伝子プロモーター) |
EF1α positive control clone | pEZX-PF02 | EF1A-PF02 |
| GAPDH positive control clone | pEZX-PF02 | GAPDH-PF02 | ||
| ネガティブコントロール | Negative control clone(non-promoter sequence) | pEZX-PF02 | NEG-PF02 | |
※包装はすべて1clone、希望販売価格はご照会ください。
Secrete-Pair™ デュアルルミネッセンスアッセイキット
2 種類のレポータータンパク質、GLuc とSEAP の活性を測定するキットです
※詳細はこちらをご参照ください。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit |
GCP | LF031 | 100 RXN |
￥34,000 |
| Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit |
GCP | LF032 | 300 RXN |
￥93,000 |
| Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit |
GCP | LF033 | 1000 RXN |
￥244,000 |
Secrete-Pair™ Gaussia ルミネッセンスアッセイキット
GLucのみを検出するシングルルシフェラーゼアッセイキットです。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| Secrete-PairTM Gaussia Luminescence Assay Kit |
GCP | LF061 | 100 RXN |
￥19,000 |
| Secrete-PairTM Gaussia Luminescence Assay Kit |
GCP | LF062 | 1000 RXN |
￥98,000 |
【関連商品】
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
