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研究用

Gaussia ルシフェラーゼ(GLuc)プロモータークローンGLuc-ON™ Promoter Reporter Clone

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20,000種類以上のヒトプロモーター活性を検出!デュアルレポーター設計により、サンプル間比較可能!

GeneCopoeia(ジーンコピア)社では、ヒト(約20,000クローン)およびマウス(約18,000クローン)遺伝子のプロモーター活性を解析できるよう、Gaussia ルシフェラーゼ(GLuc)をレポーターとして組み入れたプロモーターレポータークローンをご用意しています。

使用目的

GeneCopoeia(ジーンコピア)社 GLuc-ON™ プロモーターレポータークローンは、生細胞から安定的に分泌されるGaussia ルシフェラーゼ(GLuc) をレポーターとして使用し、プロモーターの活性を検出することができます。
GLuc-ON™ プロモーターレポータークローン
図1. プロモータークローンは、1.2 〜 1.5 kb のインサートを持ち、この配列は、遺伝子の転写開始点から200bpの下流領域と約1.5kb の上流領域の配列に相当します。シスエンハンサーエレメントはクローニング配列内に存在することが予想され、レポーターアッセイで検出されるルシフェラーゼ活性が、実際のプロモーター調節を反映すると考えられます。

原理

GLuc-ON™ プロモーターレポータークローンの原理
図2. GLuc-ON™ プロモーターレポータークローンの原理

特長

  • 生細胞アッセイ
    :GLucは分泌型ルシフェラーゼのため、細胞の溶解操作は不要です。
  • デュアルレポーターシステム
    :分泌型のGLuc とSEAP をレポーターとして採用。トランスフェクションの正規化によりサンプル間の比較が可能。
  • 高感度
    :GLuc は、firefly やRenilla ルシフェラーゼと比較して1,000倍高感度。
  • 高品質&便利なフォーマット
    :全てのプロモータークローンは配列確認済み、すぐにトランスフェクション可能。
  • 迅速アッセイ
    :迅速で実際の活性に近い値が得られます。
  • ハイスループット対応
    :パスウェイ研究にも最適、多数のサンプルを処理可能。

【Gaussiaルシフェラーゼ】
改良したGLuc(mGLuc) をレポーター遺伝子を用いていますので、極めて安定したシグナルが得られます。ヒト化野生型GLuc(wtGLuc) で観察されるシグナルの早期減衰を改善します。

mGLuc(青線) とwtGLuc(赤線) のシグナルの安定性
図3. mGLuc(青線) とwtGLuc(赤線) のシグナルの安定性
左:安定剤入りアッセイバッファー
右:通常のアッセイバッファー(Secrete-Pair™ dual luminescence assay kit 使用)


【デュアルレポーターシステム】
2種類のレポーター遺伝子を持つベクターをご用意しています。2つめの分泌性アルカリフォスファターゼ(SEAP) レポーターは、内部標準としてご利用いただけ、トランスフェクションの正規化が行えますので、正確なサンプル間比較が可能です。

H1B1B とHEK293T 細胞における正規化済プロモーター活性
図4. H1B1B とHEK293T 細胞における正規化済プロモーター活性
Dual-reporter promoter clones またはコントロールを2つの細胞系にduplicate にトランスフェクション。サンプルはトランスフェクション24 時間後(HEK293T) あるいは48 時間後(H1B1B) に分析。NEG(プロモーター配列不含)とEMPTY( 空ベクター)はネガティブコントロールとして使用。

ベクター一覧

8種類のベクターをご用意しています。実験にあわせてお好みのベクターをお選びください。

ベクター レポーター遺伝子 トラッキング遺伝子 選択マーカー ベクタータイプ
pEZX-PG02 Gaussia luciferase (GLuc) N/A* Puromycin 非ウイルス
pEZX-PG04 Gaussia luciferase (GLuc) Secreted alkaline phosphatase(SEAP) Puromycin 非ウイルス
pEZX-PF02 eGFP N/A* Puromycin 非ウイルス
pEZX-PM02 mCherry N/A* Puromycin 非ウイルス
pEZX-LvPG04 Gaussia luciferase (GLuc) Secreted alkaline phosphatase(SEAP) Puromycin レンチウイルス
pEZX-LvPG02 Gaussia luciferase (GLuc) N/A* Puromycin レンチウイルス
pEZX-LvPF02 eGFP N/A* Puromycin レンチウイルス
pEZX-LvPM02 mCherry N/A* Puromycin レンチウイルス

*SEAP発現ベクター(品番:SEAP-PA01)を別途ご利用いただけます。

プロモーターレポータークローン

品名メーカー品番包装希望販売価格
GLuc -ON Promoter Reporter Clone Human GCP HPRMxxxx-PGy 1clone
ご照会
GLuc -ON Promoter Reporter Clone Mouse GCP MPRMxxxx-PGy 1clone
ご照会

xxxxはターゲット、yはベクタータイプにより数字が異なります。下記商品検索方法にてご確認ください。
※1cloneは、10ug purified plasmidとしてお届けいたします。

【商品検索方法】
ジーンコピア社ホームページ上のGLuc-ON™ Promoter Reporter Clones 紹介ページ
(https://www.genecopoeia.com/product/promoter-reporter-clones/) を開きます。

”Search Clone”のアイコンをクリックし、検索ページを開きます。

キーワード検索
[1] ご希望の分野を選択します。
[2] gene symbol、aliases、description、nucleotide accession、Entrez gene ID、カタログ/ 製品I D、specific field、homology 検索等のキーワードで検索できます。
右の "Search"ボタンを押すと検索が開始され、品番が表示されます。
希望販売価格はご照会ください。

各種コントロール商品

メーカー略号:GCP
用途 品名 対応ベクター 品番
トランスフェクション正規化用 SEAP発現クローン
Seacreted Alkaline Phosphatase(SEAP) Expression clone pEZX-PA01 SEAP-PA01
デュアルレポーターベクター用 ポジティブコントロール
(ハウスキーピング遺伝子プロモーター)
EF1α positive control clone pEZX-PG04 EF1A-PG04
GAPDH positive control clone pEZX-PG04 GAPDH-PG04
ネガティブコントロール Negative control clone(non-promoter sequence) pEZX-PG04 NEG-PG04
シングルGLucレポーターベクター用 ポジティブコントロール
(ハウスキーピング遺伝子プロモーター)
EF1α positive control clone pEZX-PG02 EF1A-PG02
GAPDH positive control clone pEZX-PG02 GAPDH-PG02
ネガティブコントロール Negative control clone(non-promoter sequence) pEZX-PG02 NEG-PG02
シングルGFPレポーターベクター用 ポジティブコントロール
(ハウスキーピング遺伝子プロモーター)
EF1α positive control clone pEZX-PF02 EF1A-PF02
GAPDH positive control clone pEZX-PF02 GAPDH-PF02
ネガティブコントロール Negative control clone(non-promoter sequence) pEZX-PF02 NEG-PF02

※包装はすべて1clone、希望販売価格はご照会ください。

Secrete-Pair™ デュアルルミネッセンスアッセイキット

2 種類のレポータータンパク質、GLuc とSEAP の活性を測定するキットです
※詳細はこちらをご参照ください。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit詳細データ GCP LF031 100 RXN
¥32,000
Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit詳細データ GCP LF032 300 RXN
¥87,000
Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit詳細データ GCP LF033 1000 RXN
¥221,000

Secrete-Pair™ Gaussia ルミネッセンスアッセイキット

GLucのみを検出するシングルルシフェラーゼアッセイキットです。
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Secrete-PairTM Gaussia Luminescence Assay Kit詳細データ GCP LF061 100 RXN
¥18,000
Secrete-PairTM Gaussia Luminescence Assay Kit詳細データ GCP LF062 1000 RXN
¥92,000

【関連商品】

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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