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本キットは、インフルエンザウイルスAまたはインフルエンザウイルスBの感染力を機能的に力価測定するイムノプラークアッセイキットです。
背景
インフルエンザウイルスはエンベロープウイルスで、主に内部の核タンパク質 (NP) の保存された抗原の違いに基づいて、A、B、C の 3 つのクラスに分類できます。ヒトに臨床的に関連するのは、インフルエンザ A と B のみです。
細胞培養単層でのプラークアッセイは、感染性ウイルスと抗ウイルス物質の定量化に最も一般的な方法です。これらのアッセイでは、感染性ウイルス粒子はそれぞれ、プラークと呼ばれる感染細胞の局所領域を形成する条件下で増殖します。プラークは、一般的な細胞染色によって検出された死細胞または破壊された細胞の領域として現れます。
セルバイオラボ社のインフルエンザ A またはBイムノプラークアッセイキットは、ウイルス感染性の力価を正確に測定するシステムを提供します。従来のプラークアッセイとは対照的に、プラークを感染細胞の領域として検出するために、免疫染色で特異的な抗インフルエンザ A またはB 核タンパク質抗体が使用されます。本キットには、12 ウェル プレートで最大 60 回の滴定に十分な試薬が含まれています。
特長
- インフルエンザウイルスAまたはBの感染力を機能的に力価測定
- 特異的抗インフルエンザAまたはB核タンパク質抗体を含む
構成内容
- DMEM 培地 (5X)
- CytoSelect™ 寒天粉末
- TPCK-トリプシン (100X)
- 抗インフルエンザ A 核タンパク質抗体 または 抗インフルエンザ B 核タンパク質抗体 (1000X)
- 二次抗体、HRPコンジュゲート（1000X）
- DAB基質（25X）
- 希釈液（10X）
アッセイ原理
1 日目: MDCK 細胞を 12 ウェルまたは 6 ウェル プレートに播種
↓
2 日目: MDCK 細胞にインフルエンザ ウイルスの段階希釈液を感染させ、オーバーレイ培地を添加
↓
5 日目: 抗インフルエンザ ウイルス核タンパク質抗体で染色
↓
陽性プラークを数え、ウイルス力価を計算
データ例
以下の図は典型的な滴定結果を示しています。以下のデータは参考目的でのみご使用ください。実際の結果を解釈するためにこのデータを使用しないでください。
インフルエンザA イムノプラークアッセイキット
図1. インフルエンザ A ウイルスに感染した MDCK 細胞におけるプラーク形成
インフルエンザ A ウイルスを使用して MDCK 細胞を 24 〜 72 時間感染させた。感染後 24 時間、48 時間、72 時間で、アッセイ プロトコルに記載されているとおりに抗インフルエンザ A 核タンパク質抗体を用いて免疫染色を実施した。
図2. MDCK 細胞におけるインフルエンザ A ウイルスの免疫プラーク アッセイ滴定
インフルエンザ A ウイルス培養液のさまざまな希釈度を使用して、MDCK 細胞を 72 時間感染させた。抗インフルエンザ B 核タンパク質抗体を用いて、免疫染色 (A) とクリスタル バイオレット染色 (B) を実施した。
インフルエンザB イムノプラークアッセイキット
図3. インフルエンザ B ウイルスに感染した MDCK 細胞におけるプラーク形成
インフルエンザ B ウイルスを使用して MDCK 細胞を 24 〜 72 時間感染させた。感染後 24 時間、48 時間、72 時間で、アッセイ プロトコルに記載されているとおりに抗インフルエンザ B 核タンパク質抗体を用いて免疫染色を実施した。
図4. MDCK 細胞におけるインフルエンザ B ウイルスの免疫プラーク アッセイ滴定
インフルエンザ B ウイルス培養液のさまざまな希釈度を使用して、MDCK 細胞を 72 時間感染させた。抗インフルエンザ B 核タンパク質抗体を用いて、免疫染色 (A) とクリスタル バイオレット染色 (B) を実施した。
インフルエンザA イムノプラークアッセイキット
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
Influenza A Immunoplaque Assay Kit   |
CBL | VPK-5189 | 60 ASSAY |
￥107,000 |
インフルエンザB イムノプラークアッセイキット
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| Influenza B Immunoplaque Assay Kit |
CBL | VPK-5190 | 60 ASSAY |
￥107,000 |
関連商品
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| RSV Fusion Protein ELISA Kit |
CBL | VPK-5170 | 96 ASSAY |
￥197,000 |
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CBL | VPK-5171 | 96 ASSAY |
￥197,000 |
| Influenza A Nucleoprotein ELISA Kit |
CBL | VPK-5174 | 96 ASSAY |
￥197,000 |
| Influenza B Nucleoprotein ELISA Kit |
CBL | VPK-5175 | 96 ASSAY |
￥197,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
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