HEK293に特化！ウィルスパッケージングや浮遊細胞にも LipoD293™ In Vitro DNA トランスフェクション試薬

脂質結合技術を活用したLipoD293™（Ver. II）は、独自のエンハンサーを用いて特別に設計・配合されています。導入困難な哺乳類細胞はもちろん、HEK293由来細胞に特化したトランスフェクション試薬です。

図1．LipoD293™（Ver. II）によって促進される遺伝子送達の模式図

HEK293トランスフェクション、組換えタンパク質、レンチウイルス/ウイルスベクター作製、ゲノム編集、抗体産生など

• 初代培養細胞などトランスフェクションが困難な細胞に最適
• ウィルスパッケージングにも最適！極めて高いウイルス力価を実現
• 大きなDNA（最大180 kb）のトランスフェクションにも効果的
• 浮遊培養HEK293細胞（293F、293Hなど）でも優れた性能を発揮
• 高レベルの組換えタンパク質発現をサポート
• 293細胞において血清および抗生物質の存在下でも、トランスフェクション効率が向上
• 単一DNAトランスフェクションと複数DNA共トランスフェクションの両方で優れた性能を発揮

図2.各種トランスフェクション試薬を用いたタンパク質発現量比較
浮遊培養した293F細胞を用いたタンパク質産生におけるLipoD293™試薬と他社トランスフェクション試薬の比較。標準培養培地で培養した30 mLの293F細胞に、LipoD293™ In Vitro DNA Transfection Reagent (Ver. II) (20 µgプラスミドDNA)、他社製品 (30 µgプラスミドDNA)を用い、製造元の標準トランスフェクションプロトコルに従ってpEGFP-6xHisプラスミドをトランスフェクションした。トランスフェクション後48時間でGFP蛍光を可視化した（左パネル）。AはLipoD293、B/C/Dは他社製品を示す。その後、6xHisタグ付きGFPタンパク質をNi-NTAアフィニティーカラムで精製した。 5 µLの第1溶出画分をSDS-PAGEで分離し、続いてクーマシーブリリアントブルー染色を行った（右上パネルE）。レーン1はLipoD293、レーン2はタンパク質マーカー、レーン3/4/5が他社製品である。タンパク質収量は分光光度計を用いて定量した（右下パネルF）。

図3. レンチウイルス収量比較
レンチウイルス(LV)の生成における LipoD293™ (Ver. II) と他社製品の比較。3種の cDNA を LipoD293™ (Ver. II) と他社製品と共に 293FT 細胞へ共トランスフェクションした。GFP ベクター、pHR-SIN-cppt-CMVEWP を使用してLVの力価を測定した。1×10⁵ 個の 293F 細胞を 24 ウェルプレートに播種し、ベクター上清をそれぞれ 1 µl (上段パネル) と 10 µl (下段パネル) 添加した。5 日後、細胞を FACSに通した。「R2」と記載された箇所の右上付近が、形質導入された細胞集団を示す。 LipoD293™および他社製品を用いて生成されたLVの力価は、それぞれ8×10^6および3×10^6 tu/mlと定量された。

以下のプロトコールをご確認いただけます。

• 哺乳類細胞へのトランスフェクションに関する一般的なプロトコール
• 上級ユーザー向け簡易プロトコール
• HEK293T細胞におけるレンチウイルスパッケージングのためのプロトコール
• HEK293T細胞におけるAAVパッケージングのためのプロトコール
• HEK293A細胞におけるアデノウイルスパッケージングのためのプロトコール
• 浮遊培養293細胞およびCHO細胞へのトランスフェクションプロトコール
• 技術ノートとトランスフェクションのヒント

• 最新の引用文献はこちらをご参照ください。  文献情報(トップジャーナル含む) 　随時更新中！ 

※1.0 mLバイアル1本で、24ウェルプレートでは約666回、6ウェルプレートでは約333回のトランスフェクションが可能です。

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