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LysoView™は、生細胞内のリソソームの局在と形態を観察するための蛍光染色試薬です。染色後の洗浄が不要かつ無毒性 で、24〜72時間のリアルタイムイメージングが可能です。
特長
- 染色後の洗浄が不要で、生細胞中のリソソーム染色が可能
- 無毒性で24~72時間のリアルタイムイメージングが可能
| LysoView™ | 品番 | サイズ | Ex/Em (nm) | 検出チャンネル | 特徴 | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| LysoView™ 405 | 70066-T | 10 µL | 318, 400/464 | DAPI, Pacific™ Blue | ||
| 70066 | 50 µL | |||||
| LysoView™ 488 | 70067-T | 10 µL | 496/526 | GFP, FITC | ||
| 70067 | 50 µL | |||||
| LysoView™ 540 | 70061-T | 10 µL | 540/634 | Texas Red® | pH感受性 光安定性が低い |
|
| 70061 | 50 µL | |||||
| LysoView™ 550 | 70083-T | 10 µL | 542/567 | TRITC, Cy®3, PE | 光安定性が高い 洗浄後も細胞内に比較的保持 |
|
| 70083 | 50 µL | |||||
| Light-on LysoView™ 555 |
70060-T | 10 µL | 554/583 | TRITC, Cy®3, PE | UV照射で蛍光が可逆的に活性化 pH感受性 固定後も蛍光保持 |
|
| 70060 | 50 µL | |||||
| LysoView™ 594 | 70084-T | 10 µL | 585/634 | Texas Red® | 光安定性が高い 洗浄後も細胞内に比較的保持 |
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| 70084 | 50 µL | |||||
| LysoView™ 633 | 70058-T | 1 vial | 634/657 | Cy®5, APC | pH感受性 凍結乾燥 (再構成後2週間の期限) |
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| 70058 | 10 vials | |||||
| LysoView™ 640 | 70085-T | 10 µL | 640/671 | Cy®5, APC | ?洗浄後も細胞内に比較的保持 | |
| 70085 | 50 µL | |||||
| LysoView™ 650 | 70059-T | 10 µL | 650/675 | Cy®5, APC | 超解像顕微鏡 (SIM、STED)対応 | |
| 70059 | 50 µL | |||||
| LysoView™ 680 | 70086-T | 10 µL | 674/711? | Cy®5.5 | ||
| 70086 | 50 µL | |||||
図1. UV照射前後のリソソーム蛍光変化
HeLa細胞をLight-On LysoView™ 555 で染色。UV照射時のみ蛍光を観察。
図2. LysoView™ 540, 633のpH感受性
両色素はpH依存的に蛍光強度が変化し、低pHで蛍光が強くなる。
プロトコル
LysoView™
- LysoView™ 633 使用時は、事前に水で 1000 倍濃度ストック溶液を作製。他の色素はDMSO溶液のまま使用可能。
- LysoView色素を培養培地で希釈し、最終濃度 1Xに調整。
- 細胞から培地を除去し、LysoView色素を含む培地に置換。
- 37℃で15~30 分間（必要に応じて延長）インキュベート。
- 洗浄は不要で、製品表記の励起／蛍光条件で観察。
注意事項
- 色素の直接添加は一時的に高濃度となり、不均一な染色や細胞毒性の原因となるため非推奨。
- Light-On LysoView™ 555のみ染色後のホルムアルデヒド固定が可能。その他色素は固定不可。
Light-On LysoView™ 555
- Light-On LysoView™ 555を培養培地で希釈し、終濃度1 µMに調整。
- 細胞から培地を除去し、色素を含む培地に置換。
- 37℃で15~30 分間（必要に応じて延長）インキュベート。
- 洗浄は不要。DAPIフィルターを用いた UV 照射（5 秒以上）で蛍光を活性化し、その後、赤色蛍光チャネルで観察。
- 蛍光は数分で消えるが、UV照射で繰り返し再活性化可能。
注意事項
- 高濃度では UV 照射なしでも蛍光が見えることがあるため、濃度最適化が必要
- ホルムアルデヒド固定可能。固定によりUV照射なしでも蛍光を発する。
染色例
図3. 各種LysoView™ 色素の染色例。
HeLa生細胞を37℃で30 分間、1X LysoView™ 色素で染色。
図4. 長時間のライブセルイメージング。
LysoView™はMCF-7 生細胞で数日間良好に保持される。
図5.
ViaFluor® 405 Live Cell Microtubule Stain（青、微小管染色）と LysoView™ 540（赤）で染色したHeLa生細胞。
図6.
LysoView™ 650（マゼンタ）と MitoView™ Green（品番 70054、緑、ミトコンドリア染色）で染色したHeLa 生細胞。
図7.
図7. LysoView™ 633 は、LysoTracker® Deep Redよりも低バックグラウンドで特異的にリソソームを染色。
LysoView™ リソソーム蛍光染色試薬
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
※ CAS Registry Numbers have not been verified by CAS and may be inaccurate.
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