商品情報

記事ID : 14559
研究用

miRNA のcDNA を簡便に増幅 microScript microRNA cDNA 合成キット

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microScript microRNA cDNA 合成キットは、トータルRNA または濃縮済microRNA(miRNA)サンプルから cDNA を逆転写するためのキットです。

本製品は、all-in-one かつ ready-to-use のキットで、2x反応ミックスと microScript microRNA 酵素ミックスがセットになっています。NORGEN社のmicroScript 逆転写酵素は、モロニーマウス白血病ウイルス(M-MuLV;Moloney Murine Leukemia Virus)の変異型で、RNase H 活性が低減され、熱安定性が増加しています。

使用目的

microScript microRNA cDNA 合成キットは、2x反応ミックスと酵素ミックス、RNAテンプレートをシングルチューブで混合するだけのシンプルなワークフローが特長です。

次いで、サーマルサイクラーで反応させると、poly(A)tailは最初にRNAに付加され、続いてアダプタープライマーを用いてcDNA合成を行います。シングルチューブでの調製は、使いやすさに加えて優れた一貫性と感度を実現します。合成されたcDNAは、ユニバーサルPCRリバースプライマーとmicroRNA 配列を含むフォワードプライマーを用いて、PCRまたは qPCR に利用いただけます。シングルチューブでの cDNA 調製は、異なる microRNA を同時にいくつも PCR増幅する場合に有用です。さらに、トータルRNAからのcDNA 調製は、遺伝子特異的プライマーを用いて mRNAや長鎖RNAの PCRまたはqPCR検出にも使用することができるため、microRNA/ microRNAターゲットを並列で評価することを可能にします。

特長

  • 便利
     - ready-to-use のマスターミックスにテンプレートと酵素を加えるだけの逆転写酵素反応セットアップ
  • 一回のcDNA合成で、複数のmicroRNA、microRNAターゲットを解析
     - 各microRNA cDNA合成反応後に、異なるmicroRNA および microRNAターゲットをPCR検出
  • 時間の節約に
     - より少ないピペット操作で逆転写反応液調製が可能
  • 経済的
     - 反応に必要なものはすべてready-to-useマスターミックスに入っているので、酵素、dNTPsおよびバッファーの個別購入は必要ありません
  • 高感度・高収量
     - 最適化されたマスターミックスにより、高感度で高収量のPCR増幅を実現
  • ロバストな酵素
     - microScript逆転写酵素は、難しいテンプレートの増幅や高温反応における高い再現性を実現

構成内容


品番:54415
(12 反応)
品番:54410
(50 反応)
microScript microRNA 酵素ミックス 12 μL 50 μL
2x 反応ミックス 120 μL 500 μL
ユニバーサル PCR リバースプライマー 60 μL 250 μL
Nuclease-Free Water 1.25 mL 2 x 1.25 mL

測定データ

高感度でロバストな microRNA増幅
図1.高感度でロバストな microRNA増幅
microScript microRNA cDNA合成キットを用いて、200 ng - 2 pg の各RNA量でmicroRNAを増幅した。microScript microRNA cDNA合成キットをRT-qPCR 反応に利用し、Total RNA精製キットで分離したHeLa細胞由来のトータルRNAから ヒト miR-1246 と miR-21を増幅した。こられらのPCRターゲットは、幅広い範囲のいずれのRNAインプット量でも増幅された。

トータルRNA転写産物(microRNAs および mRNA)のロバストな逆転写
図2.トータルRNA転写産物(microRNAs および mRNA)のロバストな逆転写
microScript microRNA cDNA合成キットは、microRNA とmRNAや長鎖RNAなどを効率的に逆転写できるため、microRNAとmicroRNAターゲットを並列で解析できます。HeLa 細胞由来の RNA (200 ng) をテンプレートとしてcDNAを合成し、3つの異なるRNAのqPCR反応に使用した。上部のパネルは、miR-21(microRNA)、5S rRNA(RNA without poly-A tail)、S15(large mRNA)の増幅の成功を示す。下部のパネルは、3つのPCR増幅アンプリコンがユニークな融解曲線の特性を有することを示す。

TruScript microRNA cDNA 合成キット

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
microScript microRNA cDNA Synthesis Kit詳細データ NOG 54410 50 RXN
¥106,000
microScript microRNA cDNA Synthesis Kit詳細データ NOG 54415 12 RXN
¥26,000

[関連]microRNA (cel-miR-39) Spike-In Kit

構成内容

  • cel-miR-39 RNA
  • cel-miR-39 Forward PCR Primer
  • Nuclease-Free Water
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
microRNA (cel-miR-39) Spike-In Kit詳細データ NOG 59000 1 KIT
¥12,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

お問い合わせ

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