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高発現・低毒性を実現する次世代DNAベクター Minicircle DNA

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メーカー名：PlasmidFactory GmbH

Minicircle DNAは、プラスミドから抗生物質耐性遺伝子・複製起点（ori）・CpGモチーフなどの細菌由来バックボーンを除去し、目的遺伝子（GOI）と発現に必要な最小限の配列のみで構成した次世代型の遺伝子ベクターです。プラスミドDNAと比べて、低毒性で高い導入効率と発現量を実現します。

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PlasmidFactory社のMinicircle

PlasmidFactory独自の作製技術によりE. coli 内での組換え反応を厳密に制御し、目的配列を保持する Minicircle（MC）とバックボーンのみからなる Miniplasmidを分離します。結果として、極めて均一なモノマー型スーパーコイル（cccDNA）の Minicircle を高純度で提供可能です。基礎研究、前臨床試験、毒性試験など幅広い用途に対応した、高効率DNAを提供します。

図1. Minicircleの作製イメージ

特長

バクテリア由来のバックボーン配列が含まれないため、
- 免疫原性・DNA毒性が低い
- サイレンシングが起こりにくく、発現効率が高い
- AAV産生時の不要配列の混入（レトロパッケージング）を回避
小型かつモノマー型スーパーコイル構造によりトランスフェクション効率が高い
外来遺伝子の搭載サイズにほぼ制限なし

使用例

高い発現効率

Minicircle DNAは、同じ発現カセットを搭載したプラスミドDNAと比較して、より高い発現レベルを示すことが多数報告されています。

図2. Plasmid DNAとMinicircle DNAの発現効率の比較

高力価・高純度のAAV生産

図3. Minicircle DNAの利用による高力価・高純度なAAVの作製
（左図）Minicircle（MC.AAV-scGFP、MC.AAV-ssGFP）を用いると、72時間後の力価が3～4倍に向上した（同条件の従来プラスミド比）。 Kraemer et al., ESGCT Annual Congress 2021
（右図）vector plasmidおよびhelper plasmidをMinicircleに置換すると、AAV 調製中に検出されるプラスミド由来バックボーン配列が定量下限未満まで低減し、導入効率が 30 倍に向上した。 Schnödt et al., Molecular Therapy - Nucleic Acids (2016) 5, e355

レポーターMinicircle

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
MC3048 - MC.CMV-luc	PLF	MC3048	5 MG	お問い合わせ
MC3048 - MC.CMV-luc	PLF	MC3048	10 MG	お問い合わせ
MC3291 - MC.CMV-lacZ	PLF	MC3291	5 MG	お問い合わせ
MC3291 - MC.CMV-lacZ	PLF	MC3291	10 MG	お問い合わせ
MC3293 - MC.CMV-GFP	PLF	MC3293	5 MG	お問い合わせ
MC3293 - MC.CMV-GFP	PLF	MC3293	10 MG	お問い合わせ

AAV生産用Minicircle (ITR＋CMV promoter＋蛍光レポーター)

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
MC3051 - MC.AAV-ssGFP	PLF	MC3051	5 MG	お問い合わせ
MC3051 - MC.AAV-ssGFP	PLF	MC3051	10 MG	お問い合わせ
MC3064 - MC.AAV-scGFP	PLF	MC3064	5 MG	お問い合わせ
MC3064 - MC.AAV-scGFP	PLF	MC3064	10 MG	お問い合わせ

トライアルサイズ

レポーターMinicircleと通常のレポータープラスミドがセットになっており、Minicircleの検討にご使用いただけます。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
McBox^(R)luc (0.1 mg pCMV-luc, 0.1 mg MC.CMV-luc)	PLF	PFBOX101	1 SET	お問い合わせ
McBox^(R)GFP (0.1 mg pCMV-GFP, 0.1 mg MC.CMV-GFP)	PLF	PFBOX102	1 SET	お問い合わせ
McBox^(R)lacZ (0.1 mg pCMV-lacZ, 0.1 mg MC.CMV-lacZ)	PLF	PFBOX103	1 SET	お問い合わせ

【関連商品】

PlasmidFactoryはMinicircleに加えて、以下のベクター関連製品も提供しています。

レポータープラスミド

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
PF0450 - pUC21	PLF	PF0450	5 MG	￥276,000
PF0450 - pUC21	PLF	PF0450	10 MG	￥352,000
PF0451 - pUK21	PLF	PF0451	5 MG	￥276,000
PF0451 - pUK21	PLF	PF0451	10 MG	￥352,000
PF0464 - pCMV	PLF	PF0464	5 MG	￥276,000
PF0464 - pCMV	PLF	PF0464	10 MG	￥352,000
PF0461 - pCMV-luc	PLF	PF0461	5 MG	￥276,000
PF0461 - pCMV-luc	PLF	PF0461	10 MG	￥352,000
PF0462 - pCMV-lacZ	PLF	PF0462	5 MG	￥276,000
PF0462 - pCMV-lacZ	PLF	PF0462	10 MG	￥352,000
PF0463 - pCMV-GFP	PLF	PF0463	5 MG	￥276,000
PF0463 - pCMV-GFP	PLF	PF0463	10 MG	￥352,000

pEPitoプラスミド (S/MAR elements)

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
PF1160 - pEPito-EF1-EGFPLuc	PLF	PF1160	5 MG	￥276,000
PF1160 - pEPito-EF1-EGFPLuc	PLF	PF1160	10 MG	￥352,000
PF1161 - pEPito-CMV-EGFPLuc	PLF	PF1161	5 MG	￥276,000
PF1161 - pEPito-CMV-EGFPLuc	PLF	PF1161	10 MG	￥352,000
PF1162 - pEPito-CMV-EGFP-I-B	PLF	PF1162	5 MG	￥276,000
PF1162 - pEPito-CMV-EGFP-I-B	PLF	PF1162	10 MG	￥352,000
PF1163 - pEPito-EF1-EGFP-I-B	PLF	PF1163	5 MG	￥276,000
PF1163 - pEPito-EF1-EGFP-I-B	PLF	PF1163	10 MG	￥352,000
PF1164 - pEPito-EF1-EGFP	PLF	PF1164	5 MG	￥276,000
PF1164 - pEPito-EF1-EGFP	PLF	PF1164	10 MG	￥352,000
PF1165 - pEPito-CMV-EGFP-I-B-Δ	PLF	PF1165	5 MG	￥276,000
PF1165 - pEPito-CMV-EGFP-I-B-Δ	PLF	PF1165	10 MG	￥352,000
PF1166 - pEPito-EF1-EGFP-I-B-Δ	PLF	PF1166	5 MG	￥276,000
PF1166 - pEPito-EF1-EGFP-I-B-Δ	PLF	PF1166	10 MG	￥352,000

AAV生産用プラスミド（Helper / Packaging / Vector）

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
PF0400 - pDM	PLF	PF0400	5 MG	￥276,000
PF0400 - pDM	PLF	PF0400	10 MG	￥352,000
PF0401 - pDP1rs	PLF	PF0401	5 MG	￥276,000
PF0401 - pDP1rs	PLF	PF0401	10 MG	￥352,000
PF0402 - pDP2rs	PLF	PF0402	5 MG	￥276,000
PF0402 - pDP2rs	PLF	PF0402	10 MG	￥352,000
PF0403 - pDP3rs	PLF	PF0403	5 MG	￥276,000
PF0403 - pDP3rs	PLF	PF0403	10 MG	￥352,000
PF0404 - pDP4rs	PLF	PF0404	5 MG	￥276,000
PF0404 - pDP4rs	PLF	PF0404	10 MG	￥352,000
PF0405 - pDP5rs	PLF	PF0405	5 MG	￥276,000
PF0405 - pDP5rs	PLF	PF0405	10 MG	￥352,000
PF0406 - pDP6rs	PLF	PF0406	5 MG	￥276,000
PF0406 - pDP6rs	PLF	PF0406	10 MG	￥352,000
PF0431 - pDP1	PLF	PF0431	5 MG	￥276,000
PF0431 - pDP1	PLF	PF0431	10 MG	￥352,000
PF0421 - pDG	PLF	PF0421	5 MG	￥276,000
PF0421 - pDG	PLF	PF0421	10 MG	￥352,000
pDP3.2	PLF	PF0433.2	5 MG	￥276,000
pDP3.2	PLF	PF0433.2	10 MG	￥352,000
PF0434 - pDP4	PLF	PF0434	5 MG	￥276,000
PF0434 - pDP4	PLF	PF0434	10 MG	￥352,000
PF0435 - pDP5	PLF	PF0435	5 MG	￥276,000
PF0435 - pDP5	PLF	PF0435	10 MG	￥352,000
PF0436 - pDP6	PLF	PF0436	5 MG	￥276,000
PF0436 - pDP6	PLF	PF0436	10 MG	￥352,000
PF0478 - pDP8.ape	PLF	PF0478	5 MG	￥276,000
PF0478 - pDP8.ape	PLF	PF0478	10 MG	￥352,000
PF0439 - pDP9	PLF	PF0439	5 MG	￥276,000
PF0439 - pDP9	PLF	PF0439	10 MG	￥352,000
PF0422 - pDG(R484E/R585E)	PLF	PF0422	5 MG	￥276,000
PF0422 - pDG(R484E/R585E)	PLF	PF0422	10 MG	￥352,000
PF1451 - pAAV-ssGFP	PLF	PF1451	5 MG	￥276,000
PF1451 - pAAV-ssGFP	PLF	PF1451	10 MG	￥352,000
PF1500 - pAAV-scGFP	PLF	PF1500	5 MG	￥276,000
PF1500 - pAAV-scGFP	PLF	PF1500	10 MG	￥352,000