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記事ID : 36975
研究用

RNAscope™ を応用した、miRNA検出用試薬が新登場 ! miRNAscope™ in situ hybridization アッセイ

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RNAscope™ は、FFPE組織、凍結組織、培養細胞等のサンプル中のRNAを、独自のRNA in situ hybridization法により検出する技術です。

miRNAscope™は、RNAscope™ を応用した microRNA in situ hybridization 法で、従来の RNAscope™ では検出が難しかった短鎖 RNA(mature miRNA やアンチセンスオリゴヌクレオチド等の核酸医薬)を組織上で検出可能です。内在性 miRNA の局在解析や核酸医薬の生体内安定性評価にご利用いただけます。

特長

  • miRNA、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチドなどの短鎖RNA(17-50 nt)を検出可能
  • FFPE組織、新鮮/固定 凍結組織、培養細胞など様々なサンプルに対応
  • AP / Fast-REDで染色(マニュアル染色、自動染色)
  • 抗体を用いた免疫組織染色と組み合わせ可能

プロトコル

キット\使用サンプル FFPE,固定凍結,新鮮凍結*1 培養細胞(接着細胞)*2,*3
miRNAscope™ HD Reagent Kit - RED PDF PDF

*1:プロトコルにスチーマーを使う記述がございますが、代替法としてこちらのヒーターと耐熱容器を使用した方法を推奨させて頂いております。(サーモメーター等で温度を確認しながら実施ください)
*2:こちらのプロトコルにはサンプルの前処理方法のみが記載されております。染色の手順に関しましては「FFPE,固定凍結,新鮮凍結」用のプロトコルに書かれている手順を併せてご参照ください。
*3:プロトコル中のRNAscopeをmiRNAscopeに置き換えてご使用ください。

免疫染色との組み合わせを実施したい方はこちらも併せてご覧ください。

 

必要な試薬と機器

  1. ターゲットプローブ
  2. コントロールプローブ
  3. コントロールスライド
  4. 試薬キット/赤色(Fast Red)
  5. 疎水性撥水ペン
  6. 必要機器

1.ターゲットプローブ

既存プローブ(メーカーデザイン済みの場合)

:Advanced Cell Diagnostics社のプローブ検索ページはこちら

プローブの検索方法はこちら

品名 メーカー 品番 包装希望販売価格
ターゲットプローブ
miRNAscope™ Target Probe
ADC XXXXXX-S1 1 VIAL
(20 slide分)
¥125,000

XXXXXX にはターゲットにより異なる任意の数字が入ります。
:既存ブローブが無い場合、プローブのカスタム作製を承ります。カスタム作製では、別途でセットアップ料金がかかります。
【ご注意】RNAscope™/BaseScope™ アッセイ用のターゲットプロー ブ(C1-C4)は、miRNAscope™ アッセイにはご利用いただけません。 また、miRNAscope™ アッセイ用のターゲットプローブ(S1)は、RNAscope™/BaseScope™ アッセイにはご利用いただけません。

品名 メーカー 品番 包装希望販売価格
Setup fee for New RNAscope/BaseScope/miRNAscope Probe ADC 320269 1 SERV. \85,000
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2.コントロールプローブ

■ ポジティブコントロールプローブ
U6 small nuclear 1 (RNU6-1) に対するプローブです。ヒト、マウス、ラット等の解析にご使用いただけます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
miRNAscopeTM Positive Control Probe - SR-RNU6-S1 ADC 727871-S1 1 VIAL
¥19,000

■ ネガティブコントロールプローブ
スクランブル配列のプローブです。様々な生物種の解析にご利用いただけます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
miRNAscopeTM Negative Control Probe - SR-Scramble-S1 ADC 727881-S1 1 VIAL
¥19,000
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3. コントロールスライド

ターゲットと同一の動物種(humanまたはmouse)をご選択ください。

ポジティブコントロールの発現が確認されている細胞ペレットのFFPE 切片です。
サンプルがヒト、マウスの FFPE 切片の時に使用します。凍結切片等の他のサンプルの場合や、ヒト、マウス以外の動物種の場合はご自身でポジティブコントロールの発現が確認されているスライドをご用意ください。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
RNAscopeTM Control Slides - Human Hela Cell Pellet, Human ADC 310045 1 UNIT
[4 slides]
¥36,000
RNAscopeTM Control Slides - Mouse 3T3 Cell Pellet, Mouse ADC 310023 1 UNIT
[4 slides]
¥36,000
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4. 試薬キット/赤色(Fast Red)

■ 試薬キット
AP / Fast Red で単染色する試薬キットをご用意しています。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
miRNAscopeTM HD Reagent Kit - RED ADC 324500 1 KIT
[for 20 slides]
¥223,000
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【ご注意:内在性アルカリホスファターゼによるバックグラウンドについて】
本製品は発色反応にアルカリホスファターゼ(以下AP)を使用しているため、 腎臓、肝臓、胎盤などの内在性APが多く存在する組織サンプルを用いる場合では、内在性APと反応してバックグラウンドが広範囲に出てしまうことがあります。

5.疎水性撥水ペン ※必須

スライド上に疎水性の境界線を描けるペンです。
プローブやバッファーの流出を防ぎます。

*他社のペンは、40℃のハイブリダイゼーション反応中にバリアが溶ける場合がございますので推奨しません。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Hydrophobic Barrier Pen ADC 310018 1 PC
¥15,000
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6.必要機器(ハイブリダイゼーションシステム) ※必須

HybEZ™ ハイブリダイゼーションシステムは、RNAscope™ アッセイ用に開発されています。

*ADC社では、HybEZ™ ハイブリダイゼーションシステムを用いた場合のみ、RNAscope™ in situ hybridization の性能を保証しております。同システム以外のオーブンでご使用頂いた場合、結果不良の際のサポート対象外となります。
*初回ご検討用のレンタル機をご用意しております。ご予約制となりますので、ご希望の期間等、ご相談ください。

名称 HybEZ™ II Hybridization System With EZ-Batch Slide System
品番 321710
本体写真 HybEZ™ II Hybridization System With EZ-Batch Slide System
電力定格 155W
加熱率 20分以内に常温〜40℃まで加熱可
寸法(WxDxH) 28(W)×40(D)×21(H)cm
重量(kg) 9.5

オーブンに冷却機能がないため、外気温より低い温度に設定した場合、設定温度通りにはなりません。

付属品
  321710
オーブン本体
電源コード
ユーザーマニュアル
HybEZ™ Humidity トレイ
EZ-Batch™ スライドホルダー
EZ-Batch™ 洗浄トレイ
浸潤ペーパー2枚(品番310015の一部)
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
HybEZTM II Hybridization System (110v)With ACD EZ-Batch Slide System詳細データ ADC 321710 1 SYSTEM
¥920,000
HybEZTM 湿潤紙
HybEZTM Humidifying Paper詳細データ
ADC 310015 1 SET
[15pack]
¥17,000
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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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「miRNAscope™ in situ hybridization アッセイ」は、下記のカテゴリーに属しています。

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