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研究用

RNAscope® を応用した、miRNA検出用試薬が新登場 !miRNAscope™ in situ hybridization アッセイ

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RNAscope® は、FFPE組織、凍結組織、培養細胞等のサンプル中のRNAを、独自のRNA in situ hybridization法により検出する技術です。

miRNAscope™は、RNAscope® を応用した microRNA in situ hybridization 法で、従来の RNAscope® では検出が難しかった短鎖 RNA(mature miRNA やアンチセンスオリゴヌクレオチド等の核酸医薬)を組織上で検出可能です。内在性 miRNA の局在解析や核酸医薬の生体内安定性評価にご利用いただけます。

特長

  • miRNA、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチドなどの短鎖RNA(17-50 nt)を検出可能
  • FFPE組織、新鮮/固定 凍結組織、培養細胞など様々なサンプルに対応
  • AP / Fast-REDで染色(マニュアル染色、自動染色)
  • 抗体を用いた免疫組織染色と組み合わせ可能

ワークフロー

miRNAscopeのワークフロー
図1 miRNAscope™ のワークフロー

使用例

アンチセンスオリゴヌクレオチド

アンチセンスオリゴヌクレオチドの検出

図2. miRNAscope™アッセイにて、マウス大腿四頭筋組織中のアンチセンスオリゴヌクレオチドを検出した( 赤色)。
アンチセンスオリゴヌクレオチドを投与していないコントロール群ではシグナルは見られず、投与群において、アンチセンスオリゴヌクレオチドのデリバリーを確認できた。

内在性 miRNA / 免疫組織染色との共染色

内在性 miRNA / 免疫組織染色との共染色

図3. miRNAscope™アッセイにて、ヒト子宮頸がん組織中のmiR-223-3p(赤色)を染色した。その後、抗CD3 抗体を用いて免疫組織染色を行った(緑色)

siRNA

siRNAのプローブを用いたmiRNAscope アッセイ

図4. siRNA#1 に対するプローブを用いてmiRNAscope™アッセイを行った。siRNA#1 を導入したマウスの肝臓組織では赤色のシグナルが検出され、siRNA を導入していないマウスの肝臓組織や異なる配列のsiRNA(siRNA#2) を導入したマウスの肝臓組織では赤色のシグナルは見られなかった。

コントロール実験

ポジティブコントロールプローブとして、U6 small nuclear 1 (RNU6-1) に対するプローブをご用意しています。ヒト、マウス、ラット等の解析にご使用いただけます。ネガティブコントロールプローブは、スクランブル配列のプローブです。

コントロール実験

図5. ポジティブコントロールプローブおよびネガティブコントロールを用いて、ヒト、マウス由来試料を染色した。

必要な試薬と機器

1.ターゲットプローブ

既存プローブ(メーカーデザイン済みの場合)

:既存プローブのリストはこちら→ Probelist Excel

 

品名 メーカー 品番 包装希望販売価格
ターゲットプローブ
miRNAscope™ Target Probe
ADC XXXXXX-S1 1 VIAL
(20 slide分)
¥113,000

XXXXXX にはターゲットにより異なる任意の数字が入ります。
:既存ブローブが無い場合、プローブのカスタム作製を承ります。カスタム作製では、別途でセットアップ料金がかかります。
【ご注意】RNAscope®/BaseScope™ アッセイ用のターゲットプロー ブ(C1-C4)は、miRNAscope™ アッセイにはご利用いただけません。 また、miRNAscope™ アッセイ用のターゲットプローブ(S1)は、RNAscope®/BaseScope™ アッセイにはご利用いただけません。

品名 メーカー 品番 包装希望販売価格
Setup fee for miRNAscope™ new target ADC 320269-MI 1 serv. ¥65,000
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2.コントロールプローブ

■ ポジティブコントロールプローブ
U6 small nuclear 1 (RNU6-1) に対するプローブです。ヒト、マウス、ラット等の解析にご使用いただけます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
miRNAscopeTM Positive Control Probe - SR-RNU6-S1  ADC 727871-S1 1 VIAL
¥15,200(キャンペーン中)
¥19,000(通常希望販売価格)

■ ネガティブコントロールプローブ
スクランブル配列のプローブです。様々な生物種の解析にご利用いただけます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
miRNAscopeTM Positive Control Probe - SR-RNU6-S1  ADC 727871-S1 1 VIAL
¥15,200(キャンペーン中)
¥19,000(通常希望販売価格)
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3. コントロールスライド

RNAscope®アッセイ、miRNAscope™ アッセイに最適な条件で作製された細胞ペレットのスライドです。サンプルがヒトまたはマウスの FFPE 組織切片の場合に使用します。凍結組織切片等を解析される場合や、ヒト、マウス以外の生物種を解析される場合は、お客様にてポジティブコントロールの発現が確認されているスライドをご用意ください。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
RNAscope(R) Control Slides - Human Hela Cell Pellet, Human ADC 310045 1 UNIT
[4 slides]
¥25,600(キャンペーン中)
¥32,000(通常希望販売価格)
RNAscope(R) Control Slides - Mouse 3T3 Cell Pellet, Mouse ADC 310023 1 UNIT
[4 slides]
¥25,600(キャンペーン中)
¥32,000(通常希望販売価格)
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4. 試薬キット/赤色(Fast Red)

■ 試薬キット
AP / Fast Red で単染色する試薬キットをご用意しています。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
miRNAscopeTM HD Reagent Kit - RED  ADC 324500 1 KIT
¥160,000(キャンペーン中)
¥200,000(通常希望販売価格)
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5.疎水性撥水ペン ※必須

Barrier Pen

スライド上に疎水性の境界線を描けるペンです。
プローブやバッファーの流出を防ぎます。

*他社のペンは、40℃のハイブリダイゼーション反応中にバリアが溶ける場合がございますので推奨しません。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Hydrophobic Barrier Pen ADC 310018 1 PC
お問い合わせ
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6.必要機器(ハイブリダイゼーションシステム) ※必須

HybEZ™ ハイブリダイゼーションシステムは、RNAscope® アッセイ用に開発されています。

*ADC社では、HybEZ™ ハイブリダイゼーションシステムを用いた場合のみ、RNAscope® in situ hybridization の性能を保証しております。同システム以外のオーブンでご使用頂いた場合、結果不良の際のサポート対象外となります。
*初回ご検討用のレンタル機をご用意しております。ご予約制となりますので、ご希望の期間等、ご相談ください。

名称 HybEZ™ Hybridization System With EZ-Batch Slide System HybEZ™ II Hybridization System With EZ-Batch Slide System NEW
品番 321461(販売は終了しました) 321710
本体写真 HybEZ™ Hybridization System With EZ-Batch Slide System HybEZ™ II Hybridization System With EZ-Batch Slide System
仕様
有効な温度設定範囲※1 外気温+10℃〜75℃まで 外気温+10℃〜75℃まで
安定性 +/- 0.5℃ +/- 0.5℃
正確性 +/- 0.5℃ (40℃の時) +/- 0.5℃ (40℃の時)
温度ディスプレイ解像度 0.1℃ 0.1℃
電圧 115V +/- 10%, 50/60 Hz 115V +/- 10%, 50/60 Hz
電力定格 155W 155W
加熱率 20分以内に常温〜40℃まで加熱可 20分以内に常温〜40℃まで加熱可
寸法(WxDxH) 45(W)×44(D)×15(H)cm 28(W)×40(D)×21(H)cm
重量(kg) 12 9.5
モード Hold-T モードのみ 4種類※2

※1:オーブンに冷却機能がないため、外気温より低い温度に設定した場合、設定温度通りにはなりません。

※2[モード詳細]

  • RNAscopeモード — RNAscope® 、BaseScope™ アッセイ用に、温度を40℃に保つモードです。
  • Bake モード — スライドのBake用のモードです。開始すると温度が上昇し、60℃に達した時点で1時間のタイマーがスタートし、自動的に終了します。
  • Hold-T モード — 10℃〜75℃内の任意の温度に設定するモードです。
  • P-Run モード — お好みのプログラムを10個までプリセット可能です。1つのプログラム中に、3段階の温度・時間を設定できます。
付属品
  321710
オーブン本体
電源コード
ユーザーマニュアル
HybEZ™ Humidity トレイ (品番310012)
EZ-Batch™ スライドホルダー (品番321716)
EZ-Batch™ 洗浄トレイ (品番321717)
浸潤ペーパー2枚(品番310015の一部)
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
HybEZTM II Hybridization System (110v)With ACD EZ-Batch Slide System詳細データ ADC 321710 1 SYSTEM
¥620,000
HybEZTM 湿潤トレイ (フタ付)
HybEZTM Humidifying Tray (with lid)
ADC 310012 1 UNIT
¥58,000
HybEZTM 湿潤紙
HybEZTM Humidifying Paper詳細データ
ADC 310015 1 SET
[15pack]
¥11,000
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[関連商品]RNAscope® EZ-Batch™ Slide Processing System

RNAscope® EZ-Batch™ Slide Processing System

RNAscope® EZ-Batch™ Slide Holder 上に最大 20 スライドまでセットでき、EZBatch™ Wash Tray 内で複数スライドを同時に洗浄操作が行えます。また、HybEZ™ オーブンのコントロールトレイにそのまま入れる事ができ、ハイブリダイゼーションステップでのスライドの移動の手間を省き、効率的に実験を進める事ができます。

構成品
  -EZ-Batch™ Slide Holder
  -EZBatch™ Wash Tray

 
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
RNAscope(R) EZ-BatchTM Slide Processing System ADC 310007 1 UNIT
¥58,000
RNAscope(R) EZ-BatchTM Slide Holder ADC 321716 1 UNIT
¥51,000
RNAscope(R) EZ-BatchTM Wash Tray ADC 321717 1 UNIT
¥15,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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