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記事ID : 17331
研究用

Cell Meter™ 蛍光ミトコンドリアスーパーオキシド活性アッセイキット

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Cell Meter™ 蛍光ミトコンドリアスーパーオキシド活性アッセイキットは、生細胞中のスーパーオキシドレベルを蛍光により定量できるキットです。

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背景

ミトコンドリアは細胞内スーパーオキシドの主要なプロデューサーです。スーパーオキシドの低レベル〜中レベルの生産は、遺伝子発現、シグナル伝達、持久力運動トレーニングへの筋肉適合を含む多くの重要な細胞プロセスに重要です。制御不能なミトコンドリアのスーパーオキシド生産は、ガン、心疾患、神経変性疾患、加齢といった様々な現象に起因する細胞内酸化ストレスの引き金になります。細胞内ミトコンドリアスーパーオキシドの検出は、適切な細胞内レドックス制御や様々な病理の制御異常を理解するために重要です。

使用目的

Cell Meter™ Fluorimetric Mitochondria Superoxide 活性アッセイキットは、生細胞中のスーパーオキシドレベルを確認するためのユニークなスーパーオキシドインジケーターを使っています。MitoROS™ 520(緑色蛍光)もしくは MitoROS™ 580(赤色蛍光)は、生細胞透過性で、迅速かつ選択的にミトコンドリアのスーパーオキシドを標的にし、スーパーオキシドと反応すると赤色蛍光を発するので容易に読み取ることができます。

品番:16060 はフローサイトメトリー・蛍光顕微鏡観察、品番:22970 はフローサイトメトリーに、品番:22971 は蛍光顕微鏡観察・蛍光マイクロプレートリーダーに適しています。

構成内容

  • Component A: MitoROS™ 520(Ex/Em= 490/530 nm、品番:16060)、MitoROS™ 580(Ex/Em= 540/590 nm、品番:22970、22971)
  • Component B: アッセイバッファー
  • Component C: DMSO

プロトコール概要

品番:16060 蛍光顕微鏡/フローサイトメトリー

  1. 成長培地で細胞を調製
  2. スーパーオキシド誘導のためにテスト化合物で細胞処理
  3. MitoROS™ 520 ワーキング溶液を添加
  4. 37℃、60分間で細胞染色
  5. 蛍光増加をモニター(Ex/Em= 490/530 nm)もしくは蛍光強度をフローサイトメトリーでモニター

品番:22970 フローサイトメトリー

  1. 細胞(0.5〜1x106 細胞/mL)を用意
  2. スーパーオキシド誘導のためにテスト化合物で細胞処理
  3. 1 µL の MitoROS™ 580 を細胞懸濁液に添加
  4. 37℃、60分間で細胞染色
  5. 蛍光強度をフローサイトメトリーでモニター

品番:22971 蛍光顕微鏡

  1. 成長培地で細胞を調製
  2. スーパーオキシド誘導のためにテスト化合物で細胞処理
  3. MitoROS™ 580 ワーキング溶液を添加
  4. 37℃、30〜60分間で細胞染色
  5. 蛍光増加をモニター(Ex/Em= 540/559 nm)

製品データ

品番16060を使用し、AMA処理したマクロファージ (RAW264.7細胞) のスーパーオキシド測定の蛍光画像

図1. 品番:16060 を使用し、AMA 処理したマクロファージ(RAW264.7 細胞)のスーパーオキシド測定の蛍光画像

品番22970を使用し、AMA処理した Jurkat細胞のスーパーオキシドのフローサイトメトリー検出

図2. 品番:22970 を使用し、AMA 処理した Jurkat 細胞のスーパーオキシドのフローサイトメトリー検出

品番22971を使用し、AMA処理したHeLa細胞のスーパーオキシド測定の蛍光画像

図3. 品番:22971 を使用し、AMA 処理した HeLa 細胞のスーパーオキシド測定の蛍光画像

Cell Meter™ 蛍光ミトコンドリアスーパーオキシド活性アッセイキット

MitoROS™ 520(Ex/Em= 490/530 nm)
蛍光顕微鏡/フローサイトメトリー用

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Cell MeterTM Fluorimetric Mitochondrial Superoxide Activity Assay Kit *Green Fluorescence*詳細データ ABD 16060 200 TEST
¥62,000

MitoROS™ 580(Ex/Em= 540/590 nm)
フローサイトメトリー用

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Cell MeterTM Fluorimetric Mitochondrial Superoxide Activity Assay Kit*Optimized for Flow Cytometry*詳細データ ABD 22970 1 KIT
[100 Tests]
¥62,000

MitoROS™ 580(Ex/Em= 540/590 nm)
蛍光顕微鏡・蛍光マイクロプレートリーダー用

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Cell MeterTM Fluorimetric Mitochondrial Superoxide Activity Assay Kit*Optimized for Microplate Reader*詳細データ ABD 22971 1 KIT
[200 Tests]
¥62,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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