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商品情報

OxiSelect™ モノアミン酸化酵素アッセイキットは、生体サンプル中の MAO-A および MAO-B を測定するキットです。比色法(品番: XPX-5006)または蛍光法(品番: XPX-5000)をご利用いただけます。

背景

モノアミン酸化酵素(MAO/モノアミンオキシダーゼ)

モノアミン酸化酵素(MAO/モノアミンオキシダーゼ)は、ミトコンドリア外膜に存在し、モノアミンの酸化的脱アミノ反応を触媒する酵素群です。MAOには、MAO-A と MAO-B の2つのアイソフォームが存在し、局在や基質親和性、阻害剤の特異性などに基づいて区別されます。MAO は神経伝達物質を制御しており、MAOの機能異常は、うつ病、薬物依存、偏頭痛、統合失調症、注意欠陥障害、パーキンソン病、アルツハイマー病などに関与します。

特長

  • 生体サンプル中の MAO-A および MAO-B を検出
  • キットには MAO 基質と阻害剤が付属
  • キットには過酸化水素スタンダードが付属
  • 蛍光または比色検出を利用可能

構成内容

  • 96ウェル タンパク質結合プレート(品番: XPX-5006)または 96ウェル マイクロタイタープレート(品番: XPX-5000)
  • 200X 比色プローブ(品番: XPX-5006)または 200X 蛍光プローブ(品番: XPX-5000)
  • HRP
  • 過酸化水素
  • 100X チラミン
  • 100X ベンジルアミン
  • MAO-A 阻害剤
  • MAO-B 阻害剤
  • 10X アッセイバッファー

測定原理

本アッセイでは、生体サンプル中の MAO-A および MAO-B を測定します。MAO は基質と反応し、過酸化水素を生成します。過酸化水素とプローブの反応により、サンプル中の MAO 量に直接比例するシグナルを、比色法または蛍光法により検出できます。未知のサンプルの MAO 活性は、過酸化水素スタンダードカーブに基づいて計算されます。

使用例

比色キット(品番: XPX-5006)

図1 H2O2 スタンダードカーブ
(画像はクリックで拡大されます)

図1 H2O2 スタンダードカーブ

図2 MAO-A の測定
(画像はクリックで拡大されます)

図2 MAO-A の測定
アッセイプロトコールに従い、50 µg/mL モノアミン酸化酵素Aを、MAO-A 阻害剤(クロルジリン)または MAO-B 阻害剤(パルギリン) とインキュベートした。その後、基質となるチラミンまたはベンジルアミンとアッセイ溶液中で45分間インキュベートし、マイクロプレートリーダーで 540 nm の吸光度を測定した。

蛍光キット(品番: XPX-5000)

図3 H2O2 スタンダードカーブ
(画像はクリックで拡大されます)

図3 H2O2 スタンダードカーブ

図4 MAO-A の測定
(画像はクリックで拡大されます)

図4 MAO-A の測定
アッセイプロトコールに従い、50 µg/mL モノアミン酸化酵素Aを、MAO-A 阻害剤(クロルジリン)または MAO-B 阻害剤(パルギリン) とインキュベートした。その後、基質となるチラミンまたはベンジルアミンと、アッセイ溶液中で45分間インキュベートし、Spectra MAX GeminiXS Fluorometer を用いて蛍光を測定した(励起 544 nm/蛍光 590 nm)。

参考文献

  1. Hall, D.W.R., et al. Biochem. Pharmacol. (1969) 18: 1447-1454.
  2. Tatyana, V., et al. Neurochem. (2001) 79: 266.
  3. Tipton, K. F., et al. Biochem. J. (1968) 108: 95-99.
  4. Youdim, M.B. (1976) Preparation of Human Platelets. In Monoamine Oxidase and It’s Inhibition North-Holland, N.Y., 405-406.
  5. Youdim, M.B., et al. Methods Enzymol. (1987) 142: 617-627.

OxiSelect™ モノアミン酸化酵素アッセイキット(比色)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
OxiSelectTM Monoamine Oxidase Assay Kit (Colorimetric)詳細データ CBL XPX-5006 1 KIT
[96 assays]
¥71,000

OxiSelect™ モノアミン酸化酵素アッセイキット(蛍光)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
OxiSelectTM Monoamine Oxidase Assay Kit (Fluorometric)詳細データ CBL XPX-5000 1 KIT
[96 assays]
¥71,000
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