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約2時間で高感度にマイコプラズマをqPCR検出 Myco-Visible Mycoplasma qPCR Detection Kit

メーカー名：MP Biomedicals, LLC

エムピーバイオ社の Myco-Visible Mycoplasma qPCR Detection Kit は、細胞培養中のマイコプラズマ汚染を高感度に検出するリアルタイム PCR キットです。日本薬局方（ JP18 G3 ）に準拠した核酸増幅法を採用し、迅速かつ信頼性の高い結果が 2 時間以内に取得できます。

Myco-Visible Mycoplasma qPCR Detection Kitの写真

特長

高感度：≤ 10 CFU/mL の感度
短時間：2 時間以内に判定可能
高い特異性

140 種を超えるマイコプラズマ、Acholeplasma、Spiroplasma の検出が可能で、近縁の細菌種との交差反応を示しません。

構成内容

Sample Buffer
Nuclease-free water
2X qPCR Master Mix
Primer Mix
Internal Control
Positive Control

結果の解釈

本キットでは、FAM™ チャネルでマイコプラズマを、VIC™ チャネルでインターナルコントロールを検出します。
インターナルコントロールを使用することで、FAM™ チャネルでのマイコプラズマ検出の有無にかかわらず、VIC™ チャネルの蛍光シグナルから qPCR 反応が正常に行われたことを確認できます。
なお、使用する qPCR システムによっては、内部コントロールを HEX™ または JOE™ チャネルで検出することも可能です。

マイコプラズマ検出（ FAM™ ）	インターナルコントロール（ VIC™ / HEX™ / JOE™ ）	判定
陽性（ Ct < 40 ）	判定不要	マイコプラズマ陽性
陰性（ Ct ≥ 40 ）	陽性（ 18 < Ct < 26 ）	マイコプラズマ陰性
陰性（ Ct ≥ 40 ）	陰性（ Ct ≥ 40 ）	PCR 阻害（判定無効）

フローチャート

アプリケーション例

Species	100 CFU/mL	10 CFU/mL	5 CFU/mL	Detection LOD95
Acholeplasma laidlawii	24 / 24	24 / 24	23 / 24	5 CFU/mL
Mycoplasma arginini	24 / 24	24 / 24	24 / 24	5 CFU/mL
Mycoplasma fermentans	24 / 24	24 / 24	24 / 24	5 CFU/mL
Mycoplasma gallisepticum	24 / 24	24 / 24	24 / 24	5 CFU/mL
Mycoplasma hyorhinis	24 / 24	24 / 24	24 / 24	5 CFU/mL
Mycoplasma orale	24 / 24	24 / 24	24 / 24	5 CFU/mL
Mycoplasma pneumoniae	24 / 24	24 / 24	23 / 24	5 CFU/mL
Mycoplasma salivarium	24 / 24	24 / 24	24 / 24	5 CFU/mL
Mycoplasma synoviae	24 / 24	24 / 24	24 / 24	5 CFU/mL
Spiroplasma citri	24 / 24	24 / 24	24 / 24	5 CFU/mL

表1. Myco-Visible Mycoplasma qPCR Detection Kit の分析感度 検出限界（ LOD ）は、EP 2.6.7、JP 18 G3、および USP < 63 > のガイドラインに従い、薬局方に収載されている菌種を細胞培養培地に添加（100、10、5 CFU/mL、n=24）して評価した。本キットは、すべての菌種において一貫して高い検出率を示し、LOD₉₅ は 5 CFU/mL で、要求される感度である 10 CFU/mL 以下を満たした。

Bacterium	Mammals
Clostridium sporogenes	CHO cell
Lactobacillus acidophilus	HEK293 cell
Streptococcus pneumoniae	Vero cell
Bacillus cereus	hMSC cell
Bacillus subtilis	Hybridoma cell
Candida albicans	Human blood
Escherichia coli	Mouse tail
Listeria monocytogenes	Fungi
Micrococcus luteus	Saccharomyces cerevisiae
Pseudomonas aeruginosa	Pichia pastoris
Salmonella enterica
Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis

表2. Myco-Visible Mycoplasma qPCR Detection Kit の特異性 特異性は、EP 2.6.7に従い、高濃度（1 × 10⁵ copies/reaction）の非標的細菌および哺乳類由来 DNA を用いて評価した。その結果、非標的生物種では増幅は認められなかった。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格	在庫
Myco-Visible Mycoplasma qPCR Detection Kit	MPB	3051501	20 TEST	お問い合わせ	なし
Myco-Visible Mycoplasma qPCR Detection Kit	MPB	3051502	50 TEST	お問い合わせ	なし