ページの本文へ移動

記事ID : 45301
研究用

NATE™でトランスフェクションをブーストします NATE™

このエントリーをはてなブックマークに追加

NATE™は、InvivoGen社によって設計されたトランスフェクションエンハンサーで、トランスフェクションが難しい細胞、特にヒト単球およびマウスマクロファージ(それぞれTHP-1細胞およびRAW 264.7細胞)の一過性および安定トランスフェクション効率を高めます。現在お使いのトランスフェクション手順の30分前にNATE™を追加するだけです。

真核細胞のトランスフェクションにおいて”外来”核酸 (プラスミド) に対して主に障害になるのは、自然免疫系の細胞質DNAセンサーによる核酸自体の検出です。これらの細胞防御戦略は、一過性トランスフェクションと安定トランスフェクションの両方の効率に大きな影響を与える可能性があります。NATE™を使用すると、これらの核酸感知経路の多くが阻害され、それによってプラスミドが保護され、その発現が促進されます。

特長

  • 一般的に使用されているトランスフェクション試薬や物理的方法(nucleofectionなど)と互換性がある
  • 大きなプラスミド(10kb以上)でも高いトランスフェクション収率
  • 試験したすべてのトランスフェクションプロトコールで毒性はなく、細胞にやさしい

NATE™は、高純度(95%以上)の自然免疫系阻害剤を独自にブレンドしたもので、THP-1とRAW 264.7細胞を用いたトランスフェクションアッセイで機能試験を行いました。

NATE™の検証

NATE™処理した細胞における一過性トランスフェクション効率

THP-1細胞

処理THP-1細胞における一過性トランスフェクション効率の向上を示した図

上図
THP-1細胞への約3kb GFP発現プラスミドの一過性トランスフェクションを、NATE™非存在下(左)と存在下(右)の両方でGeneXPlusを用いて行った。48時間後、GFPを発現するトランスフェクト細胞を蛍光顕微鏡で可視化した。
下図
GeneXPlus、Lipofectamine® LTX、jetPRIME®、ヌクレオフェクションなどの一般的に使用されるトランスフェクション法を用いて、THP-1細胞への〜3 kb GFP発現プラスミド(左)と8 kb GFP発現プラスミド(右)の一過性トランスフェクションを行った。これはNATE™の存在下(緑)と非存在下(黄)の両方で行われた。48時間後、フローサイトメトリーでトランスフェクション効率(GFP発現細胞率)を測定した。データはNATE™を用いないで行ったトランスフェクションと比較したフォールド変化として示した。

 

 

RAW 264.7細胞

処理RAW 264.7細胞における一過性トランスフェクション効率の向上を示した図

上図
NATE™非存在下(左)と存在下(右)の両方で、RAW 264.7細胞への約3kb GFP発現プラスミドの一過性トランスフェクションをLipofectamine® LTXを用いて行った。48時間後、GFPを発現するトランスフェクト細胞を蛍光顕微鏡で可視化した。
下図
Lipofectamine® LTX、jetPRIME®、FuGENE®、ヌクレオフェクションなど、一般的に使用されているトランスフェクション法を用いて、RAW 264.7細胞への〜3 kb GFP発現プラスミド(左)と8 kb GFP発現プラスミド(右)の一過性トランスフェクションを行った。これはNATE™の存在下(緑)と非存在下(黄)の両方で行われた。48時間後、フローサイトメトリーでトランスフェクション効率(GFP発現細胞率)を測定した。データはNATE™を用いないで行ったトランスフェクションと比較したフォールド変化として示した。

 

 

SEAP遺伝子を安定発現させたRAW 264.7クローン数の増加

SEAP遺伝子を安定発現させたRAW 264.7クローン数の増加

NATE™ 非存在下(左)と存在下(右)の両方で、Lipofectamine® LTXを用いてRAW 264.7細胞への約10 kb SEAP発現プラスミドの安定したトランスフェクションを行った。Blasticidinで10日間選択した後、SEAP検出試薬であるQUANTI-Blue™を用いて、SEAPを安定発現しているクローンの数(青いウェル)を可視化した。

仕様

  • 組成:自然免疫系阻害剤を独自にブレンド
  • 純度:>95%UHPLC
  • 品質管理:
    • バクテリアのコンタミネーション(リポタンパク質やエンドトキシン)がないことをそれぞれHEK-Blue™TLR2およびTLR4細胞アッセイを用いて確認済み
    • NATE™の生物学的活性は、トランスフェクションアッセイを用いて確認済み

Video NATE™

NATE™

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
NATETM 詳細データ ING LYEC-NATE 1 ML
[100 reactions]
お問い合わせ

製品使用文献

  1. 2023 J Exp Med. DOI: 10.1084/jem.20230104 EEF2-inactivating toxins engage the NLRP1 inflammasome and promote epithelial barrier disruption upon Pseudomonas infection. Pinilla M. et al.
  2. 2023 Mol Neurobiol. DOI: 10.1007/s12035-023-03369-w Microglia Signaling Pathway Reporters Unveiled Manganese Activation of the Interferon/STAT1 Pathway and Its Mitigation by Flavonoids. Mossine V.V. et al.

【関連商品】

  • LyoVec™
    脂質ベースのトランスフェクション試薬

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

お問い合わせ


メーカー・代理店一覧

サポート情報

SNSアカウント

オウンドメディア

※当社のWEBサイトはユーザーの利便性を最適にし、それを保証するためにクッキーを使用しています。
 このWEBサイトの利用を継続することで、クッキーの使用に同意することになります。

© COSMO BIO