- ヒト間葉系幹細胞(hMSC):
骨髄(BM-MSC)、脂肪組織(AT-MSC)、臍帯組織(UC-MSC)等様々な組織由来、および歯髄組織(hMSC-DP)
- ヒト胚性幹細胞(hESC)、人工多能性幹細胞(iPSC)
- ヒト末梢血単核球細胞(PBMC's)
- ヒト内皮細胞(EC)
- キメラ抗原受容体(CART)細胞および腫瘍浸潤リンパ球(TIL's)を含めたT細胞
- 神経細胞
- 雑種細胞
- CHO細胞
- ベロ細胞
- 複数の哺乳動物細胞株:MRC-5, HEK-293, HepG2, HeLaBSC-1, BGM3T3, MA-10BHK-21、および他の非常に感受性の高い細胞株
TOPICS!
(1) ES/iPS細胞の凍結保存に最適!!
Feeder-Free 培養条件下で効率的にES/iPS細胞を凍結保存・融解する方法を報告した下記文献において、凍結融解後の細胞生存率が最も良好な凍結保存培地として 本商品 が使用されました!!
また本文献では、ES/iPS細胞をシングルセルに分散した後に緩慢法にて凍結保存しています。
製品使用文献:
1. N. Nishishita et al., An effective freezing/thawing method for human pluripotent stem cells cultured in chemically-defined and feeder-free conditions. Am J Stem Cells 4(1): 38–49, 2015. [PMID :25973330]
(2) MSCの凍結保存に最適!
下記報告では、MSCの凍結融解後の細胞生存率が最も良好な保存培地として本製品が使用されました。
Salkhordeh et. al. Cytotherapy, May 2018
* CryoStem™はNutriFreez® に名称が変更となりました

図.1 H1 hESC BGO1V/hOG 細胞 (バリアント hESC hOct4-GFP レポーター細胞)の接着能・増殖能の比較
hESCをNutriFreez® D10 Cryopreservation Mediumで凍結後、マトリゲル上でNutriStem® hPSC XFに入れて解凍した。細胞は優れた接着能と増殖能力を保持している。
ヒト間葉系幹細胞(hMSC)

図.2 NutriFreez® D10 Mediumで凍結保存した、hMSCの増殖能および形態の比較

図.3 NutriFreez® D10 Mediumで凍結保存した、hMSCの生存率および回復の比較
高い生存率 : 解凍後、95%以上の生存率を示した。(左図)
優れた回復 : 解凍後、約3日間で7倍近く増殖した。(右図)

図.4 NutriFreez® D10 Mediumで長期間凍結保存した、hMSCの生存率比較
3年間凍結保存した骨髄由来hMSC(hMSC-BM)の生存率は91%を示した。(左図)
5年間凍結保存したhMSC-BMの生存率は94%を示した。(右図)

図.5 NutriFreez® D10 Mediumで凍結保存した、様々なhMSCの生存率比較
脂肪組織由来MSC(MSC-AT)、骨髄由来MSC(MSC-MB)、歯髄由来MSC(MSC-DP)は、解凍後、3日間で91%以上細胞生存率を示した。

図.6 NutriFreez® D10 Mediumで凍結保存した、様々な間葉系幹細胞の多能性マーカーの発現比較
脂肪組織由来MSC(MSC-AT)、骨髄由来MSC(MSC-MB)、歯髄由来MSC(MSC-DP)
ヒトES細胞

図.7 NutriFreez® D10 Mediumで凍結保存したヒトES細胞は、優れた回復と形態を示す
ヒトiPS細胞

図.8 NutriFreez® D10 Mediumで凍結保存した、ヒトiPS細胞の回復と形態について
初代細胞と様々な細胞株

図.9 NutriFreez® D10 Mediumで凍結保存した、ヒト末梢血単核球の生存率比較

図.10 NutriFreez® D10 Mediumで凍結保存した、ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)について
解凍後のHUVECは、高い生存率と収率を示した。(左図)
解凍後4日のHUVECは、正常の形態を示した。(右図)

図.11 NutriFreez® D10 Mediumで凍結した、HUVECの主要表面マーカーのFACS解析

図.12 NutriFreez® D10 MediumでMediumで長期保存した、様々な細胞株の生存率比較