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ターゲットタンパク質の末端配列に依存せずに切断可能！ Numacut™ TEVプロテアーゼ

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メーカー名：Numaferm GmbH

Numacut™ TEVプロテアーゼは、Numaferm社の典型的なTEVプロテアーゼ (NumaTEVプロテアーゼ、品番：P084-1,-2, -3, -10)^※の有益な変異をすべて保持しながら、TEVプロテアーゼ (ENLYFQ/S) の認識部位が ENLYFQ/X (X: P を除く任意のアミノ酸) に拡張された新しいTEVプロテアーゼです。
※NumaTEVプロテアーゼは、Tobacco Etch Virus (TEV) 野生型酵素の改良された変異体です。野生型酵素と比較して、溶解性と安定性を高めるために T17、N68、および I77 に、自己タンパク質分解を保護するために S219 にと、さまざまな部位に有益な変異を保有しています。

本TEVプロテアーゼには、タグ等のオーバーハングタンパク質がIMAC(immobilized metal-ion affinity chromatography) で簡単に除去できるように、N末端に 6x His-Tagが付加されていています。

図1. Numacut™ TEVプロテアーゼによるターゲットタンパク質の切断イメージ

使用目的

ターゲットタンパク質の末端が機能的に重要である場合に
タグが付加された場合に、安定性や溶解性に変化が生じるタンパク質に
研究開発や研究の前段階でネイティブタンパク質を使用しており、作製するリコンビナントタンパク質もネイティブと同じ配列で作製したい場合に

構成品

Numacut™ TEV Protease 6x His-Tag
Reconstitution buffer
20x Reaction buffer

特長

TEVプロテアーゼの認識部位が ENLYFQ/X (X: P を除く任意のアミノ酸)
ターゲットタンパク質のN末端配列に依存せずに切断可能(アミノ酸：P を除く)(図2)
TEVプロテアーゼ認識部位への高い特異性

商品名	Numacut™ TEV Protease,6x His-Tag
由来	E. coli
活性	>10,000 U/mL
ユニット定義	One Unit of Numacut™ TEV protease cleaves 80% of 3 µg control substrate containing a S amino acid residue at P1’ position in 1 h at 30°C and pH 7.5. Similar cleavage efficiencies observed for all amino acid residues at P1’ position except for P.
純度	>90% by SDS-PAGE analyses
組成	Lyophilized from buffer (20 mM Tris/HCl buffer, 100 mM NaCl, 5 mM DTT, 1 mM EDTA, pH 7.5). No preservatives and carrier-free
分子量	28.2 kDa
保管温度、期間	-20℃で6ヶ月

図2. ターゲットタンパク質のN末端アミノ酸を変化させた場合の切断結果

Numacut™ TEVプロテアーゼ, 6x His-Tag

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Numacut TEV Protease, 6x His-Tag	NUM	P1065-1	1000 UNIT	￥82,000
Numacut TEV Protease, 6x His-Tag	NUM	P1065-2	2000 UNIT	￥135,000
Numacut TEV Protease, 6x His-Tag	NUM	P1065-3	3000 UNIT	￥173,000
Numacut TEV Protease, 6x His-Tag	NUM	P1065-10	10000 UNIT	お問い合わせ

【関連商品】NumaTEVプロテアーゼ, 6x His-Tag

NumaTEV プロテアーゼは、Tobacco Etch Virus (TEV) 野生型酵素の改良された変異体です。野生型酵素と比較して、溶解性と安定性を高めるために T17、N68、および I77 に、自己タンパク質分解を保護するために S219 にと、さまざまな部位に有益な変異を保有しています。本TEVプロテアーゼは、認識部位：ENLYFQ/S (または G) を標的タンパク質 (C 末端に位置) と除去対象のオーバーハングタンパク質 (N 末端に位置) の間に挿入することで、標的タンパク質から除去対象のタンパク質を切断することができます。

本TEVプロテアーゼには、IMAC(immobilized metal-ion affinity chromatography) で簡単に除去できるように、N 末端に 6x His-Tag が付加されていています。

図3. NumaTEVプロテアーゼによるターゲットタンパク質の切断イメージ

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NumaTEV protease, 6x His-Tag	NUM	P084-1	1000 UNIT	￥52,000
NumaTEV protease, 6x His-Tag	NUM	P084-2	2000 UNIT	￥85,000
NumaTEV protease, 6x His-Tag	NUM	P084-3	3000 UNIT	￥108,000
NumaTEV protease, 6x His-Tag	NUM	P084-10	10000 UNIT	￥254,000