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記事ID : 36118
研究用

血液サンプルや細胞培養上清からヒト PD-L1 を1Step ELISA法で高感度に定量!PD-L1 ELISAキット

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本キットは、免疫チェックポイント関連分子であるPD-L1に対する高性能抗体を用いた1ステップサンドイッチ法により、サンプル中のヒトPD-L1を高感度に定量することができます。

背景

PD-L1 とは

がん細胞は、活性化T細胞表面に発現するPD-1受容体に対するPD-L1(プログラム細胞死リガンド-1)を表面に発現し、PD-1/PD-L1結合を介してT細胞の活性を抑制することにより、免疫監視機構を回避します1), 2)。近年、これらの免疫監視機構をがん治療に応用し、抗PD-1抗体薬や抗PD-L1抗体薬はこの結合を阻害することでT細胞の活性化を増強することを目的として開発され、これまで様々な固形がんでその臨床効果や安全性が確認されています3), 4)
しかしながら、初期効果後の治療抵抗性が多く観察されておりますが、抗PD-L1抗体薬に対する耐性のメカニズムはほとんどわかっていませんでした。
最近、抗PD-L1耐性NSCLC患者から、膜貫通ドメインが欠損している2つのユニークな分泌型PD-L1スプライシングバリアントが同定されました5)
その分泌型PD-L1スプライシングバリアントが「おとり」として作用することによってPD-L1阻害薬に対する耐性を誘導することが示唆され、また、分泌型PD-L1スプライシングバリアントが検出された患者における血漿(エクソソームフリー)または胸水中の可溶性PD-L1のレベルは、健康なドナーまたは分泌型PD-L1変異体を伴わない患者よりも高いものでした5)
さらに、可溶性PD-L1の血中濃度は、がん患者の臨床病理学的特徴、治療反応、および生存転帰を予測する可能性があることも示唆されています6)

特長

  • ヒトPD-L1を1Step ELISA法で高感度に検出(検出感度: 1 pg/mL*
  • 特殊な装置は不要で、通常のプレートリーダーがあれば測定可能
    *ブランク吸光度の標準偏差と検量線の傾きから算出7)

構成内容

内容 容量 数量
抗 PD-L1抗体固相化プレート 96 well(8-well x 12 strips) 1枚
標準 PD-L1 100 µL 1本*
アッセイバッファー 15 mL 1本
洗浄バッファー (10×) 15 mL 1本
HRP標識抗PD-L1抗体 (250×) 20 µL 1本
基質液 12 mL 1本
停止液(2N H2SO4 6 mL 1本
プレートシール 1枚

*; n=2として、検量線3回分

仕様

交差性 サンプルタイプ 測定範囲 感度
Human Serum、Plasma、Cell culture supernatant 12.5〜800 pg/mL 1 pg/mL

データ例

HAK_PD-L1_01.png

図1 標準曲線

HAK_PD-L1_02.png

図2 細胞培養上清
(PD-L1過剰発現HEK293細胞の培養上清中PD-L1量のタイムコース)

 
サンプル 回収率(%)
平均値 範囲
血清 94% 92% - 99%
血漿 91% 88% - 93%

添加回収(血清、血漿)

ヒト PD-L1 ELISAキット

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
ヒトPD-L1 ELISAキット
PD-L1 ELISA Kit詳細データ
HAK HAK-HELPDL1-1 1 KIT
[96test]
¥100,000

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参考文献

  1. H. Dong, S. E. Strome, D. R. Salomao, H. Tamura, F. Hirano, D. B. Flies, P. C. Roche, J. Lu,G. Zhu, K. Tamada, V. A. Lennon, E. Celis, L. Chen: Nat Med., 8, 793 (2002).
  2. L. Chen, X. Han: J Clin Invest., 125, 3384(2015).
  3. S. L. Topalian, F. S. Hodi, J. R. Brahmer, et al.: N Engl J Med., 366, 2443 (2012).
  4. J. R. Brahmer, S. S. Tykodi, L. Q. Chow, et al.: N Engl J Med., 366, 2455 (2012).
  5. B. Gong, K. Kiyotani, S. Sakata, et al.: J Exp Med., 216, 982 (2019).
  6. X. Zhu, J. Lang: Oncotarget, 8, 97671 (2017).
  7. 厚生労働省,厚生省医薬安全局審査管理課長通知, 医薬審,第338号,平成9年10月28日.

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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