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研究用

ヒト血液サンプルや細胞培養上清から PD-L1 陽性エクソソームをELISA 法で直接定量!PD-L1 陽性エクソソーム(CD9)ELISA キット

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PD-L1 陽性エクソソーム(CD9)ELISA キット

本製品は、エクソソーム・マーカーである CD9 と免疫チェックポイント関連分子である PD-L1 に対する高性能な抗体を利用し、ヒトの血液や細 胞培養液において細胞が分泌するエクソソームの表面に発現する PD-L1 分子を検出するサンドイッチ ELISA キットです。

背景

PD-L1 とは

がん細胞は、活性化 T 細胞表面に発現する PD-1 受容体に対する PD-L1(プログラム細胞死リガンド -1) を表面に発現し、PD-1/PD-L1 結合を介し て T 細胞の活性を抑制することにより、免疫監視機構を回避します1),2)。近年、これらの免疫監視機構をがん治療に応用し、抗 PD-1 抗体薬や抗 PD-L1 抗体薬はこの結合を阻害することで T 細胞の活性化を増強することを目的として開発され、これまで様々な固形がんでその臨床効果や安全性が確認されています3),4)
これら免疫チェックポイント阻害薬の効果予測因子として最もよく知られているのは、がん細胞上の PD-L1 発現であり、現在、臨床治験に組み 入れられた PD-L1 IHC 検査 ( 免疫組織化学染色法 ) が、がん組織・細胞中の PD-L1 発現率の測定を目的として開発が進められコンパニオン診断薬として利用されています。
一般的に IHC 検査は、侵襲性が高く被験者の負担も大きいことから、その負担を軽減できるエクソソームを利用したリキッドバイオプシの研究も進んでいます。
エクソソームにも PD-L1 が発現し、がん細胞表面の PD-L1 と同じトポロジーをとり、細胞外ドメインがエクソソームの表面に露出し、濃度依存的に T 細胞の PD-1 に結合します5)。また、転移性メラノーマ患者と健常者の血中循環エクソソームの比較において、転移性メラノーマ患者の PD-L1 レベルが有意に高いと示唆されています5)。しかしながら、この方法は超遠心法でエクソソームを精製する必要があり、迅速で簡便に直接測 定すること出来ませんでした。

特長

  • ヒト PD-L1 陽性エクソソームをELISA 法で高感度に検出(検出感度: 0.05 ng/mL*
  • ヒト血液サンプルや細胞培養上清などに含まれる PD-L1 陽性エクソソームを直接定量可能
  • 特殊な装置は不要で、通常のプレートリーダーがあれば測定可能
  • 標準試薬として保存安定性に欠けるエクソソームそのものを使用せず、PD-L1/CD9融合タンパク質(標準タンパク質)を利用することで安定性と再現性を確保
  • PD-L1/CD9融合タンパク質 ( 標準タンパク質 ) を用いた標準曲線で読み取ることで各サンプルの相対定量が可能
    *ブランク吸光度の標準偏差と検量線の傾きから算出6)

構成内容

内容 容量 数量
抗 CD9抗体固相化 プレート 96 well(8-well x 12 strips) 1枚
標準タンパク質(PD-L1/CD9融合タンパク質) 100 µL 1本*
アッセイバッファー 25 mL 1本
洗浄バッファー (10×) 25 mL 1本
HRP 標識抗 PD-L1 抗体(500×) 20 µL 1本
基質液 12 mL 1本
停止液(2N H2SO4 6 mL 1本
プレートシール 2枚

*; n=2として、検量線2回分

仕様

交差性 サンプルタイプ 測定範囲 感度
Human Serum、Plasma、Cell culture supernatant 0.156〜10 ng/mL 0.05 ng/mL

データ例

スタンダードカーブ
図1 標準曲線

ヒト PD-L1 陽性エクソソーム(CD9)ELISA キット

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
ヒトPD-L1陽性エクソソーム(CD9)ELISAキット
PD-L1/CD9 Exosome ELISA Kit詳細データ
HAK HAK-HELPDL109-1 1 KIT
[96test]
¥100,000

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参考文献

  1. H. Dong, S. E. Strome, D. R. Salomao, H. Tamura, F. Hirano, D. B. Flies, P. C. Roche, J. Lu,G. Zhu, K. Tamada, V. A. Lennon, E. Celis, L. Chen: Nat Med., 8, 793 (2002).
  2. L. Chen, X. Han: J Clin Invest., 125, 3384(2015).
  3. S. L. Topalian, F. S. Hodi, J. R. Brahmer, et al.: N Engl J Med., 366, 2443 (2012).
  4. J. R. Brahmer, S. S. Tykodi, L. Q. Chow, et al.: N Engl J Med., 366, 2455 (2012).
  5. G.?Chen,?A.?C.?Huang,?W.?Zhang,?et?al.:?Nature,?560,?382?(2018).
  6. 厚生労働省,厚生省医薬安全局審査管理課長通知, 医薬審,第338号,平成9年10月28日.

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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