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研究用

DNA結合タンパク質の活性化を定量新規テクノロジーを用いた蛍光法 HTSスクリーニングキット Bridge-It®シリーズ

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リガンド(測定タンパク質)により活性化するDNA結合タンパク質と蛍光標識DNAの結合特性を利用した創薬研究アッセイキットです。

新規テクノロジーを用いて、DNA結合タンパク質とその小分子リガンド両方の活性を迅速かつ高感度に定量します。リガンドとして、cAMP、L-トリプトファン、s-アデノシルメチオニンの3種類をご用意しています。

使用目的

アッセイ原理

配列特異的DNA結合タンパク質は、特有のヌクレオチド配列を持つ二本鎖DNAに高親和かつ特異的に結合します。この特性を利用して、2つの蛍光プローブを用いた画期的なDNA結合タンパク質の分析法がメディオミクス社により開発されました。

目的のタンパク質へ結合する部位を持つ二本鎖DNAを2つの「half-site」に分割し、それぞれ相補的な一本鎖のオーバーハングを持つ断片に蛍光プローブを標識します。これらの分割された断片は、目的のタンパク質が存在しなければ、自然に再結合することができません。しかし、目的のタンパク質存在下では、ターゲットとなるタンパク質の全長DNA配列に対する親和性を利用して、2つの「half-site」を持つDNA断片が再結合します。断片の結合は、2つの「halfsite」を持つDNA断片に標識した蛍光プローブで検出することができます。

DNA結合タンパク質が存在すると蛍光シグナルのクエンチングが起こります。本キットは、DNA結合タンパク質を、特異的リガンドの高感度なバイオセンサーとして利用します。

HTSスクリーニングBridge-Itキット
図1

HTSスクリーニングBridge-Itキット

特長

  • キット試薬成分を混合するだけの簡便な操作です。
  • 抗体や放射性プローブを用いる必要がなく、高感度に検出可能です。
  • あらゆる生物の塩基配列特異的DNA結合因子をリアルタイムで測定できます。
  • シグナルの検出や蛍光プローブなどフレキシブルにご利用いただけます。
  • 異なるDNA結合タンパク質の同時検出が可能です。
  • ハイスループットスクリーニングを目的としたアレイやキットのフォーマットとしてもご利用できます。

使用方法

プロトコール

Bridge-ItR cAMP all in one Assay Kitのプロトコール
図2 Bridge-ItR cAMP all in one Assay Kitのプロトコール

標準曲線の作成方法

Bridge-It cAMP Fluorescence all in one assay

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Bridge-It(R) cAMP Fluorescence all in one assay Kits詳細データ MDM 122938 1 KIT
[1kit/384well plate format]
¥124,000
Bridge-It(R) cAMP Fluorescence all in one assay Kits詳細データ MDM 122939 1 KIT
[1kit/384well plate format]
¥44,000
Bridge-It(R) cAMP Fluorescence all in one assay Kits詳細データ MDM 122940 1 KIT
[1kit/384well plate format]
販売終了

【フォーマット 測定数】
[122938] フォーマット:384 測定数:384
[122939] フォーマット:384 測定数:384×2
[122940] フォーマット:384 測定数:384×3

【構成内容】
・10μM cAMP ストックスタンダード
・アッセイ溶液 A (2×)
・溶解バッファー (10×)
・バッファー B (希釈バッファー)

Bridge-It cAMP Fluorescence designer assay

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Bridge-It(R) cAMP Fluorescence designer assay Kits詳細データ MDM 122935 1 KIT
[1kit/96well plate format]
¥94,000
Bridge-It(R) cAMP Fluorescence designer assay Kits詳細データ MDM 122934 1 KIT
[1kit/96well plate format]
¥50,000

【フォーマット 測定数】
[122935] フォーマット:96 測定数:96
[122934] フォーマット:96 測定数:50

【構成内容】
・10μM cAMP ストックスタンダード
・アッセイ溶液 A
・溶解バッファー (10×)
・バッファー B (希釈バッファー)
・KRB-IBMX バッファー (10×)

L-Tryptophan Fluorescence Assay

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Bridge-It(R) L-Tryptophan Fluorescence Assay Kit詳細データ MDM 1-1-1002B 1 KIT
[1kit/384well plate format]
¥124,000
Bridge-It(R) L-Tryptophan Fluorescence Assay Kit詳細データ MDM 1-1-1002A 1 KIT
[1kit/384well plate format]
¥44,000
Bridge-It(R) L-Tryptophan Fluorescence Assay Kit詳細データ MDM 1-1-1001B 1 KIT
[1kit/96well plate format]
¥94,000
Bridge-It(R) L-Tryptophan Fluorescence Assay Kit詳細データ MDM 1-1-1001A 1 KIT
[1kit/96well plate format]
¥50,000

【フォーマット 測定数】
[1-1-1002B] フォーマット:384 測定数:384
[1-1-1002A] フォーマット:384 測定数:100
[1-1-1001B] フォーマット:96 測定数:96
[1-1-1001A] フォーマット:96 測定数:50

【構成内容】
・1 mM L-トリプトファン スタンダード
・L-トリプトファンアッセイ溶液 A
・バッファー W (希釈バッファー)

SAM Fluorescence Assay

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Bridge-It(R) SAM Fluorescence Assay Kit詳細データ MDM 1-1-1004B 1 KIT
[1kit/384well plate format]
¥124,000
Bridge-It(R) SAM Fluorescence Assay Kit詳細データ MDM 1-1-1004A 1 KIT
[1kit/384well plate format]
¥44,000
Bridge-It(R) SAM Fluorescence Assay Kit詳細データ MDM 1-1-1003B 1 KIT
[1kit/96well plate format]
¥94,000
Bridge-It(R) SAM Fluorescence Assay Kit詳細データ MDM 1-1-1003A 1 KIT
[1kit/96well plate format]
¥50,000

【フォーマット 測定数】
[1-1-1004B] フォーマット:384 測定数:384
[1-1-1004A] フォーマット:384 測定数:100
[1-1-1003B] フォーマット:96 測定数:96
[1-1-1003A] フォーマット:96 測定数:50

【構成内容】
・10mM S-アデノシルメチオニン(SAM)スタンダード
・SAM アッセイ溶液
・バッファー S (希釈バッファー)

96-well non-binding surface black microplate

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
96-well non-binding surface black microplate MDM 163300 1 PLATE
[1plate]
お問い合わせ

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

お問い合わせ

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