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蛍光 / ビオチン標識のリコンビナントプロテイン A 組換えプロテインA　HiLyte™ Fluor／Biotin 標識

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メーカー名：Anaspec, Inc

組換えプロテインA は、大腸菌（E. coli）で発現させた、IgG 結合ドメインのみから構成されるリコンビナントタンパク質です。組換えプロテイン Aは、抗体の精製、免疫沈降、抗体アッセイ系の検出試薬として使用いただけます。

背景

プロテインA とは？

プロテインA （Protein A）とは、黄色ブドウ球菌 Staphylococcus aureus の細胞壁に存在する非グリコシル化タンパク質です［1-4］。プロテイン A は、特定の種の免疫グロブリン Fc部分に強い親和性で結合します［1-4］（表1 参照）。

プロテインA の構造は、システイン残基を含まない～60残基のアミノ酸残基から成る 5つのIgG結合ドメイン（A 、B、C、D、E）と、2つの S. aureus 細胞膜結合ドメイン（X および M）を有します［3］。

**表1．プロテイン A の結合親和性**
Immunoglobulin Species	Protein A Binding
ヒト IgG1, IgG2, IgG4	Strong
ヒト IgG3, IgD	None
ヒト IgM, IgA	Weak
マウス IgG1	Weak
マウス IgG2A, IgG2B, IgG3	Strong
マウス IgM	None
ラット IgG1	Weak
ラット IgG2A, IgG2B	None
ラット IgG2C	Strong
ヤギ（Goat） IgG1	Weak
ヤギ（Goat） IgG2	Strong
ウシ（Bovine） IgG1	None
ウシ（Bovine） IgG2	Strong
モルモット（Guinea Pig） IgG	Strong
ウサギ（Rabbit） IgG	Strong
ニワトリ（Chicken） IgG (IgY)	None

特長

Anaspec社のプロテインAは、IgG結合ドメインのみから構成され、大腸菌で発現させた組換えタンパク質です。見かけの分子量は、S. aureus 由来のネイティブプロテインA が42 kDaであるのに対し、～30kDa の分子量を示します。

プロテインAは、一種類で複数のターゲットを検出できるユニバーサルな試薬です。
HiLyte™ Fluor色素標識のプロテインAを用意
- 様々な蛍光波長でラインアップ
- 従来の色素（FAM、TAMRAなど）と比較し高い蛍光強度
  - Protein A-H488 (Ex/Em = 499/523 nm)
  - Protein A-H555 (Ex/Em = 553/568 nm)
  - Protein A-H647 (Ex/Em = 649/674 nm)
  - Protein A-H680 (Ex/E m= 678/699 nm)
  - Protein A-H750 (Ex/Em = 754/778 nm)
ビオチン標識、未標識のプロテインAも用意

使用データ

Protein A-H488 で染色した3T3細胞 Protein A-H647 で染色した3T3細胞
図1．3T3細胞の染色
ウサギ抗チューブリン IgG（0.5μg/ml）で処理後、
Protein A-H488（A）、 H647（B）0.5μg/ml で検出

図2．ウサギ抗アクチン抗体を ProteinA-H680 および ProteinA-750 標識体で検出した。

図3．プロテイン A の精製度（>95% by SDS-PAGE）

参考文献

1. Björk, I. Eur J Biochem 29 (1972):579-584. 2. Sjödahl, J. Eur J Biochem 78 (1977): 471-490. 3. Schröder, A. K. et al. Immunol 57 (1985): 305-309. 4. Rosenberg, I.M. Protein Analysis and Purification, Birkhäuser, 2005: 41-47.

組換えプロテインA　HiLyte™ Fluor／Biotin 標識

•　HiLyte™ Fluor 色素標識プロテインA

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Protein A, HiLyte Fluor^TM 488	ASI	AS-72235	1 MG	￥48,000
Protein A, HiLyte Fluor^TM 555	ASI	AS-72236	1 MG	￥48,000
Protein A, HiLyte Fluor^TM 647	ASI	AS-72237	1 MG	￥48,000
Protein A, HiLyte Fluor^TM 580	ASI	AS-72238	1 MG	販売終了
Protein A, HiLyte Fluor^TM 750	ASI	AS-72239	1 MG	￥48,000

•　ビオチン標識プロテインA

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Protein A, Biotin	ASI	AS-72234	5 MG	￥56,000

未標識組換えプロテインA

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Protein A	ASI	AS-72233-5	5 MG	￥26,000
Protein A	ASI	AS-72233-25	25 MG	￥51,000
Protein A	ASI	AS-72233-100	100 MG	￥119,000
Protein A	ASI	AS-72233-1000	1000 MG	￥396,000