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記事ID : 34049
研究用

ヒト血漿カリクレインの検出にSensoLyte® Rh110 Plasma Kallikrein Activity Assay kit *Fluorimetric*

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血漿カリクレイン活性を蛍光により検出するキットです。検出にはローダミン110フルオロフォア(Rh110)基質を用います。精製された酵素調製物、生物学的サンプル中の酵素活性を検出するために使用することができ、化合物スクリーニングにも適用することができます。

背景

血漿カリクレインとは

セリンプロテアーゼであるヒト血漿カリクレインは、まず肝臓の不活性血漿プレカリクレインとして合成され、血漿中を循環します。活性化凝固因子XII(FXIIa)によって活性化されると、血漿カリクレインは高分子キニノーゲン(HMWK)からブラジキニン(炎症性メディエーター)を放出します。血漿カリクレインは、血液凝固、古典的補体カスケード経路および代替補体経路の活性化などのいくつかの生理学的および病理学的プロセスに関与します。1,2-5血漿カリクレインはまた、好中球からのエラスターゼ放出の誘発および線維素溶解におけるプロウロキナーゼのウロキナーゼへの変換において役割を果たします。

測定原理

血漿カリクレインはRh110基質を切断し、明るい緑色の蛍光の放出をもたらし、励起/発光=496 nm/520 nmで検出することができます。Rh110の長い波長スペクトルおよび高い吸光係数は、他の反応成分からの大きな感度および少ない干渉を提供します。このアッセイでは、1 ng/mLの血漿カリクレイン活性を検出することができます。

特長

  • ヒト血漿カリクレインの検出
  • アッセイ時間:1時間
  • 高感度:1 ng/mL
  • 詳細なプロトコルとリファレンスを提供

構成内容

  • 血漿カリクレイン基質(切断時:Ex/Em=490/520nm)
  • ヒト血漿カリクレイン
  • 血漿カリクレイン阻害剤
  • Rh110蛍光リファレンススタンダード
  • 血漿プレカリクレイン活性化因子
  • アッセイバッファー

製品データ

血漿試料中に存在するカリクレイン活性
図1. 血漿試料中に存在するカリクレイン活性
血漿サンプルを1×アッセイバッファーで希釈し、1時間のインキュベーション後に蛍光シグナルを測定した。

プレカリクレインが枯渇したヒト血漿で試験したKitの特異性
図2. プレカリクレインが枯渇したヒト血漿で試験したKitの特異性
血漿中のプレカリクレインの欠如は、プレカリクレインのカリクレインへの変換をもたらさなかった。

PKSI-527によるカリクレイン活性の阻害
図3. PKSI-527によるカリクレイン活性の阻害
Ex/Em=490/520 nm(SpectraMax M5e)で蛍光シグナルが検出された。

SensoLyte® Rh110 Plasma Kallikrein 活性測定キット‐蛍光検出‐

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
SensoLyte(R) Rh110 Plasma Kallikrein Activity Assay kit *Fluorimetric*詳細データ ASI AS-72255 1 KIT
¥121,000

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Aggrecanase - 1 活性,Thrombin 活性,Factor Xa 活性 アッセイキット

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[100 assay]
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[100 assay]
¥110,000

【関連情報】

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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