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蛍光相関分光法、蛍光相互相関分光法を簡便に実現蛍光検出器　SMART FCCS

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「SMART FCCS」は、蛍光相関分光法（Fluorescence Correlation Spectroscopy：FCS）または蛍光相互相関分光法（Fluorescence Cross Correlation Spectroscopy：FCCS）という手法による解析を従来機や従来法に比べ簡便に実施できる装置で、蛍光染色試薬や蛍光標識抗体で標識した微粒子の濃度や大きさなどを測定できます。
　従来、FCS解析やFCCS解析を行うためには、共焦点蛍光顕微鏡やフォトンカウンティングのための検出器、相関器とソフトウェアを組み合わせた、大型で非常に煩雑な操作を伴う装置が必要でした。本商品は、卓上のコンパクトなサイズとなっており、特許技術である蛍光相関分光装置^※1を光学系に搭載することで、従来の装置と比較して小型化および煩雑な作業をなくすことができ、さらに解析ソフトウェア^※2と高性能相関器とを一体化することにより、測定後すぐに結果を得ることができる解析機器となっています。

※1 国立大学法人北海道大学が保有する特許技術(特許第６６６７８６８号)
※2 国立研究開発法人産業技術総合研究所で開発

参考文献

光ファイバーを用いたFCS構築
（現在のSMART FCCSとはレンズが異なる形態なので、原理部分についての論文としてご参考ください。）
Johtaro Yamamoto, Masataka Kinjo. Full fiber-optic fluorescence correlation spectroscopy. Opt Express. 2019 May 13;27(10):14835-14841. PMID: 31163925 DOI: 10.1364/OE.27.014835
ファイバー型FCSで蛍光色素溶液と蛍光標識タンパク質の測定を行った論文
（現在の商品に近い構成でFCS（一色）測定のみです。FCCS（2色）の記述はありません。）
Jhotaro Yamamoto, A. Sasaki. Fluorescence Correlation Spectroscopy Measurement Based on Fiber Optics for Biological Materials. Appl. Sci. 2021, 11(15), 6744; DOI: 10.3390/app11156744

● 貸出用のデモ機をご用意しております。
札幌事業所(primarycell@cosmobio.co.jp) までお問い合わせください。

使用目的

　FCS解析やFCCS解析は、通常は分子間相互作用の解析などに使われますが、その原理を近年話題の細胞外小胞のひとつであるエクソソームの検出や凝集タンパク質の検出などに応用したものが本商品です。2色の蛍光を使い分けることができるため、これらのマーカーに対する抗体に蛍光標識を付しておきエクソソームに結合させ、それらを検出することができます。

エクソソーム研究への活用

　FCS解析やFCCS解析は、通常は分子間相互作用の解析などに使われる機会が多いですが、本機器はその原理をエクソソームの検出や凝集タンパク質の検出などに応用が可能です。
　例えば、エクソソームの表面にはCD9やCD63などが存在しており、エクソソームを検出するためのマーカーとして利用されていますが、エクソソームの存在する場所や時期、内包する内容物の違いなどによりこれらのマーカーの発現が異なることが報告されています。どのような状況下でどのようなマーカーが発現しているかを調べることは、治療用エクソソームの品質管理、新規がんマーカーや疾患マーカーの発見、およびそれを利用した迅速診断技術など、エクソソームの特徴を明らかにすることについて非常に有意義な知見を得ることになります。「SMART FCCS」では、2色の蛍光を使い分けることができるため、これらのマーカーに対する抗体に蛍光標識を付しておきエクソソームに結合させ、それらを「SMART FCCS」で検出することができます。

特長

1～200 nm の径の蛍光粒子を測定可能
２波長のレーザーを装備（Ex. 488, 633 nm）
単色測定(FCS)、二色測定(FCCS) の両モードを搭載
コスモ・バイオ各種エクソソーム抗体を使用して、FCS/FCCS によるエクソソームの定量解析が可能
FCS/FCCS技術を用いた測定が簡便
2色同時測定による相互相関を計測可能

測定手順

測定原理

蛍光色素標識抗体を用いたエクソソーム検出・定量解析例

SMART FCCS によるHCT116 細胞培養上清由来エクソソームの検出

仕様

本体仕様

製品サイズ	高さ230mm×幅300mm×奥行520mm
重量	約8kg
電源	AC100V、60W

光学仕様

励起波長（緑）	488±10nm
励起出力（緑）	10mW以上（光源出射端において）
検出用フィルター（緑）	ET535/50m（CHROMA）
検出器（緑）	PMT（浜松ホトニクス H10682-210）
励起波長（赤）	633±10nm
励起出力（赤）	10mW以上（光源出射端において）
検出用フィルター（赤）	ET665LP-TRF（CHROMA）
検出器（赤）	PMT（浜松ホトニクス H10682-01）
蛍光分光用フィルター	T570lpxr（CHROMA）
対物レンズ^※	20倍（オリンパス UAPON20XW340）or 40倍（オリンパス UAPON40XW340）
コリメーター^※	20mm（Thorlabs C20APC-A）or 40mm（Thorlabs C40APC-A）

※対物レンズとコリメーターは選択式で、仕様によって本体価格が変更になります。

解析仕様　

マルチプルタウ方式ハードウェア相関器搭載
入力	2チャンネル
自己相関	2チャンネル（緑、赤各1チャンネル）
相互相関	1チャンネル
最小サンプリング時間および自己相関関数時間分解能	640ns