記事ID ： 44768

GMPグレードのアニマルフリーサーモリシン Thermolysin (Animal-Free)

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メーカー名：VitaCyte, LLC

本サーモリシン(サーモライシン)は、GMPグレードの動物由来成分不使用 (AOF:Animal Origin Free)かつ、無菌的に分注され、凍結乾燥されたBacillus thermoproteolyticus由来の精製プロテアーゼです。
げっ歯類、カニクイザル¹、およびヒト膵臓から膵島を単離するために精製コラゲナーゼとともに使用できる熱安定性中性プロテアーゼ(NP:Neutral Protease)です。

特長

さまざまな用途で細胞を単離する際の生体外での使用に適した GMPグレードの酵素
信頼性の高い性能を実現するために、ロット間の酵素の一貫性が優れるように製造
ロット毎にQC 分析結果を含む分析証明書(COA)を提供
エンドトキシンレベル :<50 EU/mg
中性プロテアーゼユニット :>2.3 Million

中性プロテアーゼの最適量

精製サーモリシンの使用濃度は、製品に含まれる総酵素活性によって決まります。通常、FITC-BSA 基質を使用して測定される総中性プロテアーゼ単位として表されます。
いくつかの報告において、膵島単離における最適量の中性プロテアーゼを使用することの重要性を示しています。
Riccordi 法³に基づく消化手順において、6 mgの精製サーモリシンを許容用量の精製 C. histolyticum由来コラゲナーゼと組み合わせると、平均的なサイズのヒト膵臓から膵島を単離するのに十分でした²。サーモリシンの用量を増やすと、膵島および腺房細胞の損傷が生じ、多くの場合、細胞培養後の精製膵島の回収率が低下します。

参考文献

Qi M, Wang Y, Formo K, Marchese E, Wang S, McGarrigle JJ, et al. Implementation of a simplified method of islet isolation for allogeneic islet transplantation in cynomolgus monkeys. Pancreas. 2014;43(2):226-35.
Balamurugan AN, Breite AG, et al. (2010) Successful human islet isolation and transplantation indicating the importance of class 1 collagenase and collagen degradation activity assay. Transplantation 89, 954-61.
Ricordi C. (1992) 1892-1992 One Century of Transplantation for Diabetes. Pancreatic Islet Cell Transplantation. Austin R.G. Landes Co. 99-112.

Thermolysin (Animal-Free) GMPグレード

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Animal-Free Thermolysin	VIT	002-3000	1 VIAL	￥60,000

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