液相・受容体依存・脂質ラフト・神経小胞輸送を可視化するCF® Dyeシリーズ 小胞輸送トレーサー│Biotium社

Biotium社では、小胞・膜輸送経路の可視化に最適な蛍光トレーサー製品をラインアップしています。液相エンドサイトーシスやタンパク質取り込み、リサイクル小胞、脂質ラフト、神経小胞など、輸送経路に応じて選択可能です。明るく光安定性の高いCF® Dyeで標識されています。

明るく蛍光安定性の高いCF®色素で標識した小胞輸送トレーサーのラインナップです。

水溶性の分岐鎖多糖類で、液相エンドサイトーシスで取り込まれた物質がリソソームへ輸送される経路を追跡するマーカーとして用いられます。また、上皮細胞や内皮細胞のバリア機能や透過性を評価するトレーサーとしても利用されます。ホルムアルデヒド固定してもエンドソーム内のデキストランの局在を維持しますが、界面活性剤による透過処理には対応していません。

商品リスト

使用実績

蛍光標識されたウシ血清アルブミンで、タンパク質の取り込みや細胞透過性の研究に適しています。液相トレーサーとして、デキストランとの併用も可能です。

商品リスト

使用実績

トランスフェリンは、受容体を介したエンドサイトーシスを介して脊椎動物細胞に鉄を運ぶ糖タンパク質鉄輸送体です。細胞表面の受容体に結合後、クラトリン被覆ピットの陥入により速やかに細胞内へ取り込まれます。

酸性環境によりトランスフェリン-受容体複合体から鉄が放出されやすくなります。鉄が放出された後、アポトランスフェリンは細胞膜に再輸送され、受容体から解離して再び鉄を回収します。

リサイクリングエンドソームの顕微鏡観察に適しています。

簡易プロトコル（哺乳類細胞）

• 前処理：細胞を無血清培地で1時間培養（血清除去）し、冷PBS＋0.1% BSAで洗浄。
• 染色：冷25 ?g/mL Transferrin (in PBS + 0.1% BSA)を添加し、4℃ 遮光下で90分静置。
• 洗浄：冷PBS + 0.1% BSAで3回洗浄。
• トラフィッキング：温めた完全培地を添加し、37℃ 遮光下で5分〜1時間静置。
• 観察：冷PBS + 0.1% BSAで洗浄後、4%PFAで室温15分間固定し、顕微鏡観察または免疫染色へ。

商品リスト

使用実績

コレラ毒素Bサブユニットは、細胞膜上の脂質ラフトに存在するガングリオシドGM1に結合します。細胞種に応じてクラトリン依存性または非依存性のいずれかの経路で細胞内に取り込まれることが報告されています。
細胞表面の脂質ラフトの標識や、ニューロンの逆行性トレーサーとして使用できます。

商品リスト

使用実績

両親媒性のカチオン性スチリル色素で、疎水性末端が細胞膜に挿入されることで蛍光を発します。神経刺激後のエンドサイトーシスによって小胞に取り込まれ、内部に留まります。この性質により、蛍光観察を通じてエンドサイトーシス小胞の動態を可視化できます。非神経系細胞においても、小胞の標識および追跡に利用可能です。

簡易プロトコル（カバーガラス上での神経細胞染色例）

• 染色：色素を 4 ?M にキット付属のTyrode溶液で希釈し、室温で1分間静置。
• 洗浄： Tyrode溶液で1分間浸漬。その後、Tyrode溶液で数回洗浄。
• 観察： Tyrode溶液でマウントし、蛍光顕微鏡で観察。※
  ※固定不可。染色後のシナプス小胞の放出を防ぐため、0.5 ?M Tetrodotoxinの添加を推奨

商品リスト

使用実績

BactoView™ Live dyes は、蛍光性の細菌用 DNA 染色試薬です。細胞透過性が高く明るいシグナルを示し、生菌・死菌を問わず、グラム陽性菌およびグラム陰性菌の DNA を染色でき、顕微鏡観察やフローサイトメトリーに使用できます。

商品リスト

使用実績

※  表示価格について

※  CAS Registry Numbers have not been verified by CAS and may be inaccurate.