記事ID ： 16532

免疫グロブリンL鎖のκ鎖／λ鎖 mRNA を検出 ZytoFast® Igκ/Igλ-CISH システム

メーカー名：ZytoVision GmbH

ZytoFast® Igκ/Igλ-CISH プローブ・検出キットは、パラフィン包埋組織切片や細胞サンプル中の免疫グロブリンL鎖（軽鎖）のκ鎖／λ鎖 mRNA の検出にご使用いただけます。

背景

B細胞（Bリンパ球）は、骨髄でリンパ球系幹細胞から分化します。
各B細胞クローンは、2本の同一のH鎖と、2本の同一のL鎖（κまたはλ）を発現します。κ/λ比の決定は、腫瘍性および非腫瘍性（反応性過形成）のリンパ増殖性疾患を区別するために有用です。κ鎖を発現している細胞とλ鎖を発現している細胞が両方ある場合（多クローン性）は反応性過形成を示し、いずれか一方のみを発現している場合（単クローン性）は、悪性リンパ腫を示すと考えられます。

κ鎖とγ鎖を免疫組織化学により検出すると、バックグラウンド染色が高くなる場合がありますが、in situ ハイブリダイゼーションでは、ほぼバックグラウンドのないシグナルが得られ、リンパ球集団のクローン性を安全かつ簡単に解析することができます。

特長

ZytoFast® human Ig-kappa Probe
（ジゴキシゲニン標識 - 品番：T-1115-400）

ヒト免疫グロブリンL鎖のκ鎖定常領域をコードする mRNA 配列に直接結合するプローブです。
L鎖にκ鎖を持つ抗体を発現するB細胞は細胞質が染色されますが、γ鎖を発現するB細胞は染色されません。

ZytoFast® human Ig-lambda Probe
（ジゴキシゲニン標識 - 品番：T-1116-400）

ヒト免疫グロブリンL鎖のλ鎖定常領域をコードする mRNA 配列に直接結合するプローブです。
L鎖にλ鎖を持つ抗体を発現するB細胞は細胞質が染色されますが、κ鎖を発現するB細胞は染色されません。

ZytoFast® human Ig-kappa/Ig-lambda Probe
（ビオチン／ジゴキシゲニン標識 - 品番：T-1017-400）

ジゴキシゲニン標識 Igκ mRNA 特異的プローブと、ビオチン標識 Igλ mRNA 特異的プローブが混合されています。
＊ZytoFast® human Ig-kappa/Ig-lambda CISH キット（品番：T-1005-40）、 ZytoFast® human Ig-kappa/Ig-lambda Permanent CISH キット（品番：T-1105-40）に含まれています。

ZytoFast® human Ig-kappa/Ig-lambda CISH キット（品番：T-1005-40）

L鎖にκ鎖を持つ抗体を発現するB細胞は細胞質が赤く染色され、γ鎖を発現するB細胞は細胞質が濃い青紫色に染色されます。

ZytoFast® human Ig-kappa/Ig-lambda Permanent CISH キット（品番：T-1105-40）

L鎖にκ鎖を持つ抗体を発現するB細胞は細胞質が緑色に染色され、γ鎖を発現するB細胞は細胞質が permanent red で染色されます。

免疫グロブリンの基本構造

図1 免疫グロブリンの基本構造
H鎖（黒色）、L鎖のγ鎖（青色）κ鎖（赤色）。ZytoFast® lg-lambda probe および lg-kappa probe は、軽鎖の定常領域（C）をコードする mRNA 配列を標的としており、それぞれ濃い青色と濃い赤色で示す。また、可変領域（V）を薄い青色と薄い赤色で示す。

製品データ

標的細胞が陽性の場合、細胞質が染色されます。
使用する基質により、沈殿物の色が異なります。

基質	色
NBT/BCIP	濃い青紫色
AEC	濃い赤色
DAB	濃い茶色
HRP-Green	緑色
Permanent Red	濃い赤色

ZytoFast ® human Ig-kappa/Ig-lambda Permanent CISH キットを用いた、パラフィン包埋扁桃組織の CISH 解析。

図2 ZytoFast® human Ig-kappa/Ig-lambda Permanent CISH キットを用いた、パラフィン包埋扁桃組織の CISH 解析。

ZytoFast ® human Ig-kappa/Ig-lambda CISH キットを用いた、骨髄生検パラフィン包埋標本の CISH 解析

図3 ZytoFast® human Ig-kappa/Ig-lambda CISH キットを用いた、骨髄生検パラフィン包埋標本の CISH 解析。

ZytoFast® Ig-kappa/Ig-lambda プローブ・検出キット
ジゴキシゲニン標識

プローブ

プローブ単品です。検出キットを組み合わせてお使いください。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ZytoFast^(R) human lg-kappa Probe, Digoxigenine	ZYV	T-1115-400	400 UL [40 test]	￥33,000
ZytoFast^(R) human lg-lambda Probe, Digoxigenine	ZYV	T-1116-400	400 UL [40 test]	￥33,000

検出キット

Digoxigenin 標識された ZytoFast® プローブを検出するための試薬セットです

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ZytoFast^(R) PLUS CISH Implementation Kit AP-NBT/BCIP, Digoxigenine	ZYV	T-1061-40	40 TEST	￥103,000
ZytoFast^TM PLUS CISH Implementation Kit HRP-DAB, Digoxigenine	ZYV	T-1063-40	40 TEST	￥94,000
ZytoFast^(R) PLUS CISH Implementation Kit AP-Permanent Red, Digoxigenine	ZYV	T-1151-40	40 TEST	￥96,000

構成内容
品番	品名	構成内容
T-1061-40	ZytoFast® PLUS CISH Implementation Kit AP-NBT/BCIP	DNA (+) Control Probe DNA (-) Control Probe 28S rRNA (+) Control Probe RNA (-) Control Probe Heat Pretreatment Solution EDTA Pepsin Solution 20x Wash Buffer TBS Rabbit-anti-DIG Anti-Rabbit-AP-Polymer NBT/BCIP Solution Nuclear Red Solution Mounting Solution (alcoholic)
T-1063-40	ZytoFast® PLUS CISH Implementation Kit HRP-DAB	DNA (+) Control Probe DNA (-) Control Probe 28S rRNA (+) Control Probe RNA (-) Control Probe Heat Pretreatment Solution EDTA Pepsin Solution 20x Wash Buffer TBS Mouse-anti-DIG Anti-Mouse-HRP-Polymer DAB Solution A DAB Solution B Nuclear Blue Solution Mounting Solution (alcoholic)
T-1151-40	ZytoFast® PLUS CISH Implementation Kit AP-Permanent Red	DNA (+) Control Probe DNA (-) Control Probe 28S rRNA (+) Control Probe RNA (-) Control Probe Heat Pretreatment Solution EDTA Pepsin Solution 20x Wash Buffer TBS Rabbit-anti-DIG Anti-Rabbit-AP-Polymer Permanent Red Solution A Permanent Red Solution B Mayer’s Hematoxylin Solution Mounting Solution (alcoholic)

ビオチン／ジゴキシゲニン標識

プローブ

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ZytoFast^(R) human lg-kappa/lg-lambda Probe, Digoxigenine/Biotin	ZYV	T-1017-400	400 UL [40 test]	￥47,000

キット

ZytoFast® human Ig κ / λ プローブと検出試薬のセットです。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ZytoFast^(R) human lg-kappa/lg-lambda CISH Kit, Digoxigenine/Biotin	ZYV	T-1005-40	40 TEST	￥132,000
ZytoFast lg-kappa/lg-lambda Permanent CISH Kit, Digoxigenine/Biotin	ZYV	T-1105-40	40 TEST	￥132,000

構成内容
品番	品名	構成内容
T-1005-40	ZytoFast® human lg-kappa/lg-lambda CISH Kit	Ig-kappa/lg-lambda Probe (Digoxigenin/Biotin labeled) 28S rRNA (+) Control Probe (Biotin labeled) RNA (-) Control Probe (Biotin labeled) Pepsin Solution 20x Wash Buffer TBS HRP-anti-Digoxigenin AP-Streptavidin AEC Solution NBT/BCIP Solution
T-1105-40	ZytoFast® human Ig-kappa/Ig-lambda Permanent CISH Kit	Ig-kappa/lg-lambda Probe (Digoxigenin/Biotin labeled) 28S rRNA (+) Control Probe (Biotin labeled) RNA (-) Control Probe (Biotin labeled) Pepsin Solution 20x Wash Buffer TBS HRP-anti-Digoxigenin AP-Streptavidin HRP-Green-Solution A HRP-Green-Solution B Permanent Red Solution A Permanent Red Solution B Nuclear Blue Solution Mounting Solution (alcoholic)