SPERM HY-LITER™について

可能です。SPERM HY-LITER™ はヒト精子の免疫蛍光検出システムであり、試薬は標準的なDNA抽出またはPCR増幅プロトコルに影響を及ぼすことはありません。多くの研究所で、SPERM HY-LITER™で染色済みのスライドから体細胞および性染色体ベースの完全なDNAプロファイリングに成功しています。さらに、DNAプロファイルを得るために、染色されたスライドのin situ消化を行うためのプロトコルの用意もございます。

本プロトコルは、Alexa488標識モノクローナル抗体が染色されたスライドのすべての層の精子に到達できるように設計されています。細胞層による蛍光検出の阻害がないため、細胞下、細胞上、プレパラートの全ての層に存在する精子を容易に識別することができます。

染色手順はシンプルで再現性が高く、高密度の細胞調製に特に適しています。本製品のプロトコルで細胞は損傷を受けることなく、染色中に形態が失われることはありません。染色開始時に尾部、中間部、先体などが存在する場合は、染色終了時にも存在しますが、この抗体は、犯罪捜査の証拠として唯一残る精子の下部構造である精子頭部を特異的に標的にします。

SPERM HY-LITER™ は、人間の精子頭部を特異的に染色します。このキットでは、家畜や高等霊長類の精子は標識されません。

ヒト精子の頭部のみが反応します。他の細胞タイプや体液はキットによって染色されません。

1M-DTT (pH 8.0、調整方法のプロトコルはご用意がございます)と、分子生物学用クオリティの水が必要です。その他の必要な物はキットに同梱されています。調製したサンプルに含まれるDTTの終濃度は12.5 mM程度です。

SPERM HY-LITER™ は、スメアスライドおよび抽出物に対して非常に効果的かつ効率的に染色できます。SPERM HY-LITER™は細胞調製物が高密度であればあるほど優れた性能を発揮します。

可視化には、適切な波長の光源と適切なフィルターキューブを持つ蛍光顕微鏡が必要です。Independent Forensics of Illinois社では、蛍光顕微鏡の光学染色法として位相差の付加を強く推奨しますが、厳密には必須ではありません。

SPERM HY-LITER™には２つの蛍光分子が含まれています。１つ目は種に関係なく（精子、真菌、胞子、花粉、細菌）核を染色するDAPIで、２つ目がAlexa 488です。これらの蛍光分子自体は暗所保存で8-10年安定ですが、スライドに使用することで安定性は低下し寿命は短くなります。また、DNAの解析が必要な場合、退色防止剤を含む水溶性の封入剤でマウントしてください。現在の実験では、スライドは少なくとも２年間は安定です（こちらは進行中の実験のため、有効期限はさらに長くなる可能性がございます）。

精子の同定に要する時間が大幅に短縮される（最大80%）こと、DNAプロファイルは観察される精子細胞数と相関して成功率は上がるため、SAEによるDNA-STR分析の成功率が高まること、精子の同定に関して裁判所で認められる結果が得られること、精子の同定が科学的にも手続き的にも正当化できることなどが利点としてあげられます。

海外ですが、SPERM HY-LITER™をご利用いただいてる研究所もございます。システムを購入したり、検証や方法をリリースしている研究所もございます。

はい、いくつかございます。本製品の様々な応用例を説明した概要や文献リストについては、お問い合わせください。

はい、多数のスライドを一度に染色できます。実際、これは SPERM HY-LITER™ でスライドを染色する際に非常に効率的な方法です。

はい、自動化に対応しております。SPERM HY-LITER™は、ソフトウェアを用いて自動で精子を識別する際に十分なS/N比を提供できる唯一の方法です。KPIC 染色標本に依存する方法では、ケースワーク標本のバックグラウンドシグナルにより、精子を識別することができません。

現在、SPERM HY-LITER™ キットの有効期限は 6 か月です。

はい、SPERM HY-LITER™のスライドは11 mmのウェルが2つあるスライドが標準ですが、他にもさまざまなサイズと構造のスライドが利用できます。詳しくは現在のSPERM HY-LITER™ページをご参照ください。