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研究用

Caspase-3 活性を蛍光検出生細胞内 リアルタイム カスパーゼ3 アッセイ NucView™

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生細胞内でカスパーゼ3の活性をリアルタイムで検出できる基質/キットです。
カスパーゼ3の検出と細胞の核染色を同時に行えます。

NucView™ 488(緑色)、NucView™ 405(青色)、NucView™ 530(オレンジ色)の3種類の蛍光基質をご用意しております。

製品使用文献多数!!

NucView™ 488 カスパーゼ3基質を用いたアポトーシスの検出は、これまでに90種類以上の初代培養細胞/不死化細胞(3次元培養を含む)で、150報以上報告されています。

使用目的

NucView™ カスパーゼ3 基質

DEVD-NucView™ カスパーゼ3 基質は、インタクトな細胞内でカスパーゼ3活性をリアルタイムに追跡できる蛍光基質です。

反応前は、カスパーゼ3 基質ペプチドである DEVD がDNA結合色素に付加されており、色素がDNAに結合できないため非蛍光性です。基質が細胞の細胞質に入り、カスパーゼ3により切断されると、DNAに高い親和性を示す蛍光色素が放出され、細胞核に移動して核を染色します。したがって、本基質は、アポトーシス細胞内でカスパーゼ3を検出するだけではなく、核の形態を可視化することもできます。本基質は、活性型カスパーゼを阻害剤で不可逆的に標識するFLICA(fluorescently-labeled caspase inhibitor assays)とは異なり、カスパーゼ活性を阻害しないため、カスパーゼ活性をリアルタイムでモニターすることができます。

NucView™ カスパーゼ3 基質によるカスパーゼ3活性の検出原理

図1 NucView™ カスパーゼ3 基質によるカスパーゼ3活性の検出原理

特長

  • 生細胞内でカスパーゼ 3/7 活性をリアルタイムに検出できます。
  • 洗浄操作不要のホモジニアスアッセイで、15-30 分でカスパーゼ活性を検出する、
    または、カスパーゼ活性を長期的にリアルタイムでモニタリングすることが可能です。
  • カスパーゼ3の検出と細胞の核染色を同時に行えます。
  • NucView™ 488緑色蛍光基質(Ex/Em 504/534 nm)
    フローサイトメトリー、顕微鏡、マイクロプレートリーダーで検出(FITCチャンネル)
  • NucView™ 405青色蛍光基質(Ex/Em 429/469 nm)
    フローサイトメトリー、顕微鏡で検出(405 nm レーザー、DAPI/Pacific Blue® チャンネル)
  • NucView™ 530オレンジ色蛍光基質(Ex/Em 528/563 nm)
    フローサイトメトリー、顕微鏡で検出(Cy®3/R-PE チャンネル)

動画で見る「カスパーゼ3活性の検出」

癌細胞のアポトーシス

NucView™ 488 カスパーゼ3 基質を使用し、 Incucyte ZOOM™ により画像化

HT-1080 ヒト線維肉腫由来細胞株を、5 uM NucView™ 488 カスパーゼ3 基質存在下で、150 nM カンプトテシンで処理した。細胞を、30分おきに24時間画像化した。カスパーゼ3の活性により基質から放出された NucView™ 488 遊離色素がDNAに結合して発する緑色蛍光と、細胞形態の変化によって、アポトーシスを観察できる。
動画のご提供: Essen Bioscience社

使用例

スタウロスポリン処理によりアポトーシスを誘導した Jurkat 細胞で、NucView™ 488 カスパーゼ3 基質を用いて、カスパーゼ3 活性の時間変化を検出した。

図2 Jurkat 細胞におけるカスパーゼ3 活性の時間変化
スタウロスポリン処理によりアポトーシスを誘導した Jurkat 細胞で、NucView™ 488 カスパーゼ3 基質を用いて、カスパーゼ3 活性の時間変化を検出した。BD FACSCalibur フローサイトメーター(FL1 channel )で解析。

アポトーシスを誘導した Jurkat 細胞

図3 アポトーシスを誘導した Jurkat 細胞
NucView™ 488 カスパーゼ3 基質(緑色)、CF647 アネキシンV(マゼンタ)で染色。

MCF-7 細胞におけるカスパーゼ活性の検出

図4 MCF-7 細胞におけるカスパーゼ活性の検出
NucView™ 530(赤色)、MitoView™ Blue によるミトコンドリア膜電位(シアン色)、CF™488A によるアネキシンV(緑色)の染色により、カスパーゼ活性を検出した。
(A)未処理の細胞、(B)スタウロスポリンで一晩アポトーシスを誘導した細胞。

NucView™ カスパーゼ3 基質

NucView™ 488(緑色

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
NucViewTM 488 Caspase-3 Substrate詳細データ BTI 10402 100 UL
[1mM in DMSO]
¥84,000
NucViewTM 488 Caspase-3 Substrate詳細データ BTI 10402-T 10 UL
[1mM in DMSO]
¥17,000
NucViewTM 488 Caspase-3 Substrate詳細データ BTI 10403 100 UL
[1mM in 1x PBS]
¥84,000
NucViewTM 488 Caspase-3 Substrate詳細データ BTI 10403-T 10 UL
[1mM in 1x PBS]
¥17,000

NucView™ 405(青色

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
NucView 405 Caspase-3 Substrate詳細データ BTI 10405 100 UL
[1 mM in DMSO]
¥84,000
NucView 405 Caspase-3 Substrate詳細データ BTI 10405-T 10 UL
[1 mM in DMSO]
¥17,000

NucView™ 530(オレンジ色

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
NucView 530 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO詳細データ BTI 10406 100 UL
[1 mM in DMSO]
¥84,000
NucView 530 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO, Trial Size詳細データ BTI 10406-T 10 UL
[1 mM in DMSO]
¥17,000

NucView™ 488 カスパーゼ3 アッセイキット

[構成内容]

  • NucView™ 488 カスパーゼ3 基質
  • カスパーゼ3 阻害剤 Ac-DEVD-CHO
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Nuc ViewTM 488 Caspase 3 Assay Kit詳細データ BTI 30029 1 KIT
[100-500 assays]
¥92,000
Nuc ViewTM 488 Caspase 3 Assay Kit, Trial Size詳細データ BTI 30029-T 1 KIT
[25-125 assays]
¥25,000

デュアルアポトーシスアッセイ

アポトーシス細胞のカスパーゼ3活性と、ホスファチジルセリン(PS)の移行を同時に検出できます。

 

[構成内容]

  • NucView™ 488 カスパーゼ3 基質
  • 蛍光標識アネキシンV(各キットにより異なる)
  • 5X アネキシンV 結合バッファー
  • カスパーゼ3 阻害剤 Ac-DEVD-CHO

 

NucView™ 488 カスパーゼ3 基質 & スルホローダミン 101(Texas Red®) アネキシンV

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Dual Apoptosis Assay with NucView 488 caspase-3 substrate and Texas Red-Annexin V詳細データ BTI 30030 1 KIT
[50 - 250 assays]
¥92,000

NucView™ 488 カスパーゼ3 基質 & CF594 アネキシンV

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Dual Apoptosis Assay with NucView(R) 488 Caspase-3 Substrate and CF(R)594 Annexin V, CFTM 594詳細データ BTI 30067 1 KIT
[50 assays]
¥96,000

NucView™ 488 カスパーゼ3 基質 & CF640R アネキシンV

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Dual Apoptosis Assay with NucViewTM 488 Caspase-3 Substrate and CF640R-Annexin V (50 assays) BTI 30073 1 KIT
¥85,000

NucView™ 488 & MitoView™ 633 アポトーシスアッセイキット

アポトーシス細胞のカスパーゼ3活性と、ミトコンドリアの膜電位の変化を検出できます。

 

[構成内容]

  • NucView™ 488 カスパーゼ3 基質
  • MitoView™ 633
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
NucView 488 and MitoView 633 Apoptosis Assay Kit詳細データ BTI 30062 1 KIT
[100 assays]
¥92,000

NucView™ 488 & RedDot™ 2 アポトーシス&ネクローシスキット

NucView™ 488 カスパーゼ3 基質と、細胞膜の完全性が損なわれたネクローシス/後期アポトーシス細胞を染色する近赤外蛍光試薬 RedDot™ 2 が入ったキットです。アポトーシス細胞 および ネクローシス細胞を検出できます。

 

[構成内容]

  • NucView™ 488 カスパーゼ3 基質
  • RedDot™ 2
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
NucView 488 and RedDot 2 Apoptosis & Necrosis Kit詳細データ BTI 30072 1 KIT
¥81,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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