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研究用

ES 細胞の未分化性と多分化能の解析に有用ES細胞分化検出キット StemTAG™ アルカリホスファターゼ染色/活性測定キット

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StemTAG™ Alkaline Phosphatase Staining Kit はアルカリホスファターゼ活性染色を通してES 細胞の未分化/ 分化をモニタリングするのに効果的なキットです。

また、StemTAG™ Alkaline Phosphatase Activity Assay Kit はアルカリホスファターゼ活性の定量により未分化/分化をモニタリングするのに効果的なキットです。

使用目的

胚性幹細胞(ES 細胞)は内部細胞塊(ICM)から単離された初期胚由来の幹細胞で、未分化の状態を無限に維持できる能力を持ち、またすべての種類の細胞に分化できるという特徴もあります。マウスES 細胞の研究に基づいて、ヒトES 細胞株がDr.James Thomson らによりはじめて樹立されました。マウスES 細胞のように、ヒトES 細胞は細胞膜アルカリフォスファターゼ(ALP)やOct-4 という内部細胞塊や生殖細胞の形成に欠かせない転写因子を高レベルで発現します。しかしマウスES 細胞とは異なり、ヒトES 細胞は発生段階特異的胎児性抗原(SSEA-1)を発現しません。さらに、ヒトES 細胞を長期間増殖させ続けるためには、フィーダー細胞としてマウス線維芽細胞を与え共培養する必要があります。ヒトES 細胞株は白血病抑制因子(LIF)などの外因性のサイトカインを加えたりゼラチンコートプレートでの培養をしたとしても、フィーダー細胞層がなければ自己の未分化状態を維持することができません。

幹細胞マーカー

表1
マーカー名 マウスES細胞 マウスEG細胞 ヒトES細胞 ヒトEG細胞 ヒトEC細胞
AP
SSEA-1
SSEA-4
TRA-1-60
TRA-1-81
Oct-4 unknown

表1 に示すように、各幹細胞は自己複製のために異なる成長環境を必要とし、また異なる細胞表面マーカーを発現しますが、アルカリホスファターゼは幹細胞の種類に共通した幹細胞マーカーとして広く用いられています。

使用例

CBL_00640001_CBA_fig.jpg

StemTAG™ アルカリホスファターゼ染色キット

アルカリフォスファターゼ活性染色によりES細胞の未分化/分化をモニタリング

【構成内容】
●固定液
●StemTAG™ ALP 染色液 A
●StemTAG™ ALP 染色液 B

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
StemTAGTM Alkaline Phosphatase Staining Kit (Red)詳細データ CBL CBA-300 1 KIT
[100 assays]
¥71,000
StemTAGTM Alkaline Phosphatase Staining Kit (Purple)詳細データ CBL CBA-306 100 ASSAY
¥71,000

StemTAG™ アルカリホスファターゼ活性測定キット(比色/蛍光)

多数サンプルの解析にオススメ!コロニーカウントの必要はありません

【使用目的】
アルカリフォスファターゼ活性をプレートリーダーで検出する感度が高い蛍光検出キットが発売されました。

【構成内容】
StemTAG™ Alkaline Phosphatase Activity Assay Kit
●StemTAG™ ALP 活性測定基質
●細胞溶解液
●10X 反応停止液
●ALP 活性測定スタンダード

StemTAG™ Alkaline Phosphatase Activity Assay Kit, Fluorometric
●StemTAG™ ALP 活性測定蛍光基質(100×)
●細胞溶解液
●反応停止液
●リファレンス スタンダード

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
StemTAGTM Alkaline Phosphatase Activity Assay Kit, Colorimetric詳細データ CBL CBA-301 1 KIT
[100 assays]
¥61,000
StemTAG Alkaline Phosphatase Activity Assay Kit, Fluorometric詳細データ CBL CBA-307 100 ASSAY
¥69,000

StemTAG™ アルカリホスファターゼコンプリートキット

お得なセットです;染色キット(品番:CBA-300)と活性測定キット(品番:CBA-301、CBA-307)を組み合わせたキットです。

StemTAG™ Alkaline Phosphatase Complete Kit
【使用目的】
品番CBA-300と品番CBA-301のセット品で、アルカリホスファターゼ染色と活性測定ができます。

StemTAG™ Alkaline Phosphatase Staining and Activity Assay Kit, Fluorometric
【使用目的】
品番CBA-300と品番CBA-307のセット品で、アルカリホスファターゼ染色と活性測定(蛍光)ができます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
StemTAGTM Alkaline Phosphatase Staining and Activity Assay Kit, Colorimetric詳細データ CBL CBA-302 1 KIT
[2 x 100 assays]
¥102,000
StemTAG Alkaline PhosphataseStaining and Activity Assay Kit, Fluorometric詳細データ CBL CBA-308 2*100 ASSAY
¥113,000

SNL76/7 フィーダー細胞

SNL 76/7フィーダー細胞はネオマイシン耐性とマウスLIF遺伝子を形質転換したマウス胚線維芽細胞、STO細胞のクローンに由来しています。

【特長】
● この不死化細胞はヒトおよびマウスiPS細胞培養においてもES細胞培養においても未分化維持するフィーダー細胞として有用です。
● iPS細胞、ES細胞を加える前にマイトマイシンC等で処理することにより有糸分裂的に不活化する必要があります。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
SNL Feeder Cells詳細データ CBL CBA-316 1 VIAL
¥124,000

JK1 フィーダー細胞

JK1フィーダー細胞はMEF細胞に比べて大きく改善された性質を示します。JK1細胞は不死化CD34+精巣間質細胞で、さまざまなタイプの幹細胞(多能性幹細胞やSPC・MASCなどの生殖系列幹細胞、原始性生殖系列細胞など)を長期間維持するのに有用です。

【特長】
● JK1細胞は、1年以上の間連続継代しても幹細胞の自己再性能を維持させます。
● ES細胞を加える前にマイトマイシンC等で処理することにより有糸分裂的に不活化する必要があります。
● 株化細胞なのでロット間差がなく安定してお使いいただけます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
JK1 Feeder Cells詳細データ CBL CBA-315 1 VIAL
販売終了

フィーダー細胞

MEF フィーダー細胞
品番 耐性 継体数 形状 細胞数
CBA-310 4 1mL
(90%FBS+10%DMSO溶液)
5×106 cells
CBA-311 ネオマイシン 5
CBA-312 ピューロマイシン 5
CBA-313 ハイグロマイシン 5
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
MEF Feeder Cells詳細データ CBL CBA-310 1 VIAL
[5×10E6 cells]
¥59,000
MEF Feeder Cells (Neomycin-resistant)詳細データ CBL CBA-311 1 VIAL
[5×10E6 cells]
¥71,000
MEF Feeder Cells (Puromycin-resistant)詳細データ CBL CBA-312 1 VIAL
[5×10E6 cells]
¥71,000
MEF Feeder Cells (Hygromycin-resistant)詳細データ CBL CBA-313 1 VIAL
[5×10E6 cells]
¥71,000

関連商品:プライマーセット

【使用目的】
幹細胞や三胚葉(中胚葉、外胚葉、内胚葉)に特化した各種マーカーのプライマーセットです。RT-PCR を介したES 細胞の未分化 / 分化をモニタリングするのに効果的なプライマーセットです。


(左図)未分化D3 細胞のアルカリフォスファターゼ染色像
(右図)マウスES 細胞(ES-D3)におけるOct-4 とNANOG のRT-PCR 分析
トータルRNA を未分化ES-D3 を分離し、5μg のトータルRNA をcDNA 合成に使用。
PCR 反応はトータルボリューム50μL で30 サイクル、55℃のアニーリング温度で行った。

1% のアガロースで分離された電気泳動パターン A:GAPDH, B:β - Actin, C:Oct-4, D:NANOG

 

【構成内容】
● 7 種類のプライマー(Oct4、NANOG、AFP、Flk-2、NCAM、GAPDH、β -actin)、各50μL (50mL / μL )

  プライマー名 プライマーサイズ
(ベース)
増幅断片サイズ
(bp)
Control
[コントロール]
GAPDH-Forward 20 162
GAPDH-Reverse 20
β -Actin-Forward 20 137
β -Actin-Reverse 20
Stem Cell
[幹細胞]
OCT-4-Forward 20 174 (H), 176 (M)
OCT-4-Reverse 19
NANOG-Forward 20 175 (H), 178 (M)
NANOG-Reverse 20
Endoderm
[内胚葉]
AFP-Forward 20 136
AFP-Reverser 20
Mesoderm
[中胚葉]
flk-1-Forward 20 175
flk-1-Reverse 20
Ectoderm
[外胚葉]
NCAM-Forward 20 140
NCAM-Reverse 20

H:Human, M:Mouse

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
StemTAGTM PCR Primer Set for Stem Cell Characterization詳細データ CBL CBA-303 1 KIT
[50_assays]
販売終了

関連商品:トータルRNA、トータルタンパク質

遺伝子クローニング、ウェスタンブロット等にご利用いただけます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Total Protein-Murine Embryonic Stem Cell Line D3, Mouse詳細データ CBL CBA-305 500 UG
販売終了
CBL_bnr_05.jpg Cell Biolabs(セルバイオラボ)社商品一覧 セルベースアッセイ商品 ウイルス発現商品 幹細胞研究商品 酸化ストレス / 酸化損傷商品 代謝研究商品 Cell Biolabs(セルバイオラボ)社商品一覧
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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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