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Platinum レトロウイルス発現システム

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メーカー名：Cell Biolabs Inc.

Platinum レトロウイルス発現システムは、優れたパッケージングセルラインとベクター技術を組み合わせ、１回のプラスミドトランスフェクションで高力価のウイルスを産生するシステムです。

使用目的

Platinum レトロウイルス発現システムは、優れたパッケージングセルラインとベクター技術を組み合わせ、１回のプラスミドトランスフェクションで高力価のウイルスを産生するシステムです。それぞれの Platinum 発現システムには、あらかじめ gag および pol遺伝子を含んだ独自の Platinum パッケージングセルラインが1種類含まれています。エコトロピックな細胞およびアンホトロピックな細胞はエンヴェロープタンパク質も含んでいます。操作は簡単で、目的遺伝子をキットに含まれるベクターにクローニングし、Platinum 細胞に導入するだけです。
パントロピックシステムの場合、キットに含まれる VSV-Gプラスミドと一緒に導入する必要があります。

ES／EC細胞または造血幹細胞用に最適化したシステムもあります。
詳細は「Platinum 幹細胞用レトロウィルス発現システム」をご覧下さい。

特長

高いウイルス収量：平均力価は10⁷ units/mL（一過性遺伝子導入）
多目的：目的の宿主種にあわせて3つのパッケージングセルラインをご用意（下表）
安定：耐性薬剤存在下で4ヵ月発現

宿主によるレトロウイルスパッケージングセルラインの安定性
どのPlatinum Expression System が適しているかは、実験対象の動物種に基づいた下の表をご参考ください。

	Plat-A Cells (Amphotropic)	Plat-E Cells (Ecotropic)	Plat-GP Cells (Pantropic*)
Human	+++	N.S.	+++
Mouse	+++	+++	+++
Rat	+++	+++	+++
Monkey	+++	N.S.	+++
Cat	+++	N.S.	+++
Dog	+++	N.S.	+++
Hamster	+	N.S.	+++
Bird	N.S.	N.S.	+++
Fish	N.S.	N.S.	+++
Frog	N.S.	N.S.	+++
Insect	N.S.	N.S.	+++
Mollusk	N.S.	N.S.	+++

＊ウイルスはVSVGのようなパントロピックなエンベロープタンパク質でパッケージング
N.S. ：適合しない

構成内容

**表１．各品番の構成内容**
品番	パッケージセルライン	発現ベクター	エンベロープベクター	コントロールベクター
VPK-300	Plat-E (Ecotropic)	pMXs-Puro	－	pMX-GFP
VPK-301	Plat-A (Amphotropic)	pMXs-Puro	－	pMX-GFP
VPK-302	Plat-GP (Pantropic)	pMXs-Puro	pCMV-VSV-G	pMX-GFP
VPK-303	Plat-E (Ecotropic)	pMCs-Puro	－	pMCs-GFP
VPK-304	Plat-A (Amphotropic)	pMCs-Puro	－	pMCs-GFP
VPK-305	Plat-GP (Pantropic)	pMCs-Puro	pCMV-VSV-G	pMCs-GFP
VPK-306	Plat-E (Ecotropic)	pMYs-Puro	－	pMYs-GFP
VPK-307	Plat-A (Amphotropic)	pMYs-Puro	－	pMYs-GFP
VPK-308	Plat-GP (Pantropic)	pMYs-Puro	pCMV-VSV-G	pMYs-GFP

**表２．各パッケージセルラインのgag, pol, envの発現**
品名	品番	gag	pol	env
Plat-E Retroviral Packaging Cell Line, Ecotropic	RV-101	〇	〇	〇(ecotropic env)
Plat-A Retroviral Packaging Cell Line, Amphotropic	RV-102	〇	〇	〇(amphotropic env)
Plat-GP Retroviral Packaging Cell Line, Pantropic	RV-103	〇	〇	－

※パッケージセルラインPlat-E(#RV-101), Plat-A(#RV-102), Plat-GP(#RV-103)は培養開始後(解凍後)最初の3日間は培地を変えないでください。最初の24時間は、いくつかの細胞が浮いているのが正常です。

プロトコール

図．Platinum Retroviral Expression System を用いたレトロウイルス産生