記事ID ： 45621

哺乳類 (non-canonical) CDN, cyclic [G(2',5')pA(3',5')p] 2'3'-cGAMP | STING リガンド

カテゴリから探す > 生理活性物質 > リガンド／アゴニスト／アンタゴニスト

メーカー名：InvivoGen

STING リガンド

図1 2’3’-cGAMPによるSTING活性化

2'3'-cGAMPは、STING(インターフェロン遺伝子の刺激因子)を強力に活性化する環状ジヌクレオチド(CDN)です。これは、グアノシンとアデノシンの間に非定型の2'-5'ホスホジエステル結合が存在するため、「非標準的な」cGAMPと呼ばれます。2'3'-cGAMPによるSTING活性化は、I型インターフェロン(IFN)と炎症誘発性サイトカインを誘導します[1、2]。 STING は、自然免疫において最も重要な小胞体アダプターおよびセンサータンパク質です。

詳細はコチラ

作用機序

2'3'-cGAMP(環状[G(2',5')pA(3',5')p])は、細胞質内の二本鎖DNAに応答してcGAS(cGAMP合成酵素)によって哺乳動物細胞で産生されます。標準的な3'3'-cGAMPと同様に、2'3'-cGAMPはSTINGに結合して活性化することにより、自然免疫応答を活性化するセカンドメッセンジャーとして機能します。活性化されると、STINGはTANK結合キナーゼ1（TBK1）/インターフェロン調節因子3（IRF3）パスウェイを介してI型IFNを誘導し[1]、NF-κBパスウェイを介して炎症性サイトカインを誘導します[1、2]。構造および機能研究により、2'3'-cGAMPは細菌によって産生される標準的な3'3'-cGAMPとは異なることが明らかになりました[3, 4]。 2'3'-cGAMPは3'3'-cGAMPよりもはるかに高い親和性でSTINGに結合します[1]。興味深いことに、STINGのある種の変異体は、非標準的なcGAMPと標準的なcGAMPを区別することができます。[3]

InvivoGen社 2’3’-cGAMPの特長

強力なSTINGアゴニスト
非標準的なCDN
各ロットは高純度（≥95%）で機能テスト済み

参考文献

Zhang X. et al., 2013. Cyclic GMP-AMP containing mixed phosphdiester linkages is an endogenous high-affinity ligand for STING. Mol Cell.51(2):226-35.
Abe T. & Barber G.N., 2014. CytosolicDNA-mediated, STING-dependent proinflammatory gene induction necessitates canonical NF-κB activation through TBK1. J Virol. 88(10):5328-41.
Diner E. et al., 2013. The Innate Immune DNA Sensor cGAS Produces a Noncanonical Cyclic Dinucleotide that Activates Human STING. Cell Rep. 3(5):1355-61.
Gao P. et al., 2013. Cyclic [G(2',5')pA(3',5')p] is the metazoan second messenger produced by DNA-activated cyclic GMP-AMP synthase. Cell. 153(5):1094-107.

製品データ

図2 IRF 誘導 (Lucia ルシフェラーゼレポーター)
THP1-Dual™ 細胞を、STING リガンドで 24 時間刺激した (すべて 10 µg/ml)。インターフェロン調節因子 (IRF) 応答は、QUANTI-Luc™ 4 Lucia/Gaussia を使用して上清中の Lucia ルシフェラーゼの活性を測定することによって評価された。データは、非誘導細胞に対する倍数応答で表示されます (平均 ± SEM)。

図3 NF-κB 誘導 (SEAPレポーター)
THP1-Dual™ 細胞を、STING リガンドで 24 時間刺激した (すべて 10 µg/ml)。NF-κB誘導SEAP活性は、SEAP検出試薬であるQUANTI-Blue™ Solutionを使用して評価した。データは630 nmでの光学密度（OD）として表示されます（平均±SEM）。非誘導細胞（NI）はネガティブコントロールとして含まれている。

仕様

図4 2'3'-cGAMPの構造

Synonym：Cyclic [G(2’,5’)pA(3’,5’)p], cyclic GMP-AMP; c-GpAp sodium salt
CAS number：2734858-36-5 / 1441190-66-4 (free acid)
化学式：C₂₀H₂₂N₁₀O₁₃P₂ 2Na
分子量：718.38 g/mol
純度：95%以上（LC/MSによる）
溶解度：50 mg/ml in water
QC：細胞アッセイによる生物学的活性を確認済
HEK-Blue™ TLR4 および HEK-Blue™ TLR2 細胞を使用して、エンドトキシンやその他の細菌のコンタミネーションがないことを確認済。

2'3'-cGAMP

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
2'3'-cGAMP	ING	TLRL-NACGA23-02	200 UG	￥34,000
2'3'-cGAMP	ING	TLRL-NACGA23	500 UG	￥72,000
2'3'-cGAMP	ING	TLRL-NACGA23-1	1 MG	￥128,000
2'3'-cGAMP	ING	TLRL-NACGA23-5	5 MG	お問い合わせ

背景

STINGとは？

インターフェロン遺伝子刺激因子 STING (別名 MPYS、TMEM173、MITA、ERIS) は、細胞質の核酸の重要なセンサーです。当初、STINGは細胞質DNAセンサー（CDS）によるシグナル伝達を媒介するアダプタータンパク質としてのみ機能すると考えられていましたが、環状ジヌクレオチド（CDN）の直接的なセンサーであることが明らかとなりました[1]。

STING シグナリングについて

CDN は、細菌や後生動物のシグナル伝達において普遍的に存在するセカンドメッセンジャー分子であり、哺乳類細胞における防御のトリガーです。すなわち、環状ジグアニル酸（c-di-GMP）、環状ジアデニル酸（c-di-AMP）、環状アデニルグアニル酸（cGAMP）は、細菌や後生動物において最も一般的な細胞内シグナル伝達中間体です[2-3]。
DNAとSTINGとの間に直接的な相互作用は認められておらず、少なくとも1つの追加タンパク質の介入が示唆されています[1]。主要なdsDNA細胞質センサーの正体は2013年に解明されました。cGAs（環状GMP-AMP合成酵素）はDNAに直接結合すると活性化され、続いて非標準的なcGAMPの生成を触媒し、それが今度はSTINGを活性化します[3]。
活性化されると、STINGとTANK結合キナーゼI（TBK1）が相互作用して活性インターフェロン調節因子（IRF3）二量体を誘導し、それが核内のインターフェロン刺激応答要素（ISRE）に結合してIFN-α/βの産生につながります[4]。 STING活性化の下流ではNF-κB依存性炎症性サイトカインの産生も観察されていますが、その根底にあるメカニズムは未だ解明されていません[5]。

参考文献

Burdette DL. et al., 2011. STING is a direct innate immune sensor of cyclic di-GMP. Nature 478(7370):515-8.
Woodward JJ. et al., 2010. c-di-AMP secreted by intracellular Listeria monocytogenes activates a host type I interferon response. Science 328(5986):1703-5.
Wu J. et al., 2013. Cyclic GMP-AMP is an endogenous second messenger in innate immune signaling by cytosolic DNA. Science, 339(6121):826-30.
Ishikawa H. et al., 2009. STING regulates intracellular DNA-mediated, type I interferon-dependent innate immunity. Nature 461: 788-92.
Abe T. and Barber G.N., 2014. Cytosolic-DNA-Mediated, STING-Dependent Proinflammatory Gene Induction Necessitates Canonical NF-κB Activation through TBK1. Journal of Virology 88:5328-41.