NF-κB-SEAP および IRF-Lucia レポーター Monocyte THP1-Dual™ 細胞

THP1-Dual™細胞は、2つの誘導性レポーターコンストラクトを安定的に組み込んだヒトTHP-1単球細胞株由来の細胞です。

THP1-Dual™ 細胞では、SEAP の活性をモニタリングすることで NF-κB 経路を、分泌ルシフェラーゼである Lucia ルシフェラーゼの活性を評価することで IRF 経路を同時に研究することが可能になります。

QUANTI-Blue™ Solution（SEAP 検出試薬）と QUANTI-Luc™ 4 Lucia/Gaussia（Lucia および Gaussia ルシフェラーゼ検出試薬）を使用すると、両方のレポータータンパク質を細胞培養上清中で容易に測定することができます。
THP1-Dual™ 細胞は、Pam3CSK4 やフラジェリンなどの特定の TLR アゴニストに反応して NF-κB の活性化を誘導します。これらの細胞は、I 型 IFN および RLR または CDS アゴニスト (トランスフェクトされた dsRNA など) による刺激を受けて IRF 経路をトリガーします。
THP1-Dual™ 細胞は選択マーカーの Zeocin® および blasticidin に対して耐性があります。

THP1-Dual™細胞のPRRリガンドに対するNF-κB及びIRF応答

細胞をPMA(Phorbol 12-myristate 13-acetate：20 ng/mlで3時間)で前処理または未処理とし、1 ng/mlのPam3CSK4(TLR2)、100 ng/mlのLPS-EK UP(TLR4)、100 ng/mlのFLA-ST UP(TLR5)、10 µg/mlのR848(TLR7/8)、10 µg/mlのTri-DAP(NOD1)、3 µg/mlの2'3'-cGAMP(STING)、 1 µg/ml ポリ(I:C)/LyoVec™(RLR)または 100 ng/ml ポリ(dA:dT)/LyoVec™(CDS)でそれぞれ刺激した。24時間のインキュベーション後、NF-κBとIRF活性化を、それぞれQUANTI Blue™およびQUANTI Luc™を用いてSEAPおよびLuciaルシフェラーゼのレベルを測定することにより評価した。QUANTI Blue™では、655 nmの吸光度(OD)を読み取ってSEAPのレベルを決定した。QUANTI Luc™では、ルシアルシフェラーゼレベルを、ルミノメーターの相対光量(RLU)を測定することにより決定した。

• THP1-Dual™細胞（3〜7×10⁶cells)
• Normocin™(50mg/mL):1mL
• Zeocin®(100mg/mL):1mL
• blasticidin(10mg/mL):1mL
• QUANTI-Luc™ 4 Reagent：ルシフェラーゼ検出試薬
• QB reagent および QB buffer：1ｍL

※本商品にはQUANTI-Blue™ Solutionは含まれておりません。SEAPで検出する場合は別途ご購入が必要となります。

• 抗菌薬耐性: Zeocin®、blasticidin
• 増殖培地: RPMI 1640、2 mM L-グルタミン、25 mM HEPES、10% 加熱不活化ウシ胎児血清、100 µg/ml Normocin™、Pen-Strep (100 U/ml-100 µg/ml)
• マイコプラズマフリーを保証

※  表示価格について