図1.CHO-K1細胞における内因性P2Y受容体のATP刺激によるカルシウム応答。
プロベネシド非存在下でFura-2 AM (品番:21020)、Fura-8™ AM(品番:21055) 、Fura-10™ AM(品番:21114)を用いて測定した。
CHO-K1細胞を播種し一晩培養した後、プロベネシドを含まないFura-2 AMまたはFura-8™ AMまたはFura-10™ AMを細胞内に添加し、最終的な指示濃度になるようにATPを加えた。
レシオメトリック カルシウムインジケーターは、カルシウムの動態をより正確かつ高感度にモニターするために設計されたものです。遊離しているCa2+と結合すると、レシオメトリックインジケーターの励起曲線または発光曲線のピーク波長がシフトします。
これにより、色素の不均一なロード、色素の漏れ、細胞の厚さの違いなどを補正して、非常に正確なCa2+濃度の測定が可能となります。
レシオメトリックカルシウムインジケーターの中では、Fura-2 AM (品番:21020) とIndo-1 AM(品番:21032)が最も広く使用されていますが、どちらもシグナル/バックグラウンド比が中程度で、細胞保持力が低いという欠点があります。
Fura-8™ AM(品番:21055) はシグナル/バックグラウンド比が大幅に改善されており、またFura-10™ AM(品番:21114)はどちらのインジケーターよりも優れており、細胞内での保持時間が大幅に長くなっています。