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AAT Bioquest NEWS 2021年 8月号_6 哺乳類細胞におけるオートファジーの可視化

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メーカー名：AAT Bioquest, Inc. (Former ABD Bioquest, Inc.)

図１．多色蛍光によるオートファジーの視覚化。
HeLa細胞を、5％の血清を含む1X HBSS 緩衝液でインキュベートし、飢餓状態を誘導した。
誘導後、細胞をAutophagy Green™ working solution (品番：23002のキット構成品) で20分間処理した後、3回洗浄した。
核はHoechst 33342（青）で標識した。
リソソームは、LysoBrite™ Orange (品番：22657のキット構成品)　 (オレンジ)で標識した。

オートファジーは、細胞の生存、発生、ホメオスタシスに不可欠な、制御されたリソソーム分解経路であり、様々な病態から生体を守る適応機構としても機能しています。
オートファジーの減少や欠陥は、ハンチントン病、アルツハイマー病、パーキンソン病などの様々な病気に関係していると言われており、また、がんの発生においても、オートファジーは複数の役割を果たしていると考えられています。細胞のホメオスタシスにおけるオートファジーの役割を調べるために、細胞のストレス、微生物の感染、病気などに応じてオートファジーの機能をモニターするイメージングツールやアッセイが開発されています。

オートファジーアッセイは、特定のオートファゴソームマーカーを用いてオートファジーの活性を分析することが多いです。AAT Bioquest社のCell Meter™ Autophagy Fluorescence Imaging Kitは、独自のAutophagy Blue™, Green™, Super Blue™プローブを使用しており、高い選択性でオートファジー活性を解析することができます。

Resources & Information

図２．オートファジーの検出。
HeLa 細胞を DMEM 培地（左：コントロール）、もしくは血清枯渇培地（右）で16時間インキュベートした後、Autophagy Super Blue™ working solution (品番：23002のキット構成品) でインキュベートした。その後、洗浄バッファーで3回洗浄し蛍光顕微鏡にて観察した。細胞核は Nuclear Green™LCS1（品番：17540）で染色した。

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商品情報

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Cell Meter^TM Autophagy Assay Kit Green Fluorescence	ABD	23002	200 TEST	￥72,000
Hoechst 33342 Ultrapure Grade	ABD	17530	100 MG	￥24,000
Cell Navigator^(R) Lysosome Staining Kit Orange Fluorescence	ABD	22657	1 KIT [500 Tests]	￥36,000
Cell Meter^TM Autophagy Fluorescence Imaging Kit	ABD	23001	200 TEST	￥72,000
Nuclear Green^TM LCS1 5 mM DMSO Solution	ABD	17540	0.5 ML	￥24,000