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商品情報

記事ID : 13605
研究用

高タイターのAAV作製を遺伝子合成やベクター構築からサポートアデノ随伴ウイルス (AAV) 作製受託サービス
SignaGen社:高タイターのAAV作製を遺伝子合成やベクター構築からサポート

SignaGen社:高タイターのAAV作製を遺伝子合成やベクター構築からサポート" data-hatena-bookmark-layout="standard-balloon" data-hatena-bookmark-lang="ja" title="このエントリーをはてなブックマークに追加">このエントリーをはてなブックマークに追加

SignaGen社AAV作製サービスでは、Cis-plasmidの構築から独自技術による高タイターのAAVパッケージングまで、AAVを使用した研究を幅広くサポートします。

参考情報

特長

  • 独自技術により高タイターでAAVを作製(>1013 VG/mL)
  • 多様なプロモーター・レポーターを選択可能(図.1)
  • dsAAVベクターも使用可能
  • 多様なセロタイプで作製可能
    (AAV1〜9, AAV-PHP.B, AAV-PHP.eB, AAV-DJ/8, AAV-DJ)

※上記以外のセロタイプも対応可能です。詳細はページ下部の創薬・受託サービス部までお問い合わせください。

サービス一覧

AAV作製サービス

Cis-plasmidの構築からAAVのパッケージングまでを行います。

作業内容

  • Cis-plasmidの構築と調整
  • AAVへのパッケージングと2×CsCl超遠心によるAAVの精製
  • qPCRによるAAVのタイトレーション

Cis-plasmidのITR間の配列は、以下の中からご希望のプロモーター、レポーター、セレクションマーカーをお選び頂けます。

SGL_AAV-service_8.jpg
Promoter 1 Promoter 2 Reporter
None ApoE/AAT1 None None
CMV CaMKII CMV eGFP
CAG ELA1 CAG RFP
H1 Enh358MCK H1 mRFP
U6 cTNT U6 mCherry
Synapsin GFAP Synapsin tdTOMATO
UBC MBP UBC TurboGFP
EF1a SST EF1a eYFP
CBh TBG CaMKII Venus
TRE-miniCMV aMHC cTNT Luc
CMVtight hRPE GFAP LacZ
ALB(1.4) mlP1 TRE-miniCMV  
MHCK7 tMCK CMVtight  
    MHCK7  

図.1 Cis-plasmidの構造
ITR間は最大4.5kbまで導入でき、WPRE配列の導入も可能です。上記以外の配列も対応可能ですので、ご希望の場合はページ下部の創薬・受託サービス部までお問い合わせください。

AAVの作製容量に応じて以下の3種類のスケールで対応しております。

Scale 濃度(※1) 容量(※2) 納期 グレード
Large >1×1013 VG/mL 1 mL (10 × 100 µL) 4〜5週間
(※3)
in vivo
Medium >1×1013 VG/mL 200 µL (4 × 50 µL)
Pilot >1×1013 VG/mL 100 µL (2 × 50 µL)

※1:最終的なウイルス産生量は導入遺伝子の性質に依存します。

※2:上記以上のスケールも対応可能です。

※3:目的遺伝子の合成をSignaGen社にご依頼頂く場合、納期は都度見積もりとなります。

AAVパッケージングサービス

お送り頂いたCis-plasmidを使用してAAVのパッケージングを行います。

作業内容

  • お送り頂いたCis-plasmidのAAVへのパッケージングと2×CsCl超遠心によるAAVの精製
  • qPCRによるAAVのタイトレーション

AAVの作製容量に応じて以下の3種類のスケールで対応しております。

Scale 濃度(※1) 容量(※2) プラスミド
必要量
納期 グレード
Large >1×1013 VG/mL 1 mL (10 × 100 µL) 300 µg 3〜4週間 in vivo
Medium >1×1013 VG/mL 200 µL (4 × 50 µL) 200 µg
Pilot >1×1013 VG/mL 100 µL (2 × 50 µL) 100 µg

※1:最終的なウイルス産生量は導入遺伝子の性質に依存します。

※2:上記以上のスケールも対応可能です。

データ例

SGL_AAV-service_9.jpg

図.2 SignaGen社と競合メーカーのAAVベクターの純度とAAVの感染性に関する比較データ
A: AAV ベクター (total 1 x 109 VG/lane) を SDS-PAGE にかけ、銀染色を行った。
Lane 1: GMP基準のAAVベクター、Lane 2: SignaGen 社で調製された AAVベクター、Lane 3〜5: SignaGen社以外のAAVベクター、Lane 6:分子量マーカー

B: AAV9-GFPをマウス眼球へ感染させた。
 左図:競合メーカーのAAV9-GFP (total 5 x 109 VG)
 右図:SignaGen 社のAAV9-GFP (total 5 x 109 VG)

AAV感染効率の検証データ
図.3 マウス筋組織におけるAAV感染効率の検証データ
A: 競合メーカーの AAV1-GFP(2×109 VG)
B: SignaGen社のAAV1-GFP(2×109 VG)
C: A, Bの蛍光強度の比較データ

構築済みAAV・Serotype検証用キット

SignaGen社では、コントロール用に少量の構築済みAAVを安価にて提供しております。
構築済みAAVの一覧は以下のリンクをご参照ください。

また、目的に適したSerortypeの事前検証用に、各種SerotypeのAAVを揃えた検証用キットもご提供しております。
詳細はページ下部の創薬・受託サービス部までお問い合わせください。

お見積り・ご注文方法

下記のリンクから見積のご依頼をお願い致します。

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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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