記事ID ： 13605

高タイターのAAV作製を遺伝子合成やベクター構築からサポートアデノ随伴ウイルス (AAV) 作製受託サービス
SignaGen社：高タイターのAAV作製を遺伝子合成やベクター構築からサポート

SignaGen社：高タイターのAAV作製を遺伝子合成やベクター構築からサポート" data-hatena-bookmark-layout="standard-balloon" data-hatena-bookmark-lang="ja" title="このエントリーをはてなブックマークに追加">

メーカー名：SignaGen Laboratories

SignaGen社AAV作製サービスでは、Cis-plasmidの構築から独自技術による高タイターのAAVパッケージングまで、AAVを使用した研究を幅広くサポートします。

関連商品

Serotype検証用キット
構築済みAAV

特長

独自技術により高タイターでAAVを作製（>10¹³ VG/mL）
多様なプロモーター・レポーターを選択可能（図.1）
dsAAVベクターも使用可能
多様なセロタイプで作製可能
（AAV1～9, AAV-PHP.B, AAV-PHP.eB, AAV-DJ/8, AAV-DJ）

※上記以外のセロタイプも対応可能です。詳細はページ下部の創薬・受託サービス部までお問い合わせください。

サービス一覧

AAV作製サービス
：構築済みCis-plasmidをお持ちでない場合
AAVパッケージングサービス
：構築済みCis-plasmidをお持ちの場合
オプションサービス
：幅広いAVVバリデーションのオプションに対応

AAV作製サービス

Cis-plasmidの構築からAAVのパッケージングまでを行います。

作業内容

Cis-plasmidの構築と調整
AAVへのパッケージングと2×CsCl超遠心によるAAVの精製
qPCRによるAAVのタイトレーション

Cis-plasmidのITR間の配列は、以下の中からご希望のプロモーター、レポーター、セレクションマーカーをお選び頂けます。

Promoter 1		Promoter 2	Reporter
None	ApoE/AAT1	None	None
CMV	CaMKII	CMV	eGFP
CAG	ELA1	CAG	RFP
H1	Enh358MCK	H1	mRFP
U6	cTNT	U6	mCherry
Synapsin	GFAP	Synapsin	tdTOMATO
UBC	MBP	UBC	TurboGFP
EF1a	SST	EF1a	eYFP
CBh	TBG	CaMKII	Venus
TRE-miniCMV	aMHC	cTNT	Luc
CMVtight	hRPE	GFAP	LacZ
ALB(1.4)	mlP1	TRE-miniCMV
MHCK7	tMCK	CMVtight
		MHCK7

図.1 Cis-plasmidの構造
ITR間は最大4.5kbまで導入でき、WPRE配列の導入も可能です。上記以外の配列も対応可能ですので、ご希望の場合はページ下部の創薬・受託サービス部までお問い合わせください。

AAVの作製容量に応じて以下の3種類のスケールで対応しております。

Scale	濃度(※1)	容量(※2)	納期	グレード
Large	>1×10¹³ VG/mL	1 mL (10 × 100 µL)	4～5週間 (※3)	in vivo
Medium	>1×10¹³ VG/mL	200 µL (4 × 50 µL)
Pilot	>1×10¹³ VG/mL	100 µL (2 × 50 µL)

※1：最終的なウイルス産生量は導入遺伝子の性質に依存します。

※2：上記以上のスケールも対応可能です。

※3：目的遺伝子の合成をSignaGen社にご依頼頂く場合、納期は都度見積もりとなります。

AAVパッケージングサービス

お送り頂いたCis-plasmidを使用してAAVのパッケージングを行います。

作業内容

お送り頂いたCis-plasmidのAAVへのパッケージングと2×CsCl超遠心によるAAVの精製
qPCRによるAAVのタイトレーション

AAVの作製容量に応じて以下の3種類のスケールで対応しております。

Scale	濃度(※1)	容量(※2)	プラスミド必要量	納期	グレード
Large	>1×10¹³ VG/mL	1 mL (10 × 100 µL)	300 µg	3～4週間	in vivo
Medium	>1×10¹³ VG/mL	200 µL (4 × 50 µL)	200 µg
Pilot	>1×10¹³ VG/mL	100 µL (2 × 50 µL)	100 µg

※1：最終的なウイルス産生量は導入遺伝子の性質に依存します。

※2：上記以上のスケールも対応可能です。

データ例

図.2 SignaGen社と競合メーカーのAAVベクターの純度とAAVの感染性に関する比較データ
A: AAV ベクター (total 1 x 10⁹ VG/lane) を SDS-PAGE にかけ、銀染色を行った。
Lane 1: GMP基準のAAVベクター、Lane 2: SignaGen 社で調製された AAVベクター、Lane 3～5: SignaGen社以外のAAVベクター、Lane 6：分子量マーカー

B: AAV9-GFPをマウス眼球へ感染させた。
　左図：競合メーカーのAAV9-GFP (total 5 x 10⁹ VG)
　右図：SignaGen 社のAAV9-GFP (total 5 x 10⁹ VG)

図.3 マウス筋組織におけるAAV感染効率の検証データ
A: 競合メーカーの AAV1-GFP（2×10⁹ VG）
B: SignaGen社のAAV1-GFP（2×10⁹ VG）
C: A, Bの蛍光強度の比較データ