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従来の架橋剤が抱えていた様々な課題を解決します！ AnteoBind™ NXT ｜担体-生体分子間の分子接着剤

メーカー名：Anteo Life Sciences Pty Ltd.

AnteoBind™ NXTは、共有結合を原理とする既存の架橋剤とは異なり、Ready-to-use(調製済み溶液タイプ)の金属錯体ベース分子接着剤です。各種粒子や金ナノロッド／ナノシェルなどの担体と、多様な生体分子（抗原、抗体、ウイルス粒子など）との間で配位結合を形成し、両者を強固に結合させます。作製した担体-生体分子複合体は、各種バイオアッセイにご利用いただけます。

担体-生体分子複合体の最終応用例：
ラテラルフローアッセイ、CLIA、磁気分離、免疫比濁法など
※CEマーク取得済ラテラルフロー、FDA承認済ラテラルフローに採用された実績有

Anteobind™　プラットフォーム

特長

	【従来の共有結合法(EDC/NHS、マレイミド、トシル等)やその他固定化方法にお悩みの方】	【AnteoBind™ならこう変わる！】
性能	配向性の制御困難・非特異的反応原理上固定化できない生体分子がある	→配向性改善！感度向上と生体分子量削減を両立し、コスト削減に貢献！ →既存法では扱えなかった生体分子の成功事例多数！マルチでの固定化も可能！
仕様	保存安定性が悪い(-80℃防湿保存、数ヶ月)、使用直前に調製担体活性～生体分子固定までを一気に処理する必要がある余剰分は基本廃棄	→長期安定、調製済の溶液タイプ、室温※で2年保存可！ →担体活性化後1年以上保存可！ →廃棄物削減(必要量だけご使用可)！
取扱	製造工程の管理困難ワークフローの労力と時間を削減したい	→工程管理を数値化可能・ロット間の再現性改善！ISO9001取得済！ →シンプルなワークフロー、処理時間削減！

　※AnteoBinid™そのものは室温保存可能ですが、
キットに含まれるバッファーは冷蔵保存となります。

生体分子例

抗体 (マウス/ヒトIgG, IgM)
ウィルス粒子 (HAV)
ウィルス様粒子 (フラビウィルス)
抗原 (COVID-19スパイクタンパク質)
結合タンパク質 (ストレプトアビジン, プロテインG/A)
血清蛋白質 (BSA)
核酸 (single-strain DNA, poly-Ts)
多糖類（ポリシアル酸）
合成ポリマー(ポリアクリル酸)
粒子間固定(量子ドット-ナノ粒子)

※従来の架橋剤では固定化が難しかった生体分子の実績多数
※上記は実績の一例ですが、ご利用いただける担体と生体分子に相性がある場合がございます。ご自身で反応条件などを最適化していただき、お試しください。

担体例

粒子	官能基	サイズ (直径)	素材	磁性・その他
Ademtech Carboxyl-Adembeads	-COOH	200 nm, 300 nm, 500 nm	ポリスチレン	磁性
Asahi Kasei NanoAct™	-COOH	300nm	セルロース	非・磁性
Agilent LodeStars™ Carboxyl	-COOH	2.7 µm	ポリスチレン	磁性
Bangs ProMag™ (PMC1N)	-COOH	1 µm	ポリスチレン	磁性
Bangs ProMag™ (PMC3N)	-COOH	2.8 µm	ポリスチレン	磁性
Bangs Silica Microspheres	-silica/OH	1, 5 µm	シリカ	非・磁性
BBI Gold Colloids	-Au	40nm	金	非・磁性
JSR Micro Magnosphere (MX100/Carboxyl)	-COOH	1.1 µm	疎水性ポリマー	磁性
JSR Micro Magnosphere (MS160/Carboxyl)	-COOH	1.5 µm	親水性ポリマー	磁性
JSR Micro Magnosphere (MS300/Carboxyl)	-COOH	3 µm	ポリスチレン	磁性
Luminex® Microspheres - MagPlex or MicroPlex	-COOH	5.6 µm	ポリスチレン	蛍光
Merck Millipore Estapor® (EM1-100/40)	-COOH	1 µm	ポリスチレン	磁性
Merck Millipore Estapor® (M1-200/20)	-COOH	2 µm	ポリスチレン	磁性
Merck Millipore Estapor® (M1-020/50)	-COOH	200 nm	ポリスチレン	磁性
Merck Millipore Estapor® Europium Carboxyl	-COOH	300 nm	ポリスチレン	蛍光
Microparticles Polystyrene (PS-MAG-COOH-S1978)	-COOH	350 nm	ポリスチレン	磁性
nanoComposix Bioready Gold Nanoshells	-COOH	150nm	金	非・磁性
Revvity Chemagen M-PVA (C21)	-COOH	1 µm	ポリビニルアルコール	磁性
Thermo Fisher Colored Latex (DR/DB1040CA)	-COOH	400 nm	ポリスチレン	非・磁性
Thermo Fisher Dynabeads™ MyOne/Carboxyl	-COOH	1 µm	ポリスチレン	磁性
Thermo Fisher Dynabeads™ M-270/carboxyl	-COOH	2.6 µm	ポリスチレン	磁性
Thermo Fisher Fluoro-Max™ Europium particles	-COOH	100 nm, 200 nm, 300 nm	ポリスチレン	蛍光

※カルボキシル基修飾必須
※ガラス、バイオセンサーチップ、シリコンオレフィンコポリマー(COC)、ポリスチレン製96/384wellプレートにも応用実績があります。

原理

AnteoBind™は「担体表面の活性化」と「生体分子の固定化」の2ステップから構成されます。「担体表面の活性化」では、担体表面の官能基（カルボキシル基など）に対して、多価金属錯体であるAnteoBind™が複数の配位結合を形成します。続く「生体分子の固定化」では、生体分子側の配位性官能基(ヒスチジン残基のイミダゾール環など)がAnteoBind™と配位結合を形成することで、担体と生体分子の複合体が構築されます(Hisタグタンパク質の精製原理と同様)。
　抗体を担体に固定化する際、代表的な架橋法：EDC/NHS法（共有結合）では抗体の各所に存在するリジン残基を標的とします。その結果、抗体が適切に機能する向き（配向性）がランダムになり、十分なシグナルを得るために大量の抗体を固定化する必要が生じる上、抗原結合部位が失活しやすい点が課題でした。一方AnteoBind™は、抗体のFc部位に多く含まれるヒスチジン残基などを主なターゲットとします。これにより、抗原結合部位の機能を保持した配向制御が可能となり、使用する抗体量を削減しながらも検出感度を大幅に向上させることができます。さらに従来の架橋剤に比べて取り扱いが容易な点も大きな特長です。

図1: AnteoBind™の固定化原理イメージ

図2: AnteoBind™で活性化させた金ナノ粒子表面のTEM画像
金ナノ粒子表面には約2nmのAnteoBind™が被覆され、次のステップである生体分子固定化の足掛かりとなります。

図3：AnteoBind™のプロトコール

構成内容

【キット構成品】

構成品	品番	サイズ	備考
AnteoBind™ NXT	A-LNPNXT	1 x 5 mL	バルク容量（50mL～1L）での提供も可能
Particle Wash Solution	A-CMPWSF1	1 x 15 mL	蒸留水での代用が可能
Conjugation Buffer	A-CMPCBF1	3 x 15 mL	25 mM MES pH 6.0 + 0.05% ProClin™ 300
Blocker Diluent	A-CMPBDF1	1 x 15 mL	Conjugation Bufferでの代用が可能
Storage Buffer	A-CMPSBF1	2 x 15 mL	50 mM TBS pH 8.0 + 0.05% アジ化ナトリウム

※AnteoBind™ NXTだけの単品販売もございます。【関連商品】をご参照ください。

【キットに含まれないもの】

カルボキシル基修飾粒子(直径≥ 150 nm or ≥ 1 µm )、その他固定化したい担体
低吸着ポリプロピレンチューブ(推奨)
低吸着マイクロピペットチップ(推奨)
Conjugation Bufferで調製済みの生体分子
BlockerDiluentで調製済みのブロッキング剤

※AnteoBind™ NXTだけをご購入された方は、Particle Wash Solution, Conjugation Buffer, Blocker Diluent, Storage Bufferをご自身で別途調製いただき、ご用意ください。

【必要な機器】※担体により使用機器が異なりますので、詳細はデータシートをご参照ください。

超音波発生装置
遠心分離機
磁気チューブブラック
マイクロピペット
チューブローテーター、ローラー、またはミキサー
ボルテックスミキサー
マイクロ遠心機

商品データ

ラテラルフローアッセイ

図4

表1
コンジュゲート	シグナル/ブランク(S/B)比
コンジュゲート	高	中	低
NXT-10µg Ab	28.8	18.3	3.8
EDC-100µg Ab	12.5	3.7	1.4

図4・表1：インフルエンザA抗原検出用ラテラルフローアッセイにおける抗体固定化法(AnteoBind™ NXT、EDC/NHS)ならびに固定化量比較
ラテラルフローアッセイの結果をS/B比として比較した結果、2倍以上の感度を得ながらも、抗体量を90%削減できた。

ユーロピウム粒子のマルチプレックスアッセイ

図5:
ユーロピウム粒子は高感度な蛍光ラテラルフローシステムの核であり、専用のリーダーが必要です。また各マーカー毎に個別の粒子が必要となり、マルチプレックス解析の実現に課題を抱えていました。AnteoBind™ NXTは、単一のステップで複数の生体分子を同一の粒子へ共結合することが可能となり、非特異的結合や抗体消費量を抑えつつ、マルチプレックスアッセイを実現します。
　3 種類の敗血症バイオマーカー（IL-6、PCT、CRP）を最適化比率でユーロピウム粒子に固定化したところ、単独のマーカー複合体と同等の性能を示しました。ヒト血清を用いた添加試験では、IL-6 および PCT は臨床測定範囲で検出され、CRP は従来の測定範囲と高感度測定範囲の両方にわたり検出されました。

図6:
左上：PCT滴定(50%ヒト血清)、右上：IL-6滴定(50%ヒト血清)
左下：CRP滴定(50%ヤギ血清)、右下：CRP滴定、低濃度(20%ヤギ血清)

**表2. 固定化法の違いによる各種生体分子のCLIA（化学発光免疫測定法）性能比較**
抗体	TNF-α		IL-6		IFN-γ		GM-CSF
結合方法	NXT	EDC	NXT	EDC	NXT	EDC	NXT	EDC
最適抗体結合量(ug/mg粒子)	5	10	1.25	10	2.5	10	10	20
CLIA シグナル：ブランク比
抗原濃度：高	148.9	158.1	447.1	401.5	101.0	202.2	304.2	212.0
抗原濃度：中	37.0	37.1	79.7	101.7	25.1	40.9	72.6	57.2
抗原濃度：低	9.4	11.1	16.6	26.7	7.2	10.1	18.2	14.1
ネガティブコントロール	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0

NXT：AnteoBind™ NXT、EDC：EDC/sNHS法
各生体分子共に、固定化する生体分子量を50%以上削減しても同等のアッセイ性能を維持することが可能であった。

AnteoBind™ NXT evaluation kit

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格	在庫
AnteoBind^TM NXT evaluation kit	ATT	A-LNXTK-5	5 ML [5 reactions]	￥66,000	なし

【関連商品】

※AnteoBind™ NXTだけの単品販売もございます。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格	在庫
AnteoBind^TM NXT	ATT	A-LNPNXTR-50	50 ML [50 reactions]	お問い合わせ	なし
AnteoBind^TM NXT	ATT	A-LNPNXTR-100	100 ML [100 reactions]	お問い合わせ	なし
AnteoBind^TM NXT	ATT	A-LNPNXTR-250	250 ML [250 reactions]	お問い合わせ	なし

製品使用文献

Hopkins, L. N. et al. Accuracy and precision of a point of care SARS-CoV-2 antigen rapid diagnostic test assessed in an Australian cohort. Australian Journal of Medical Science, 2023, 44(2), 71-78.
S. Masoumeh Ghorbanpour, et al. Quantitative Point of Care Tests for Timely Diagnosis of Early-Onset Preeclampsia with High Sensitivity and Specificity. Angew. Chem. Int. Ed. 2023, 62, e202301193.
L. Zhang, et al. A COVID-19 rapid antigen test employing upconversion nanoparticles. Smart Mol. 2025, 3, e20240042
Wu Z, et al. Beads-on-a-Tip testing for ultrasensitive antigen detection across a large dynamic range. Smart Mol. 2026 Jan 5;4(1):e70036. doi: 10.1002/smo2.70036. PMID: 42038435; PMCID: PMC13104115.