Buccutite™ Rapid APC 抗体標識キット

Buccutite™ Rapid APC 抗体標識キットは、APCを一次抗体に共有結合で標識するための迅速で便利なキットです。プロセスを合理化するために、これらのキットで提供される APC は Buccutite™ FOL で事前に活性化させているので、抗体結合に直接使用できます。目的の抗体またはタンパク質を Buccutite™ MTA で標識したら、Buccutite™ FOL活性化APCと混合するだけです。ロット間のばらつきが最小限で、分離ステップがなく、回収率100 %で、完了するまでに2時間以内とロバストなキットです。Buccutite™ Rapid APC 抗体標識キットは、標識したい抗体量別にご用意しています。

【関連商品】

• Buccutite™ 抗体標識キット

• 25 µg 〜 100 µg の抗体にAPC を共有結合的に標識するための効率的な方法
• 標識結合体は、pH5.0 〜 9.0 の範囲で使用可能
• 優れたロット間の再現性
• カラム精製ステップは不要
• 回収率 100 %
• 長期保存 (4℃、12ヶ月) に対して安定した標識結合体
• ソーティング、マルチカラーフローサイトメトリー、イムノフェノタイピングに使用可能

• Buccutite™ FOL-Activated APC
• Buccutite™ MTA
• Buccutite™ 反応バッファー
• プロトコール

アロフィコシアニン (APC) は、藍藻であるスピルリナ属から分離された 105 kDa のフィコビリタンパク質です。625 nm および 651 nmで励起し、662 nm で最大蛍光を示します。APCは、赤色のレーザーラインで励起し、APCフィルターセット (660/20 nm) を使用して検出できます。APC のモル吸光係数と量子収率により、フローサイトメトリーやセルソーティングアプリケーションに利用できる最も明るい標識物質の一つとなっています。APCはiFluor™ 647 や AlexaFluor® 647 などの色素と同等のスペクトルプロファイルを共有しているため、同時に使用しないことをお勧めします。
赤色レーザーほどではありませんが、APCは 561 nmレーザーでも励起が可能です。ただし、APCとPE-Cy5結合体で同時に染色された細胞では、561 nmレーザーによる励起により、PE-Cy5チャネルにかなりの波及効果が生じ、PE-Cy5シグナルから APC蛍光を差し引くために、かなりのクロスビーム補正を実行する必要があります。

APCスペクトル

図1. APCの励起 (赤色の点線) と吸収プロファイル (赤色の影付きの領域)
APCは、フローサイトメーターに装備された赤色レーザー (633-640 nm) で励起し、660/20 nmフィルターセットで検出できます。

PBMC染色

図2. CD4 PBMC集団のフローサイトメトリー分析
抗ヒトCD4モノクローナル抗体を Buccutite™ Rapid APC抗体標識キット (品番1313) または他社Aのキットで標識した後、CD4 PBMC集団を各抗体で染色し、APCチャネルを使用した ACEANovoCyteフローサイトメーターで蛍光シグナルをモニターした。

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