商品情報

記事ID : 41456
研究用

Buccutite™ Rapid PE 抗体標識キット

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Buccutite™ Rapid PE 抗体標識キットは、フィコエリスリン (PE) を一次抗体に共有結合で標識するための迅速で便利なキットです。プロセスを合理化するために、これらのキットで提供される PE は Buccutite™ FOL で事前に活性化させているので、抗体結合に直接使用できます。目的の抗体またはタンパク質を Buccutite™ MTA で標識したら、Buccutite™ FOL活性化PEと混合するだけです。ロット間のばらつきが最小限で、分離ステップがなく、回収率100 %で、完了するまでに2時間以内とロバストなキットです。Buccutite™ Rapid PE 抗体標識キットは、標識したい抗体量別にご用意しています。

【関連商品】

特長

  • 25 µg 〜 1 µg の抗体に PE を共有結合的に標識するための効率的な方法
  • 標識結合体は、pH5.0 〜 9.0 の範囲で使用可能
  • 優れたロット間の再現性
  • カラム精製ステップは不要
  • 回収率 100 %
  • 長期保存 (4℃、12ヶ月) に対して安定した標識結合体
  • ソーティング、マルチカラーフローサイトメトリー、イムノフェノタイピングに使用可能

構成内容

  • Buccutite™ FOL-Activated PE
  • Buccutite™ MTA
  • Buccutite™ 反応バッファー
  • プロトコール

Phycoerythrin (フィコエリスリン)

フィコエリスリンは、紅藻から分離された 240 kDaのフィコビリタンパク質です。496 nm、545 nm および 565 nmで励起し、574 nm で最大蛍光を示します。PEは、青、緑、または黄色のレーザーラインで励起し、PEフィルターセット (575/30 nm または 585/40 nmなど) を使用して検出できます。PEのモル吸光係数と量子収率により、フローサイトメトリーやセルソーティングアプリケーションに利用できる最も明るい標識物質の一つとなっています。急速な光退色特性があるため、蛍光顕微鏡観察には適していません。

表1. PEのスペクトル特性
明るさ Very Bright
分子量 240,000 daltons
Ex (最大) 496 nm, 545 nm and 565 nm
Em (最大) 574 nm
吸光係数 1,960,000 cm-1M-1
量子収率 0.84
ストークシフト (496 nm / 545 nm / 565 nm) 78 nm / 29 nm / 9 nm
レーザーライン 488 nm, 532 nm, 561-568 nm
フィルターセット 585/40 nm

PEスペクトル

PEの励起 (黄色の点線) と吸収プロファイル (黄色の影付きの領域)
図1. PEの励起 (黄色の点線) と吸収プロファイル (黄色の影付きの領域)
PEは、フローサイトメーターに装備された青、緑、黄色レーザー (488 nm、532 nm、561-568 nm) で励起し、585/40 nmフィルターセットで検出できます。

実験データ

PBMC染色

ABD_1312_02.png

 

図2. CD4 PBMC集団のフローサイトメトリー分析
抗ヒトCD4モノクローナル抗体を Buccutite™ Rapid PE抗体標識キット (品番1310) または他社Aのキットで標識した後、CD4 PBMC集団を各抗体で染色し、PEチャネルを使用した ACEANovoCyteフローサイトメーターで蛍光シグナルをモニターした。

 
標識キット 結合体 クローン stain index
Buccutite™ Kit PE-CD4 SK3 55
Vendor A Kit PE-CD4 SK3 28

Buccutite™ Rapid PE 抗体標識キット

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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