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研究用

細胞内カルシウムの測定にBiotium社 カルシウムインジケーター(指示薬)

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細胞内メッセンジャーであるCa2+の役割を研究するためには、その濃度を定量的にモニターすることが不可欠です。最も広く用いられているCa2+検出法は、カルシウムインジケーター(指示薬)を用いる方法で、以下のようなインジケーターがあります。

各カルシウムインジケーターの性質
Indicator MW*1 Ratiometric Excitation*2 Emission Kd*3 Membrane-Impermeant Salts Membrane-Permeant AM Esters
Fluo-3 770 No 506 nm 525 nm 390 nM Fura-2, Pentaammonium
Fluo-3, Pentapotassium
Fluo-3, Pentasodium
Fluo-3, AM Ester
Fluo-3, AM Ester, 1 mM in DMSO
Fluo-4 737 No 494 nm 506 nm 335 nM Fluo-4, Pentapotassium Fluo-4, AM Ester
Fura-2 642 Yes 363/335 nm 512/505 nm 145 nM Fura-2, Pentaammonium
Fura-2, Pentapotassium
Fura-2, Pentasodium
Fura-2, AM Ester
Fura-2, AM Ester, 1 mM in DMSO
Indo-1 650 Yes 349/331 nm 482/398 nm 230 nM Indo-1, Pentaammonium
Indo-1, Pentapotassium
Indo-1, Pentasodium
Indo-1, AM Ester
Furaptra
(Mag-Fura-2)
435 Yes 369/330 nm 511 nm 1.9 mM (Mg2+)
25 μM (Ca2+)
Furaptra, Tetrapotassium
Furaptra, Tetrasodium
Furaptra, AM Ester
Rhod-2 755 No 556 nm 576 nm 1 μM Rhod-2, Triammonium
Rhod-2, Tripotassium
Rhod-2, Trisodium
Rhod-2, AM Ester
Rhod-590 912 No 595 nm 616 nm 610 nM Rhod-590, Tripotassium  

*1 Free acid form
*2 非レシオメトリックインジケーターの場合はCa2+結合時のEx/Em、レシオメトリックインジケーターの場合はCa2+なし/高Ca2+の波長
*3 22℃ pH7.2のバッファーで測定したCa2+解離定数

Fluo-3

Fluo-3は、Ca2+が結合すると506 nmを吸収し、526 nmの蛍光を出します。一般的に使用されている488 nmのレーザーで最適に励起することができるため、もっとも広く使用されている蛍光インジケーターの1つです。Fluo-3は非レシオメトリックな単一波長の蛍光インジケーターで、Ca2+が存在しないときには蛍光を出しませんが、Ca2+の結合で少なくても40回蛍光が増加します。Fluo-3はFura-2やIndo-1に比べてCa2+への結合が弱く(Kd値が高い)ので、Ca2+スパイク中の高濃度の一過性のCa2+濃度を測定に適しています。

Fluo-3, pentapotassium

図1:Fluo-3, pentapotassium

Fluo-3, AM Ester

図2:Fluo-3, AM Ester

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Fluo-3, pentaammonium salt詳細データ BTI 50010 1 MG
¥40,000
Fluo-3, pentapotassium salt詳細データ BTI 50011 1 MG
¥40,000
Fluo-3, pentasodium salt詳細データ BTI 50012 1 MG
¥40,000
Fluo-3, AM ester詳細データ BTI 50014 1 MG
¥44,000
Fluo-3, AM ester詳細データ BTI 50013 10*100 UG
¥51,000
Fluo-3, AM ester (special packaging)詳細データ BTI 50016 20*50 UG
¥62,000
Fluo-3, AM ester, 1mM in anhydrous DMSO詳細データ BTI 50015 1 ML
¥51,000
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Fluo-4

Fluo-4は2つの塩素置換基がフッ素で置き換えられたFluo-3のアナログで、488 nmでの蛍光励起が増大し、強い蛍光を出します。

Fluo-4, pentapotassium salt

図3:Fluo-4, pentapotassium salt

Fluo-4 AM Ester

図4:Fluo-4 AM Ester

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Fluo-4, Pentapotassium Salt詳細データ BTI 50019 0.5 MG
¥42,000
Fluo-4, AM ester, 50UG詳細データ BTI 50018 10*50 UG
¥55,000
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Fura-2

Fura-2は、広く使用されているUV励起の蛍光カルシウムインジケーターですが。Ca2+が結合すると、最大励起波長が363 nm(Ca2+ free)から青色の335 nm(Ca2+ saturated)にシフトします。一方、最大蛍光波長は、〜510 nmであまり変化しません。通常、340 nmと380 nmで励起し、蛍光強度の比率をCa2+濃度の算出に使用します。Fura-2は、様々な細胞やアプリケーションに使用されており、特に顕微鏡でのイメージングによく用いられています。

Fura-2, Pentapotassium Salt

図5:Fura-2, Pentapotassium Salt

Fura-2, AM Ester

図6:Fura-2, AM Ester

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Fura-2, pentaammonium salt詳細データ BTI 50030 1 MG
¥32,000
Fura-2, pentapotassium salt詳細データ BTI 50031 1 MG
¥32,000
Fura-2, pentasodium salt詳細データ BTI 50032 1 MG
¥32,000
Fura-2, AM ester 詳細データ BTI 50034 1 MG
¥35,000
Fura-2, AM ester詳細データ BTI 50033 10*100 UG
¥43,000
Fura-2, AM ester (special packaging)詳細データ BTI 50033-1 20*50 UG
¥46,000
Fura-2, AM ester, 1mM in anhydrous DMSO詳細データ BTI 50029 1 ML
¥42,000
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Indo-1

Indo-1はUV励起の蛍光カルシウムインジケーターで、アルゴンレーザーの351-365 nmのスペクトル線で最適に励起されます。インジケーターの最大蛍光波長は、〜475 nm(Ca2+ free培地)から〜400 nm(Ca2+ saturated)にシフトします。Ca2+濃度は、2波長の蛍光強度の比率で決定されます。Fura-2と同様にレシオメトリックな測定技術なので、色素分布の不均一や退色の問題を回避することができます。Indo-1はフローサイトメトリーで広く使用されています。

Indo-1, Pentapotassium Salt

図7:Indo-1, Pentapotassium Salt

Indo-1, AM Ester

図8:Indo-1, AM Ester

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Indo-1, pentaammonium salt詳細データ BTI 50040 1 MG
¥30,000
Indo-1, pentapotassium salt詳細データ BTI 50041 1 MG
¥30,000
Indo-1, pentasodium salt詳細データ BTI 50042 1 MG
¥30,000
Indo-1, AM ester詳細データ BTI 50044 1 MG
¥35,000
Indo-1, AM ester (special packaging)詳細データ BTI 50043 10*100 UG
¥43,000
Indo-1, AM ester (special packaging)詳細データ BTI 50043-1 20*50 UG
¥46,000
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Furaptra(Mag-Fura-2)

Furaptra(別名:mag-fura-2)は1.9 mMのKd値を持つマグネシウムインジケーターとして開発されました。しかし、1μMから100 μMの高Ca2+濃度での優れたカルシウムインジケーターでもあります。Fura-2とfuraptraは同じ発色団であり、Ca2+濃度の変化に応じて同様のスペクトラル変化をします。

Furaptra(Mag-Fura-2), Tetrapotassium Salt

図9:Furaptra(Mag-Fura-2), Tetrapotassium Salt

Furaptra(Mag-Fura-2), AM Ester

図10:Furaptra(Mag-Fura-2), AM Ester

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Furaptra, tetrapotassium salt詳細データ BTI 50035 1 MG
¥40,000
Mag-Fura-2, tetrasodium salt詳細データ BTI 50036 1 MG
¥40,000
Furaptra, AM ester詳細データ BTI 50038 1 MG
¥52,000
Furaptra, AM ester 詳細データ BTI 50039 20*50 UG
¥62,000
Furaptra, AM ester 詳細データ BTI 50037 10*100 UG
¥56,000
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Rhod-2

Rhod-2はローダミンと同じような発蛍光団を持つ蛍光カルシムインジケーターです。Rhod-2は、Fluo-3と同じく、Ca2+濃度の変化による蛍光波長の変化がありません。Ca2+が結合前は非蛍光で、Ca2+濃度が上昇すると蛍光を発します。Fluo-3と比べて、Rhod-2は蛍光が弱くCa2+による蛍光の増加が低いインジケーターです。

Rhod-2, Tripotassium salt

図11:Rhod-2, Tripotassium salt

Rhod-2, AM Ester

図12:Rhod-2, AM Ester

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Rhod-2, triammonium salt詳細データ BTI 50020 1 MG
¥40,000
Rhod-2, tripotassium salt詳細データ BTI 50021 1 MG
¥40,000
Rhod-2, trisodium salt詳細データ BTI 50022 1 MG
¥40,000
Rhod-2, AM ester詳細データ BTI 50024 1 MG
¥44,000
Rhod-2, AM ester (special packaging)詳細データ BTI 50023 10*100 UG
¥51,000
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RHOD-590

Rhod-590は、fluo-3よりも長波長の595 nmの吸収波長と616 nmの最大蛍光波長をもっています。Fluo-3と比べてCa2+による蛍光強度の増加が小さいインジケーターです。

Rhod-590, Tripotassium Salt

図13:Rhod-590, Tripotassium Salt

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
RHOD-590, TRIPOTASSIUM SALT詳細データ BTI 50026 500 UG
¥61,000
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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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