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記事ID : 10368
研究用

scAAV ヘルパーフリー発現システム

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セルバイオラボ社のAAVヘルパーフリー発現システムは、リコンビナントヒトAAVウイルス粒子をヘルパーウイルスなしで作製するシステムです。本システムでは、感染性AAV 粒子の生産に必要なアデノウイルス遺伝子はpHelperプラスミド(E2A、E4、VA RNA遺伝子等)上にあり、ヒトAAVベクターDNAと共トランスフェクションされます。E1遺伝子は、239 宿主細胞で恒常的に発現しています。生きたヘルパーウイルスを使用しない本システムは、安全かつ便利なデリバリーシステムです。本システムで用いるAAV-2 ITRを含むウイルスベクターからRep 遺伝子及びCap 遺伝子を取り除き、これらの遺伝子をpAAV-RCプラスミド上に組み込みました。ウイルスベクターからRep 遺伝子及びCap 遺伝子を取り除くことで、目的遺伝子をウイルスゲノムに挿入することができます。

今回新たに紹介するscAAV(自己相補的なAAV)は、一方のITR(Inverted Terminal repeats)でDシーケンス(パッケージングシグナル)が欠損し、terminal resolution siteのミューテーション(Δtrs)が含まれます(図1)。これらがRepを介したニッキングを防ぎ、ダイマーまたはゲノムの自己パッケージングを招きます。

scAAVベクターからdsAAVを作製することで、in vivoin vitro の実験の両方において、形質導入の効率が大幅に改善されます。

scAAVベクターからdsAAVを作製することで、in vivo、in vitro の実験の両方において、形質導入の効率が大幅に改善
図1 これまでのssAAVとscAAVとの比較

特長

  • pHelper プラスミドはE2A、E4、VA RNAアデノウイルス遺伝子をコードしています。ヘルパーアデノウイルスが必要な遺伝子は取り除いています。
  • AAV-DJシステムは、幅広い組織において高効率で感染するように、8種類の異なるAAVのセロタイプからハイブリッドカプシドを作製しています。
  • AAV-DJ/8 は心臓及び脳組織によく取り込まれるようにデザインされたAAV-DJの変異体で、AAV-8とAAV-9によく似ています。
  • 本発現システムはパッケージングプラスミド、発現ベクター、GFPコントロールベクターを含みます。
  • すでにAAV 発現コンストラクトをお持ちのお客様には、発現ベクターの含まれないパッケージングシステムもあります。詳細はお問い合わせください。

構成内容

  • pscAAV-MCS発現ベクター
  • pAAV-RCベクター
  • pHelperベクター
  • pAAV-GFPコントロールベクター

※ 本商品には293細胞は含まれていません。高タイターのリコンビナントAAVをご要望の際は、セルバイオラボ社の293AAV Cell Line(品番:AAV-100)をおすすめします。

プロトコール

scAAV ヘルパーフリーシステム
図2 scAAV ヘルパーフリーシステム

scAAV ヘルパーフリー発現システム

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
scAAV-1 Helper Free Expression System 詳細データ CBL VPK-430-SER1 1 KIT
¥205,000
scAAV-2 Helper Free Expression System 詳細データ CBL VPK-430-SER2 1 KIT
¥205,000
scAAV-3 Helper Free Expression System 詳細データ CBL VPK-430-SER3 1 KIT
お問い合わせ
scAAV-4 Helper Free Expression System 詳細データ CBL VPK-430-SER4 1 KIT
¥205,000
scAAV-5 Helper Free Expression System 詳細データ CBL VPK-430-SER5 1 KIT
¥205,000
scAAV-6 Helper Free Expression System 詳細データ CBL VPK-430-SER6 1 KIT
¥205,000
scAAV-DJ Helper Free Expression System 詳細データ CBL VPK-430-DJ 1 KIT
¥205,000

[注意]品番VPK-430-DJ、品番VPK-430-DJ-8は、アカデミック・非営利団体のお客様のみご購入いただけます。企業のお客様でご購入希望の方におかれましては、恐れ入りますがライセンス契約の必要がございます。詳細はお問い合わせください。

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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