AAV ヘルパーフリー発現システムは、リコンビナントヒトアデノ随伴ウイルス（rAAV）粒子をヘルパーウイルスなしで作製するシステムです。豊富なAAVセロタイプをラインアップしています。
図1 ヘルパーフリーシステム
本システムでは、感染性AAV粒子の生産に必要なアデノウイルス遺伝子はプラスミドpHelper（E2A, E4, VA RNA遺伝子など）上にあり、ヒトAAVベクターDNAと共トランスフェクションされます。E1遺伝子は、293宿主細胞で恒常的に発現しています。
生きたヘルパーウイルスを使用しない本システムは、安全かつ便利なデリバリーシステムです。本システムで用いるAAV-2 ITRを含むウイルスベクターからrep 遺伝子およびcap遺伝子をとりのぞき、これらの遺伝子をpAAV-RCプラスミド上に組み込みました。ウイルスベクターからrep 遺伝子およびcap遺伝子を取り除くことで、目的遺伝子をウイルスゲノムに挿入することができます。
※本商品には293細胞は含まれていません。高タイターのリコンビナントAAVを得るには、セルバイオラボ社の293AAV Cell Line (品番 AAV-100) をお勧めします。
AAV ヘルパーフリー発現システムは、ネイティブのセロタイプ1〜6に加えて、全く新しいAAV-DJおよびAAV-DJ/8が作製できる商品もラインアップしています。
• AAV-DJシステム
DNAシャッフルテクノロジー（図2）によって8種類のネイティブのセロタイプ（AAV-2、 AAV-4、AAV-5、AAV-8、AAV-9、AvianAAV、Bovine AAV、Caprine AAV）を組み合わせたハイブリッドカプシドを調製します。高感染性のリコンビナントAAVが得られ、AAV-2より高効率で様々な細胞・組織に形質導入できます。
• AAV-DJ/8
AAV-DJのヘパリン結合ドメインにおけるポイントミューテーションにより作製しました。AAV-DJ/8システムを用いて作製したリコンビナントAAVは心臓および脳組織に感染する能力において、AAV-8 および AAV-9と類似しています。
図2 カプシドDNAファミリーシャッフルによるAAV-DJの作製
| Cell Line | AAV-1 | AAV-2 | AAV-3 | AAV-4 | AAV-5 | AAV-6 | AAV-8 | AAV-9 | AAV-DJ | AAV-DJ/8 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Huh-7 | 13 | 100 | 2.5 | 0 | 0.1 | 10 | 0.7 | 0 | 500 | 0.2 |
| HEK293 | 25 | 100 | 2.5 | 0.1 | 0.1 | 5 | 0.7 | 0.1 | 500 | 0.3 |
| HeLa | 3 | 100 | 2 | 0.1 | 6.7 | 1 | 0.2 | 0.1 | 667 | 0.2 |
| HepG2 | 3 | 100 | 16.7 | 0.3 | 1.7 | 5 | 0.3 | ND | 1250 | 0.5 |
| Hep1A | 20 | 100 | 0.2 | 1 | 0.1 | 1 | 0.2 | 0 | 400 | 0.1 |
| 911 | 17 | 100 | 11 | 0.2 | 0.1 | 17 | 0.1 | ND | 500 | 0 |
| CHO | 100 | 100 | 14 | 1.4 | 333 | 50 | 10 | 1 | 25000 | 5 |
| COS | 33 | 100 | 33 | 3.3 | 5 | 14 | 2 | 0.5 | 500 | 0.3 |
| MeWo | 10 | 100 | 20 | 0.3 | 6.7 | 10 | 1 | 0.2 | 2857 | 1 |
| NIH3T3 | 10 | 100 | 2.9 | 2.9 | 0.3 | 10 | 0.3 | ND | 500 | 0.1 |
| A549 | 14 | 100 | 20 | ND | 0.5 | 10 | 0.5 | 0.1 | 1000 | 0.1 |
| HT1180 | 20 | 100 | 10 | 0.1 | 0.3 | 33 | 0.5 | 0.1 | 333 | 0.2 |
| Monocytes | 1111 | 100 | ND | ND | 125 | 1429 | ND | ND | 100 | ND |
| Immature DC | 2500 | 100 | ND | ND | 222 | 2857 | ND | ND | 200 | ND |
| Mature DC | 2222 | 100 | ND | ND | 333 | 3333 | ND | ND | 100 | ND |
図3 AAV2-GFPの作製と遺伝子導入
AAV2-GFP はpAAV-GFP、pAAV-RC2、pHelperプラスミドで293AVV細胞の共トランスフェクションによって作製した。ウイルス上清を採取し、293AD細胞を48時間AAV-GFPで感染させた。
1：トランスフェクション前の293AAV細胞
2：トランスフェクション後48時間経過後の293AAV細胞
3：トランスフェクション後48時間経過後の293AAV細胞におけるGFP発現
4：感染後48時間経過後の293AD細胞におけるGFP発現
AAVヘルパーフリー発現システムはいろいろなフォーマット・セロタイプをご用意しています。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
AAV-1 Helper Free Expression System |
CBL | VPK-410-SER1 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-1 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP) |
CBL | VPK-418-SER1 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-2 Helper Free Expression System |
CBL | VPK-410-SER2 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-2 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP) |
CBL | VPK-418-SER2 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-3 Helper Free Expression System |
CBL | VPK-410-SER3 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-3 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro) |
CBL | VPK-415-SER3 | 1 KIT |
お問い合わせ |
| AAV-3 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo) |
CBL | VPK-416-SER3 | 1 KIT |
お問い合わせ |
| AAV-3 Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro) |
CBL | VPK-417-SER3 | 1 KIT |
お問い合わせ |
| AAV-3 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP) |
CBL | VPK-418-SER3 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-3 Helper Free Bicistronic Expression System (Blasticidin) |
CBL | VPK-419-SER3 | 1 KIT |
お問い合わせ |
| AAV-4 Helper Free Expression System |
CBL | VPK-410-SER4 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-4 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP) |
CBL | VPK-418-SER4 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-5 Helper Free Expression System |
CBL | VPK-410-SER5 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-5 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP) |
CBL | VPK-418-SER5 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-6 Helper Free Expression System |
CBL | VPK-410-SER6 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-6 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP) |
CBL | VPK-418-SER6 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-DJ Helper Free Expression System |
CBL | VPK-410-DJ | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-DJ Helper Free Bicistronic Expression System (GFP) |
CBL | VPK-418-DJ | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-DJ/8 Helper Free Expression System |
CBL | VPK-410-DJ-8 | 1 KIT |
￥348,000 |
| AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP) |
CBL | VPK-418-DJ-8 | 1 KIT |
￥348,000 |
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| AAV-DJ Helper Free Packaging System |
CBL | VPK-400-DJ | 1 KIT |
￥273,000 |
| AAV-DJ/8 Helper Free Packaging System |
CBL | VPK-400-DJ-8 | 1 KIT |
￥273,000 |
| AAV-1 Helper Free Packaging System |
CBL | VPK-401 | 1 KIT |
￥273,000 |
| AAV-2 Helper Free Packaging System |
CBL | VPK-402 | 1 KIT |
￥273,000 |
| AAV-3 Helper Free Packaging System |
CBL | VPK-403 | 1 KIT |
￥273,000 |
| AAV-4 Helper Free Packaging System |
CBL | VPK-404 | 1 KIT |
￥273,000 |
| AAV-5 Helper Free Packaging System |
CBL | VPK-405 | 1 KIT |
￥273,000 |
| AAV-6 Helper Free Packaging System |
CBL | VPK-406 | 1 KIT |
￥273,000 |
AAV Rep-Capプラスミドは特定のセロタイプのリコンビナントAAVを調製するための商品です。本プラスミドは既に何れかのAAVパッケージングシステムをお持ちのお客様にご利用いただけます。お持ちのAAVヘルパーフリーパッケージングシステムもしくは発現システムに下記リストの代わりのプラスミドをお使いください。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| pAAV-DJ Vector |
CBL | VPK-420-DJ | 10 UG |
￥176,000 |
| pAAV-DJ/8 Vector |
CBL | VPK-420-DJ-8 | 10 UG |
￥176,000 |
| pAAV-RC1 Vector |
CBL | VPK-421 | 10 UG |
￥176,000 |
| pAAV-RC2 Vector |
CBL | VPK-422 | 10 UG |
￥176,000 |
| pAAV-RC3 Vector |
CBL | VPK-423 | 10 UG |
お問い合わせ |
| pAAV-RC4 Vector |
CBL | VPK-424 | 10 UG |
￥176,000 |
| pAAV-RC5 Vector |
CBL | VPK-425 | 10 UG |
￥176,000 |
| pAAV-RC6 Vector |
CBL | VPK-426 | 10 UG |
￥176,000 |
各AAV発現ベクターはAAVセロタイプに関わらずセルバイオラボ社のAAVヘルパーフリーシステムと一緒にお使いいただけます。既にAAVパッケージングシステムをお持ちで、異なるプロモーターや異なる選択マーカーを使用されるときに、ご利用ください。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| pAAV-MCS Expression Vector |
CBL | VPK-410 | 10 UG [10ug at 0.25ug/ul] |
￥176,000 |
| pAAV-IRES-GFP Expression Vector |
CBL | VPK-418 | 10 UG [10ug at 0.25ug/ul] |
￥176,000 |
| pAAV-MCS Promoterless Expression Vector |
CBL | VPK-411 | 10 UG |
￥176,000 |
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| pAAV-GFP Control Vector |
CBL | AAV-400 | 10 UG [10ug at 0.25ug/ul] |
￥152,000 |
プリメイドのAAVコントロールウイルスです。濃度は 1×1012 GC/mL。
■ プリメイドAAV-GFPウイルス
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| AAV3-GFP Control Virus |
CBL | AAV-303 | 50 UL |
お問い合わせ |
293AAV細胞株は、親株である293細胞から派生した細胞で、表面積が広く平らな形状で培養プレートにより強く接着します。その結果、AAVを高収量で得ることができます。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| 293AAV Cell Line, Human |
CBL | AAV-100 | 1 VIAL |
￥135,000 |
品番の末尾がDJおよびDJ-8のものは、アカデミック・非営利団体のお客様のみご購入いただけます。企業のお客様でご購入希望の方におかれましては、恐れ入りますがライセンス契約の必要がございます。詳細はお問い合わせください。
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
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