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研究用

新しいアデノ随伴ウイルスベクター作製システム!AAV ヘルパーフリー発現システム

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AAV ヘルパーフリー発現システムは、リコンビナントヒトアデノ随伴ウイルス(rAAV)粒子をヘルパーウイルスなしで作製するシステムです。豊富なAAVセロタイプをラインアップしています。

セルバイオラボ社 AAV セロタイプラインアップ

  • AAV 1〜6 (ネイティブセロタイプ)
  • AAV-DJ (新規セロタイプ
    :DNAファミリーシャッフリングによって、8種類の異なるネイティブAAVセロタイプ由来のハイブリッドカプシドを設計。ネイティブAAVセロタイプに比べ、幅広い組織と細胞種に対して有意に高い感染効率を示します。
  • AAV-DJ/8
    :AAV-DJ の変異型。AAV-8やAAV-9に類似し、in vivo で脳組織や他の組織において効率良く取り込まれます。
参考:インフェクション効率

使用目的

AAV のヘルパーフリー発現

ヘルパーフリーアデノ随伴ウイルス発現システム
図1 ヘルパーフリーシステム

本システムでは、感染性AAV粒子の生産に必要なアデノウイルス遺伝子はプラスミドpHelper(E2A, E4, VA RNA遺伝子など)上にあり、ヒトAAVベクターDNAと共トランスフェクションされます。E1遺伝子は、293宿主細胞で恒常的に発現しています。

生きたヘルパーウイルスを使用しない本システムは、安全かつ便利なデリバリーシステムです。本システムで用いるAAV-2 ITRを含むウイルスベクターからrep 遺伝子およびcap遺伝子をとりのぞき、これらの遺伝子をpAAV-RCプラスミド上に組み込みました。ウイルスベクターからrep 遺伝子およびcap遺伝子を取り除くことで、目的遺伝子をウイルスゲノムに挿入することができます。

特長

  • pHelperプラスミドはE2A、E4、VA RNAアデノウイルス遺伝子をコードしています。ヘルパーアデノウイルスが必要な遺伝子は取り除いています。
  • AAV-DJシステムは、幅広い組織において高効率で感染するように、8種類の異なるAAVのセロタイプからハイブリッドカプシドを作製しています(図2)。
  • AAV-DJ/8は心臓および脳組織によく取り込まれるようにデザインされたAAV-DJの変異体で、AAV-8とAAV-9によく似ています(表1)。
  • 本発現システムはパッケージングプラスミド、発現ベクター、GFPコントロールベクターを含みます。

構成内容

  1. pAAV-IRES(MCS) 発現ベクター
  2. pAAV-RC ベクター
  3. pHelper ベクター
  4. pAAV-GFP コントロールベクター

※本商品には293細胞は含まれていません。高タイターのリコンビナントAAVを得るには、セルバイオラボ社の293AAV Cell Line (品番 AAV-100) をお勧めします。

新規セロタイプ AAV-DJ & AAV-DJ/8

AAV ヘルパーフリー発現システムは、ネイティブのセロタイプ1〜6に加えて、全く新しいAAV-DJおよびAAV-DJ/8が作製できる商品もラインアップしています。

• AAV-DJシステム
DNAシャッフルテクノロジー(図2)によって8種類のネイティブのセロタイプ(AAV-2、 AAV-4、AAV-5、AAV-8、AAV-9、AvianAAV、Bovine AAV、Caprine AAV)を組み合わせたハイブリッドカプシドを調製します。高感染性のリコンビナントAAVが得られ、AAV-2より高効率で様々な細胞・組織に形質導入できます。

• AAV-DJ/8
AAV-DJのヘパリン結合ドメインにおけるポイントミューテーションにより作製しました。AAV-DJ/8システムを用いて作製したリコンビナントAAVは心臓および脳組織に感染する能力において、AAV-8 および AAV-9と類似しています。

カプシドDNAファミリーシャッフルによるAAV-DJの作製

図3
カプシドDNAファミリーシャッフルによる
AAV-DJの作製

図2 カプシドDNAファミリーシャッフルによるAAV-DJの作製

AAVインフェクション効率

表1 各セロタイプのin vitro インフェクション比較
Cell Line AAV-1 AAV-2 AAV-3 AAV-4 AAV-5 AAV-6 AAV-8 AAV-9 AAV-DJ AAV-DJ/8
Huh-7 13 100 2.5 0 0.1 10 0.7 0 500 0.2
HEK293 25 100 2.5 0.1 0.1 5 0.7 0.1 500 0.3
HeLa 3 100 2 0.1 6.7 1 0.2 0.1 667 0.2
HepG2 3 100 16.7 0.3 1.7 5 0.3 ND 1250 0.5
Hep1A 20 100 0.2 1 0.1 1 0.2 0 400 0.1
911 17 100 11 0.2 0.1 17 0.1 ND 500 0
CHO 100 100 14 1.4 333 50 10 1 25000 5
COS 33 100 33 3.3 5 14 2 0.5 500 0.3
MeWo 10 100 20 0.3 6.7 10 1 0.2 2857 1
NIH3T3 10 100 2.9 2.9 0.3 10 0.3 ND 500 0.1
A549 14 100 20 ND 0.5 10 0.5 0.1 1000 0.1
HT1180 20 100 10 0.1 0.3 33 0.5 0.1 333 0.2
Monocytes 1111 100 ND ND 125 1429 ND ND 100 ND
Immature DC 2500 100 ND ND 222 2857 ND ND 200 ND
Mature DC 2222 100 ND ND 333 3333 ND ND 100 ND
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アプリケーション例

AAV2-GFPの作製と遺伝子導入
図3 AAV2-GFPの作製と遺伝子導入
AAV2-GFP はpAAV-GFP、pAAV-RC2、pHelperプラスミドで293AVV細胞の共トランスフェクションによって作製した。ウイルス上清を採取し、293AD細胞を48時間AAV-GFPで感染させた。
1:トランスフェクション前の293AAV細胞
2:トランスフェクション後48時間経過後の293AAV細胞
3:トランスフェクション後48時間経過後の293AAV細胞におけるGFP発現
4:感染後48時間経過後の293AD細胞におけるGFP発現

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商品ラインアップ

AAVヘルパーフリー発現システムはいろいろなフォーマット・セロタイプをご用意しています。

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AAV ヘルパーフリー発現システム(コンプリート)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AAV-1 Helper Free Expression System詳細データ CBL VPK-410-SER1 1 KIT
¥205,000
AAV-1 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)詳細データ CBL VPK-415-SER1 1 KIT
¥205,000
AAV-1 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)詳細データ CBL VPK-416-SER1 1 KIT
¥205,000
AAV-1 Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)詳細データ CBL VPK-417-SER1 1 KIT
¥205,000
AAV-1 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)詳細データ CBL VPK-418-SER1 1 KIT
¥205,000
AAV-1 Helper Free Bicistronic Expression System (Blasticidin)詳細データ CBL VPK-419-SER1 1 KIT
¥205,000
AAV-2 Helper Free Expression System詳細データ CBL VPK-410-SER2 1 KIT
¥205,000
AAV-2 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)詳細データ CBL VPK-415-SER2 1 KIT
¥205,000
AAV-2 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)詳細データ CBL VPK-416-SER2 1 KIT
¥205,000
AAV-2 Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)詳細データ CBL VPK-417-SER2 1 KIT
¥205,000
AAV-2 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)詳細データ CBL VPK-418-SER2 1 KIT
¥205,000
AAV-2 Helper Free Bicistronic Expression System (Blasticidin)詳細データ CBL VPK-419-SER2 1 KIT
¥205,000
AAV-3 Helper Free Expression System詳細データ CBL VPK-410-SER3 1 KIT
お問い合わせ
AAV-3 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)詳細データ CBL VPK-415-SER3 1 KIT
お問い合わせ
AAV-3 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)詳細データ CBL VPK-416-SER3 1 KIT
お問い合わせ
AAV-3 Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)詳細データ CBL VPK-417-SER3 1 KIT
お問い合わせ
AAV-3 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)詳細データ CBL VPK-418-SER3 1 KIT
お問い合わせ
AAV-3 Helper Free Bicistronic Expression System (Blasticidin)詳細データ CBL VPK-419-SER3 1 KIT
お問い合わせ
AAV-4 Helper Free Expression System詳細データ CBL VPK-410-SER4 1 KIT
¥205,000
AAV-4 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)詳細データ CBL VPK-415-SER4 1 KIT
¥205,000
AAV-4 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)詳細データ CBL VPK-416-SER4 1 KIT
¥205,000
AAV-4 Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)詳細データ CBL VPK-417-SER4 1 KIT
¥205,000
AAV-4 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)詳細データ CBL VPK-418-SER4 1 KIT
¥205,000
AAV-4 Helper Free Bicistronic Expression System (Blasticidin)詳細データ CBL VPK-419-SER4 1 KIT
¥205,000
AAV-5 Helper Free Expression System詳細データ CBL VPK-410-SER5 1 KIT
¥205,000
AAV-5 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)詳細データ CBL VPK-415-SER5 1 KIT
¥205,000
AAV-5 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)詳細データ CBL VPK-416-SER5 1 KIT
¥205,000
AAV-5 Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)詳細データ CBL VPK-417-SER5 1 KIT
¥205,000
AAV-5 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)詳細データ CBL VPK-418-SER5 1 KIT
¥205,000
AAV-5 Helper Free Bicistronic Expression System (Blasticidin)詳細データ CBL VPK-419-SER5 1 KIT
¥205,000
AAV-6 Helper Free Expression System詳細データ CBL VPK-410-SER6 1 KIT
¥205,000
AAV-6 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)詳細データ CBL VPK-415-SER6 1 KIT
¥205,000
AAV-6 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)詳細データ CBL VPK-416-SER6 1 KIT
¥205,000
AAV-6 Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)詳細データ CBL VPK-417-SER6 1 KIT
¥205,000
AAV-6 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)詳細データ CBL VPK-418-SER6 1 KIT
¥205,000
AAV-6 Helper Free Bicistronic Expression System (Blasticidin)詳細データ CBL VPK-419-SER6 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ Helper Free Expression System詳細データ CBL VPK-410-DJ 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)詳細データ CBL VPK-415-DJ 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)詳細データ CBL VPK-416-DJ 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)詳細データ CBL VPK-417-DJ 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)詳細データ CBL VPK-418-DJ 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ Helper Free Bicistronic Expression System (Blasticidin)詳細データ CBL VPK-419-DJ 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ/8 Helper Free Expression System詳細データ CBL VPK-410-DJ-8 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)詳細データ CBL VPK-415-DJ-8 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)詳細データ CBL VPK-416-DJ-8 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)詳細データ CBL VPK-417-DJ-8 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)詳細データ CBL VPK-418-DJ-8 1 KIT
¥205,000
AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Blasticidin)詳細データ CBL VPK-419-DJ-8 1 KIT
¥205,000
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AAV ヘルパーフリーパッケージングシステム

既にAAV 発現コンストラクトをお持ちのお客様にご利用いただけます。
上記システムにAAV 発現ベクターが含まれない商品です。
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AAV-DJ Helper Free Packaging System詳細データ CBL VPK-400-DJ 1 KIT
¥159,000
AAV-DJ/8 Helper Free Packaging System詳細データ CBL VPK-400-DJ-8 1 KIT
¥159,000
AAV-1 Helper Free Packaging System詳細データ CBL VPK-401 1 KIT
¥159,000
AAV-2 Helper Free Packaging System詳細データ CBL VPK-402 1 KIT
¥159,000
AAV-3 Helper Free Packaging System詳細データ CBL VPK-403 1 KIT
お問い合わせ
AAV-4 Helper Free Packaging System詳細データ CBL VPK-404 1 KIT
¥159,000
AAV-5 Helper Free Packaging System詳細データ CBL VPK-405 1 KIT
¥159,000
AAV-6 Helper Free Packaging System詳細データ CBL VPK-406 1 KIT
¥159,000
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AAV Rep-Capプラスミド(セロタイプ別)

AAV Rep-Capプラスミドは特定のセロタイプのリコンビナントAAVを調製するための商品です。本プラスミドは既に何れかのAAVパッケージングシステムをお持ちのお客様にご利用いただけます。お持ちのAAVヘルパーフリーパッケージングシステムもしくは発現システムに下記リストの代わりのプラスミドをお使いください。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
pAAV-DJ Vector詳細データ CBL VPK-420-DJ 10 UG
¥103,000
pAAV-DJ/8 Vector詳細データ CBL VPK-420-DJ-8 10 UG
¥103,000
pAAV-RC1 Vector 詳細データ CBL VPK-421 10 UG
¥103,000
pAAV-RC2 Vector 詳細データ CBL VPK-422 10 UG
¥103,000
pAAV-RC3 Vector詳細データ CBL VPK-423 10 UG
お問い合わせ
pAAV-RC4 Vector詳細データ CBL VPK-424 10 UG
お問い合わせ
pAAV-RC5 Vector詳細データ CBL VPK-425 10 UG
¥103,000
pAAV-RC6 Vector 詳細データ CBL VPK-426 10 UG
¥103,000
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AAV発現ベクター

各AAV発現ベクターはAAVセロタイプに関わらずセルバイオラボ社のAAVヘルパーフリーシステムと一緒にお使いいただけます。既にAAVパッケージングシステムをお持ちで、異なるプロモーターや異なる選択マーカーを使用されるときに、ご利用ください。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
pAAV-MCS Expression Vector詳細データ CBL VPK-410 10 UG
[10ug at 0.25ug/ul]
¥103,000
pAAV-IRES-Puro Expression Vector詳細データ CBL VPK-415 10 UG
[10ug at 0.25ug/ul]
¥103,000
pAAV-IRES-Neo Expression Vector詳細データ CBL VPK-416 10 UG
[10ug at 0.25ug/ul]
¥103,000
pAAV-IRES-Hygro Expression Vector詳細データ CBL VPK-417 10 UG
[10ug at 0.25ug/ul]
¥103,000
pAAV-IRES-GFP Expression Vector詳細データ CBL VPK-418 10 UG
[10ug at 0.25ug/ul]
¥103,000
pAAV-IRES-Bsd Expression Vector詳細データ CBL VPK-419 10 UG
[10ug at 0.25ug/ul]
¥103,000
pAAV-MCS Promoterless Expression Vector詳細データ CBL VPK-411 10 UG
¥103,000
pAAV-U6-Puro Expression Vector詳細データ CBL VPK-412 10 UG
販売終了
pAAV-U6-GFP Expression Vector詳細データ CBL VPK-413 10 UG
販売終了
pscAAV-MCS Expression Vector 詳細データ CBL VPK-430 10 UG
[10ug at 0.25ug/ul]
¥103,000
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AAVヘルパーフリーコントロールベクター

既にAAVパッケージングシステムをお持ちで、トランスダクションコントロールウイルスを調製される際にご利用ください。
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
pAAV-GFP Control Vector詳細データ CBL AAV-400 10 UG
[10ug at 0.25ug/ul]
¥89,000
pAAV-Cre Control Vector詳細データ CBL AAV-401 10 UG
[10ug at 0.25ug/ul]
¥89,000
pAAV-LacZ Control Vector詳細データ CBL AAV-402 10 UG
[10ug at 0.25ug/ul]
¥89,000
pscAAV-GFP Control Vector 詳細データ CBL AAV-410 10 UG
¥89,000
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プリメイドAAVコントロールウイルス

プリメイドのAAVコントロールウイルスです。濃度は 1×1012 GC/mL。

■ プリメイドAAV-GFPウイルス

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AAV1-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-301 50 UL
販売終了
AAV2-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-302 50 UL
販売終了
AAV3-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-303 50 UL
お問い合わせ
AAV4-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-304 50 UL
販売終了
AAV5-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-305 50 UL
販売終了
AAV6-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-306 50 UL
販売終了
scAAV1-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-331 50 UL
販売終了
scAAV2-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-332 50 UL
¥167,000
scAAV3-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-333 50 UL
販売終了
scAAV4-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-334 50 UL
販売終了
scAAV5-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-335 50 UL
販売終了
scAAV6-GFP Control Virus詳細データ CBL AAV-336 50 UL
販売終了
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■ プリメイドAAV-Creウイルス

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AAV1-Cre Control Virus詳細データ CBL AAV-311 50 UL
販売終了
AAV2-Cre Control Virus詳細データ CBL AAV-310 50 UL
販売終了
AAV3-Cre Control Virus詳細データ CBL AAV-313 50 UL
お問い合わせ
AAV4-Cre Control Virus詳細データ CBL AAV-314 50 UL
販売終了
AAV5-Cre Control Virus詳細データ CBL AAV-315 50 UL
販売終了
AAV6-Cre Control Virus詳細データ CBL AAV-316 50 UL
販売終了
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■ プリメイドAAV-Luciferaseウイルス

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AAV1-Luc Control Virus詳細データ CBL AAV-321 50 UL
販売終了
AAV2-Luc Control Virus詳細データ CBL AAV-320 50 UL
販売終了
AAV3-Luc Control Virus詳細データ CBL AAV-323 50 UL
お問い合わせ
AAV4-Luc Control Virus詳細データ CBL AAV-324 50 UL
販売終了
AAV5-Luc Control Virus詳細データ CBL AAV-325 50 UL
販売終了
AAV6-Luc Control Virus詳細データ CBL AAV-326 50 UL
販売終了
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■ プリメイドAAV-LacZウイルス

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AAV1-LacZ Control Virus詳細データ CBL AAV-341 50 UL
販売終了
AAV2-LacZ Control Virus詳細データ CBL AAV-342 50 UL
販売終了
AAV3-LacZ Control Virus詳細データ CBL AAV-343 50 UL
お問い合わせ
AAV4-LacZ Control Virus詳細データ CBL AAV-344 50 UL
販売終了
AAV5-LacZ Control Virus詳細データ CBL AAV-345 50 UL
販売終了
AAV6-LacZ Control Virus詳細データ CBL AAV-346 50 UL
販売終了
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■ プリメイドAAV-Nullウイルス

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AAV1 Null Control Virus詳細データ CBL AAV-351 50 UL
販売終了
AAV2 Null Control Virus詳細データ CBL AAV-352 50 UL
販売終了
AAV3 Null Control Virus詳細データ CBL AAV-353 50 UL
お問い合わせ
AAV4 Null Control Virus詳細データ CBL AAV-354 50 UL
販売終了
AAV5 Null Control Virus詳細データ CBL AAV-355 50 UL
販売終了
AAV6 Null Control Virus詳細データ CBL AAV-356 50 UL
販売終了
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AAVパッケージング細胞

293AAV細胞株は、親株である293細胞から派生した細胞で、表面積が広く平らな形状で培養プレートにより強く接着します。その結果、AAVを高収量で得ることができます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
293AAV Cell Line詳細データ CBL AAV-100 1 VIAL
¥79,000
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ico_caution_s.png品番の末尾がDJおよびDJ-8のものは、アカデミック・非営利団体のお客様のみご購入いただけます。企業のお客様でご購入希望の方におかれましては、恐れ入りますがライセンス契約の必要がございます。詳細はお問い合わせください。

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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

お問い合わせ

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