トランスフェクションとは?
トランスフェクションは、プラスミドやsiRNAのような”外来”核酸を細胞に導入することで、それぞれ目的の遺伝子を過剰発現または発現抑制させます。トランスフェクションにより、さまざまな細胞状況における特定の遺伝子の発現の機能評価が可能になります。核酸の種類や細胞の種類に応じて、多くの異なるトランスフェクションプロトコールを使用できます。トランスフェクションの 3 つの主な方法は、化学的 (例: カチオン性脂質)、物理的 (例: エレクトロポレーション)、および生物学的 (例: ウイルス形質導入) 方法です。新たに導入された核酸は、遺伝子が限られた期間のみ発現し複製されない一過性に存在する場合と、遺伝子がレシピエント細胞のゲノムに組み込まれる安定的に存在する場合があります。トランスフェクション後、遺伝子をゲノムに安定的に組み込むための重要なポイントは、適切な選択用抗生物質を用いて細胞培養時の選択圧を維持することです。
免疫細胞のようなトランスフェクションが難しい細胞は、外来核酸を検出する強力な細胞質センサーを発現していることがよくあります。したがって、核酸の発現を促進し、トランスフェクションの成功を大幅に向上させるには、これらの防御を無効にするためトランスフェクションエンハンサーまたはブースターが必要になります。