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記事ID : 41174
研究用

エクソソームの膜染色に 脂質膜染色蛍光色素CellBrite™ Steady & CellBrite™ Fix

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エクソソームの膜染色に

細胞外小胞(Extracellular Vesicles)は、細胞から分泌される小さな粒子で、細胞内のメッセンジャーとして機能し、ある細胞から別の細胞へタンパク質やRNA等を運ぶと考えられています。細胞外小胞にはいくつか種類があり、機能、内包物、大きさが異なり、直径が30nm程度のものから1000nmのものまであります。細胞外小胞にはエクソソームがあり、サイズは30〜150 nm です。細胞外小胞は多胞体(Multivesicular Body)と呼ばれる細胞内のコンパートメント内で発生しますが、これ自体はエンドソームの侵食に由来します。小胞は、多胞体が細胞膜と融合して内包物を放出する際に放出されます。

バイオメディカル研究では、エクソソームならびにその内包物は、がんやその他の疾患の診断用バイオマーカーとして用いるための研究が進められています。細胞外小胞およびエクソソームは、超遠心分離、PEG沈殿、および免疫キャプチャービーズなどの技術を用いて、血液または他の生物学的流体から単離されています。

細胞外小胞とエクソソソームは、脂質二重層で囲まれた小胞です。これらの膜は、細胞膜の染色に用いられるのと同じ色素を用いて染色することができます。しかし、すべての色素がエクソソームの染色に同じように適しているわけではありません。ビオチウム社は、鮮やかな染色を示し、凝集を最小限に抑えた(あるいは全く凝集しない)蛍光色素を各色提供しています。

 

CellBrite™ Steady Membrane Stains

CellBrite™ steady色素は、ユニークな蛍光色素です。長期的な細胞イメージング研究用に設計されており、フローサイトメトリーで検出するために細胞外小胞の染色性に優れ、凝集を最小限に抑えた明るい染色を示します。CellBrite™ steady色素は複数色で提供しており、CellBrite™ Steady 488、CellBrite™ Steady 550、CellBrite™ Steady 650で細胞外小胞の染色を確認しています。

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図1. 濃縮したエクソソームを、10X CellBrite Steady 488で染色した(右)。バッファー中のCellBriteSteady 488と比較して、特異的な染色が見られた(左)。エクソソームは、FITCチャネルのCytoflexLXフローサイトメーターで検出した。

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図2. 濃縮したエクソソームは、0.5X CellBrite Steady 550で染色した(右)。バッファー中のCellBriteSteady 550と比較して、特異的な染色が見られた(左)。エクソソームは、PEチャネルのCytoflexLXフローサイトメーターで検出した。

BTI_301051_03.jpg

図3. 濃縮したエクソソームを、2X CellBrite Steady 650で染色した(右)。バッファー中のCellBriteSteady 650と比較して、特異的な染色が見られた(左)。エクソソームは、APCチャネルのCytoflexLXフローサイトメーターで検出した。

 
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
CellBriteTM Steady 405 Membrane Staining Kit詳細データ BTI 30105 1 KIT
[500 Labelings]
¥191,000
CellBriteTM Steady 405 Membrane Staining Kit詳細データ BTI 30105-T 1 KIT
[100 Labelings]
¥51,000
CellBriteTM Steady 488 Membrane Staining Kit詳細データ BTI 30106 1 KIT
[500 Labelings]
¥191,000
CellBriteTM Steady 488 Membrane Staining Kit詳細データ BTI 30106-T 1 KIT
[100 Labelings]
¥51,000
CellBriteTM Steady 550 Membrane Staining Kit詳細データ BTI 30107 1 KIT
[500 Labelings]
¥191,000
CellBriteTM Steady 550 Membrane Staining Kit詳細データ BTI 30107-T 1 KIT
[100 Labelings]
¥51,000
CellBriteTM Steady 650 Membrane Staining Kit詳細データ BTI 30108 1 KIT
[500 Labelings]
¥191,000
CellBriteTM Steady 650 Membrane Staining Kit詳細データ BTI 30108-T 1 KIT
[100 Labelings]
¥51,000
CellBriteTM Steady 685 Membrane Staining Kit詳細データ BTI 30109 1 KIT
[500 Labelings]
¥191,000
CellBriteTM Steady 685 Membrane Staining Kit詳細データ BTI 30109-T 1 KIT
[100 Labelings]
¥51,000
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CellBrite™ Fix membrane stain

CellBrite™ Fix Membrane Stains は、細胞膜に蓄積して蛍光を発する蛍光色素で、膜タンパク質に共有結合するためのアミン反応性基を持っています。CellBrite™ Fix Membrane Stainsは、Santiana氏らのウイルス感染における小胞囲い込みの役割を調査する研究において、ウイルス粒子を含む細胞外小胞の染色に使用されました。その結果、CellBrite™ Fix 488は、ノロウイルスを含む細胞外小胞で処理した培養マウスマクロファージ様細胞の相対的な感染率を比較するために、超解像顕微鏡や共焦点顕微鏡で単離した細胞外小胞を染色するのに適していることがわかりました。

参考文献

  1. Vesicle-Cloaked Virus Clusters Are Optimal Units for Inter-organismal Viral Transmission.
    Santiana M, Altan-Bonnet N, et al. Cell Host & Microbe, August 8, 2018
    PMID: 30092198 PMCID: PMC6226266 DOI: 10.1016/j.chom.2018.07.006

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
CellBriteTM Fix 488 Membrane Labeling Kit詳細データ BTI 30090 1 KIT
[5 vials]
¥145,000
CellBriteTM Fix 488 Membrane Labeling Kit, Trial Size詳細データ BTI 30090-T 1 KIT
[1 vial]
¥42,000
CellBriteTM Fix 555 Membrane Labeling Kit詳細データ BTI 30088 1 KIT
[5 vials]
¥125,000
CellBriteTM Fix 555 Membrane Labeling Kit, Trial Size詳細データ BTI 30088-T 1 KIT
[1 vial]
¥35,000
CellBriteTM Fix 640 Membrane Labeling Kit詳細データ BTI 30089 1 KIT
[5 vials]
¥125,000
CellBriteTM Fix 640 Membrane Labeling Kit, Trial Size詳細データ BTI 30089-T 1 KIT
[1 vial]
¥35,000
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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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