本キットは、透過処理済み細胞と固定化細胞の両方で細胞増殖をモニターするための便利でシンプルな分析キットです。 独自の核酸染色剤を利用して、細胞周期の進行を監視するように設計されています。
背景
細胞増殖と生存率は、数々のパラメータをモニターして評価することができます。正常細胞では、細胞周期の進行によってDNA密度が変わります。細胞周期は、G0/G1、S、G2、およびM期という4種の連続した時期で構成されています。DNA複製はS期に起こります。この新しく合成されたDNAが2つの娘細胞へと等しく分割されます。その後、適切な蛍光核酸指示薬を用いてDNAの内容物を測定します。この時、生じるシグナルがDNAの質量に比例します。
特長
- 独自の核酸染色剤で生細胞を染色
- 使いやすく、シンプルな検出キットです。
- さまざまな波長に対応したキットを取り揃えております。
構成内容
- Component A: 200X Nuclear Green™ LCS1, 1 vial (250 μL)
または 500X Nuclear Red™ LCS2 , 1 Vial (100 μL)
または500X Nuclear Violet™ , 1 vial (100 μL) - Component B: Assay Buffer, 1 bottle (50 mL)
原理
細胞透過性色素は細胞DNAに結合し、蛍光強度はDNA含有量に正比例します。これらの染色された細胞集団のフローサイトメトリー分析により、各細胞周期段階における細胞の割合が明らかになります。
プロトコール概要
- 細胞とテスト化合物を調製 (細胞密度:5 × 105 から 1 × 106 cells/mL)
- 細胞溶液にNuclear Green™LCS/ Nuclear Red™LCS/ Nuclear Violet™を添加
- 37°Cでインキュベート (5% CO2 incubator) [Nuclear Violet™は室温]
- フローサイトメーターで分析
Nuclear Green™LCS: FL1 channel (Ex/Em = 490/525 nm)
Nuclear Red™LCS: PE-Texas Red channel (Ex/Em = 488 nm/615 nm)
Nuclear Violet™: 405 nm violet laser excitation
製品データ
図1. 増殖性かつカンプトテシン処理Jurkat細胞のDNAプロファイル。Jurkat細胞を37℃の5% CO2培養器内で、20μMカンプトテシンにより8時間処理(青色)または無処理(赤色)した。その後、Cell Meter™ Fluorimetric Cell Cycle Assay kit(品番; 22841)の指示に従いアッセイを行った。Nuclear Green™ LCS1(component A)の蛍光強度をFACS Calibur™フローサイトメーターのFL1チャネルで測定した。増殖性のJurkat細胞では、 Nuclear Green™ LCS1で染色した核がG1、S、およびG2期(赤色)を示した。カンプトテシン処理したアポトーシス性細胞(B)は、 Nuclear Green™ LCS1の蛍光強度が低下し、SとG2期が減少していた。
生細胞用 Cell Meter™ 細胞周期アッセイキット
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
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Cell MeterTM Fluorimetric Live Cell Cycle Assay Kit *Red Fluorescence Optimized for Flow Cytometry* | ABD | 22860 | 1 KIT [100 tests] |
¥69,000 |
Cell MeterTM Fluorimetric Live Cell Cycle Assay Kit *Green Fluorescence Optimized for Flow Cytometry* | ABD | 22841 | 1 KIT [100 Tests] |
¥46,000 |
Cell MeterTM Fluorimetric Live Cell Cycle Assay Kit *Optimized for 405 nm Violet Laser Excitation* | ABD | 22845 | 1 KIT [100 Tests] |
¥46,000 |
固定細胞用 Cell Meter™ 細胞周期アッセイキット
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
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Cell MeterTM Fluorimetric Fixed Cell Cycle Assay Kit *Red Fluorescence Optimized for Flow Cytometry* | ABD | 22842 | 1 KIT [100 Tests] |
¥46,000 |
関連情報
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について