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記事ID : 17338
研究用

自動化測定にも適応!独自基質 Amplite™ Red を使った高感度キット Amplite™ 蛍光カタラーゼアッセイキット(赤色蛍光)

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Amplite™ 蛍光カタラーゼアッセイキットは、蛍光プローブ(Amplite™ Red)を用いて、カタラーゼ活性を迅速・高感度に測定するキットです。

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背景

カタラーゼ(Catalase)

カタラーゼは、酸素にさらされているほぼ全ての生物で見つかっている、酸化物ヘムを含むレドックス酵素です。細胞内小器官であるペルオキシソームに局在しています。ROS の一種である過酸化水素は、通性好気性代謝 および オキシダーゼやスーパーオキシドディスムターゼ反応の有害な ROS 産物です。カタラーゼは、H2O2 の過度の蓄積を妨げることによって、副産物として H2O2 を生産する重要な細胞プロセスが問題なく起こるように働きます。

使用目的

本キットは、カタラーゼ活性を迅速で高感度に測定します。96ウェル/384ウェルマイクロタイタープレートフォーマットに対応しており、分離ステップがないため自動化に適応します。カタラーゼは、H2O2 に反応すると水と酸素を生成しますが、Amplite™ Red 基質もまた H2O2 に反応し、赤色蛍光産物を生成します。そのため、蛍光強度の減少はカタラーゼ活性に比例します。Amplite™ Red 基質は、二重記録モードで使用することが可能です。蛍光シグナルは、蛍光マイクロプレートリーダー(Ex/Em = 540/590 nm)、もしくは吸光度マイクロプレートリーダー(〜576 nm)で容易に検出できます。
検出限界: 30 mU/mL カタラーゼ(100 µL 反応液中)

構成内容

  • Component A: Amplite™ Red
  • Component B: H2O2
  • Component C: アッセイバッファー
  • Component D: 西洋ワサビペルオキシダーゼ
  • Component E: カタラーゼスタンダード
  • Component F: DMSO

プロトコール概要

  1. カタラーゼスタンダード/テストサンプル(50 µL)を用意
  2. H2O2 アッセイバッファー(50 µL)を添加
  3. 室温で 10〜30 分インキュベート
  4. カタラーゼアッセイ混合液(50µL)を添加
  5. 室温で 10〜30 分インキュベート
  6. 蛍光強度の上昇をモニター(Ex/Em = 540/590 nm)

Amplite™ 蛍光カタラーゼアッセイキット(赤色蛍光)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Amplite(R) Fluorimetric Catalase Assay Kit *Red Fluorescence*詳細データ ABD 11306 1 KIT
[200 Tests]
¥48,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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