Amplite™ 蛍光カタラーゼアッセイキットは、蛍光プローブ(Amplite™ Red)を用いて、カタラーゼ活性を迅速・高感度に測定するキットです。
背景
カタラーゼ(Catalase)
カタラーゼは、酸素にさらされているほぼ全ての生物で見つかっている、酸化物ヘムを含むレドックス酵素です。細胞内小器官であるペルオキシソームに局在しています。ROS の一種である過酸化水素は、通性好気性代謝 および オキシダーゼやスーパーオキシドディスムターゼ反応の有害な ROS 産物です。カタラーゼは、H2O2 の過度の蓄積を妨げることによって、副産物として H2O2 を生産する重要な細胞プロセスが問題なく起こるように働きます。
使用目的
本キットは、カタラーゼ活性を迅速で高感度に測定します。96ウェル/384ウェルマイクロタイタープレートフォーマットに対応しており、分離ステップがないため自動化に適応します。カタラーゼは、H2O2 に反応すると水と酸素を生成しますが、Amplite™ Red 基質もまた H2O2 に反応し、赤色蛍光産物を生成します。そのため、蛍光強度の減少はカタラーゼ活性に比例します。Amplite™ Red 基質は、二重記録モードで使用することが可能です。蛍光シグナルは、蛍光マイクロプレートリーダー(Ex/Em = 540/590 nm)、もしくは吸光度マイクロプレートリーダー(〜576 nm)で容易に検出できます。
検出限界: 30 mU/mL カタラーゼ(100 µL 反応液中)
構成内容
- Component A: Amplite™ Red
- Component B: H2O2
- Component C: アッセイバッファー
- Component D: 西洋ワサビペルオキシダーゼ
- Component E: カタラーゼスタンダード
- Component F: DMSO
プロトコール概要
- カタラーゼスタンダード/テストサンプル(50 µL)を用意
- H2O2 アッセイバッファー(50 µL)を添加
- 室温で 10〜30 分インキュベート
- カタラーゼアッセイ混合液(50µL)を添加
- 室温で 10〜30 分インキュベート
- 蛍光強度の上昇をモニター(Ex/Em = 540/590 nm)
Amplite™ 蛍光カタラーゼアッセイキット(赤色蛍光)
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
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Amplite(R) Fluorimetric Catalase Assay Kit *Red Fluorescence* | ABD | 11306 | 1 KIT [200 Tests] |
¥48,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
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