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記事ID : 15438
研究用

血清や血漿、尿、食品サンプル中のグルコースを高感度検出グルコース測定アッセイ(蛍光)

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食品や生体試料中(血清、血漿、ライセート、尿、細胞培養上清)の総グルコース量を蛍光測定するキットです。

本製品は、グルコースオキシダーゼでグルコースを酸化して生じる過酸化水素を、蛍光プローブを用いて検出します。96ウェルプレートフォーマットで500アッセイ分の試薬を含みます。

特長

  • 血清、血漿、ライセート、尿、細胞培養上清および食品試料に適用
  • 検出限界:約 1.56 µM グルコース
  • グルコーススタンダードが付属

構成内容

  • グルコーススタンダード
  • 10X アッセイバッファー
  • 蛍光プローブ
  • HRP
  • グルコースオキシダーゼ

アッセイ原理

Cell Biolabs社のグルコースアッセイキットは、食品または生体試料中の総グルコースを測定します。

グルコースは、最初にグルコースオキシダーゼによって酸化され、D-グルコン酸と過酸化水素が生成します。過酸化水素は、その後、特異性の高い蛍光プローブを用いて検出されます。プローブと過酸化水素は1:1で結合し、HRP(Horseradish peroxidase)がその反応を触媒します。

サンプルおよびスタンダードを45分間インキュベートし、次いで、標準的な96ウェル蛍光プレートリーダーで測定します。サンプル濃度は、96ウェルマイクロタイタープレートフォーマット内のグルコーススタンダードと比較して算出されます。

グルコース蛍光アッセイの原理
図1.グルコース蛍光アッセイの原理

プロトコール

  1. キット使用前に全ての試薬を混合、調製してください。
    (サンプルおよびスタンダードの各試料は二連または三連でのアッセイを推奨します。)
  2. 蛍光プレートリーダーに適合する黒色96ウェルプレートに、スタンダードまたは未知のサンプル 50 μLを添加します。
  3. 各ウェルに反応液ミックス 50 μLを加え、よく混合します。遮光、37℃の条件で30〜45分間インキュベートします。
    Note: This assay is continuous (not terminated) and therefore may be measured at multiple time points to follow the reaction kinetics.
  4. 蛍光マイクロプレートリーダーでプレートを測定します(励起:530-570 nm、蛍光:590-600 nm)。
  5. サンプルのRFU値とスタンダードカーブを比較することで、サンプル内のグルコース濃度を計算します。

使用例

グルコーススタンダードカーブ
図2.グルコーススタンダードカーブ

グルコースアッセイキット(蛍光)を用いて、ヒト血清中のグルコースを測定
図3.グルコースアッセイキット(蛍光)を用いて、ヒト血清中のグルコースを測定

グルコース測定アッセイ(蛍光)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Glucose Assay Kit (Fluorometric)詳細データ CBL STA-681 500 ASSAY
¥82,000

グルコースアッセイキットの比較

比色法と蛍光法
品名 品番 アッセイ数感度 適用サンプル
グルコース測定アッセイ(比色) STA-680
500 アッセイ 6.25 μM
  • 血清、血漿
  • ライセート
  • 尿
  • 細胞培養上清
  • 食品試料
グルコース測定アッセイ(蛍光) STA-681
500 アッセイ 1.56 µM
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