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簡便なプロトコルでGPCRの活性を高感度に評価 INDIGO Biosciences社 GPCRアッセイキット

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メーカー名：Indigo Biosciences Inc.

INDIGO社は核内受容体のスペシャリストとして、多数のターゲットに対するレポーターアッセイキットを提供しております。その経験を活かし、この度INDIGO社はGPCRに対するレポーターアッセイキットを構築いたしました。既存のアッセイ系に比べ高感度かつスピーディに評価可能な使い切りのフォーマットであるため、GPCRに対する小規模な活性評価に最適です。（INDIGO社の核内受容体レポーターアッセイキットの詳細はこちら）

特長

レポーターアッセイにより高感度に活性を評価
アッセイ用細胞や培地、検出試薬、プレート、ポジコン等が全て入ったキット
使い切りの簡便なプロトコル（図1）
96 well x 1 plate、32 well x 3 plateもしくは384 well x 1 plateでのご提供
多数の化合物でのバリデーションデータ（図2, 図3）

構成内容

レポーターアッセイ細胞
細胞解凍・培養用試薬 (Cell Recovery Medium: CRM)
化合物希釈・アッセイ用試薬 (Compound Screening Medium: CSM)
検出試薬 (Detection Substrate, Detection Buffer)
リファレンスアゴニスト
アッセイプレート (White, sterile, cell-culture ready assay plate)

キットの利用イメージ

図1: キットの利用イメージ
細胞の播種から2-3日程度でアッセイが完了する。

データ例

Agonistの評価データ

Antagonistの評価データ

図2: Cannabinoid Type 1 Receptor (CB1R) アッセイキットのバリデーションデータ
左図: 報告されている多くの薬剤で活性が確認できたほか、それぞれのefficacyやpotencyの強弱を比較することができた。
右図: FK-506のように非常に強い阻害剤 (IC₅₀ ≒ 0.2 nM) でも阻害が確認された。

GLP-1Rの活性化アッセイ

GLP-1Rの阻害アッセイ

図3: GLP-1Rアッセイキットのバリデーションデータ
左図: 内在性のリガンドであるGLP-1のほか、2型糖尿病の治療薬として用いられているLiraglutide等の医薬品でも活性が見られた。
右図: GLP-1Rに対するアンタゴニストであるVU0650991の活性を評価したところ、そのIC₅₀値は1.2 µMと既存のアッセイと遜色ない値を示した。